王淑萍，田 甜

（長春工程學(xué)院理學(xué)院，長春130012）

黃芪（Radix Astragalus）是豆科植物中常用的中草藥，黃芪多糖（Astragalus Polysacharin，APS）是黃芪中最重要的天然有效成分，是黃芪藥理作用中起決定性因素的一類大分子化合物，具有促進免疫器官功能和抗體生成，抗菌抗病毒和抗腫瘤，防衰老及抗輻射，雙向調(diào)節(jié)血糖等作用［1－4］。黃芪多糖的多種生物活性及良好的臨床效果已成為多年來國內(nèi)外中藥提取及中草藥現(xiàn)代化研究的焦點之一［5－6］。自1981年黃芪多糖被提取分離以來，研究報道不斷增多［5－6］，作用范圍日益擴大，對黃芪多糖的研究引起了人們的極大關(guān)注。但是傳統(tǒng)黃芪多糖的提取工藝得到多糖粗品的收率極低，加上提取成本很高，使得黃芪多糖的開發(fā)利用受到限制。為了進一步開發(fā)利用該類活性成分，許多學(xué)者在研究黃芪多糖組成、結(jié)構(gòu)和產(chǎn)物活性的同時，對其提取分離工藝進行了研究，以期找出一種更合理、更可行的生產(chǎn)工藝［1］。本文采用溫浸法對不同粉碎粒度對黃芪多糖提取率的影響進行了研究，為黃芪多糖的大規(guī)模開發(fā)和應(yīng)用提供了科學(xué)資料和依據(jù)。

1 實驗部分

1.1 實驗主要儀器、試劑及材料

電子天平（上海天平儀器廠，F(xiàn)A1004）；紫外可見分光光度計（上海精密科學(xué)儀器有限公司，UV755B）；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海躍進醫(yī)療器械廠，101－1－BS）；恒溫水浴鍋（河北冀驊市航天儀器廠，DZKW－D）；循環(huán)水式多用真空泵（上海豫康科教儀器設(shè)備有限公司，SHB－ⅢA）；酒精計（河北省河間市黎民居儀表廠）；葡萄糖標準品（上海金穗生物科技有限公司，色譜純，批號：20131217）；黃芪飲片（購之于長春市人民大藥房，經(jīng)鑒定為蒙黃芪，產(chǎn)地甘肅）；實驗所用試劑均為北京化工廠生產(chǎn)（分析純）。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準曲線的繪制［7］

準確稱取葡萄糖標準品10mg于100mL容量瓶中，加去離子水稀釋至刻度，搖勻，質(zhì)量濃度為0.1mg／mL。分別吸取配制好的葡萄糖標準溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于10mL容量瓶中，分別加去離子水至2mL，加入5%的苯酚溶液1mL，搖勻后迅速加入5mL濃硫酸顯色，振搖5min，在沸水浴上加熱15min后于冷水浴中冷卻30min。在490nm處以試劑為空白測定吸光度A。

1.2.2 黃芪多糖的提取

取黃芪飲片粉碎，分別過80目、45目、30目篩，分別稱取40g粉末置于250mL容量瓶中，按1∶10的料液比加去離子水，放入沸水浴中提取1.5h，提取液抽濾，濾渣按照1∶8料液比加水，再次提取1h，抽濾，合并2次濾液，濾液濃縮至1∶1（g／mL）

1.2.3 黃芪多糖的分離

將濃縮至1∶1的提取液分別按照1∶3加入95%的乙醇溶液，邊加邊攪拌，室溫靜置過夜，棄去上清液。沉淀用50mL無水乙醇洗滌一次，沉淀放置2h，揮發(fā)乙醇后，稱膏重。沉淀物放入真空干燥箱干燥12h，稱重。

1.2.4 95%乙醇沉淀物糖含量測定

分別取80目、45目、30目95%乙醇沉淀干燥物15mg，加水定容至100mL，取1mL于10mL容量瓶中，按照配制標準曲線的方法處理樣品，測定吸光度。

2 結(jié)果與討論

2.1 葡萄糖標準曲線結(jié)果分析

以葡萄糖含量為橫坐標，吸光度A為縱坐標，繪制標準曲線，用最小二乘法進行線性回歸，得葡萄糖標準曲線的線性回歸方程為Y＝0.702 7 X＋0.013 1，相關(guān)系數(shù)r＝0.998 7，葡萄糖含量在（0.0～1.0）×10－4g范圍內(nèi)服從朗伯—比耳定律。

2.2 黃芪多糖分離結(jié)果與討論

不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物得率見表1。

表1 不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物重量及得率

可見，粉碎粒度為80目時95%乙醇沉淀物得率最高為18.49%，粉碎粒度為30目時95%乙醇沉淀物得率最低為11.90%。

2.3 95%乙醇沉淀物糖含量測定結(jié)果與分析

不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物吸光度測得值，見表2。

根據(jù)葡萄糖溶液標準曲線Y＝0.702 7 X＋0.013 1計算得到不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物糖含量和純度，見表3。

可見黃芪多糖提取率受黃芪不同粉碎粒度的影響較大，粉碎粒度越小，黃芪多糖提取率越高，當粉碎成細粉80目時可以大大提高黃芪多糖提取率。

表2 不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物吸光度值

表3 不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物黃芪多糖含量及純度

本論文通過溫浸法對黃芪不同粉碎粒度對黃芪多糖提取率的影響進行了研究，實驗結(jié)果顯示黃芪粉碎粒度可能是影響黃芪多糖提取率的關(guān)鍵因素，當黃芪粉碎成細粉80目時可以大大提高黃芪粗多糖的純度和提取率，這些數(shù)據(jù)為我國傳統(tǒng)中藥黃芪的大規(guī)模開發(fā)和應(yīng)用提供了科學(xué)資料和依據(jù)。

［1］劉瑞生.黃芪多糖提取方法研究進展［J］.中國獸藥雜志，2007，41（3）：35－36.

［2］盧彥琦，賀學(xué)禮.黃芪化學(xué)成分及藥理作用綜述［J］.保定師范?？茖W(xué)校學(xué)報，2004，17（4）：40－42.

［3］姜俊艷，陳旭東，李長坤.黃芪多糖的用途和提?。跩］.化學(xué)工程師，2003，97（4）：55－56.

［4］韓鳳蘭，陸峰，陳宇紅.黃芪多糖的提取研究［J］.寧夏農(nóng)林科技，2004，5：22－23.

［5］LI Ru－Jiang，QIU Shu－Dong，QIU Hong－Xia，et al.The immunotherapeutic effects of Astragalus polysaccharide in type 1diabetic mice［J］.Biological ＆Pharmaceutical Bulletin，2007，30（30）：470－476.

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