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        感染后咳嗽氣道神經(jīng)源性炎癥水平與肺功能相關性研究*

        2014-12-04 11:54:20何雪梅盧育明
        中國醫(yī)學創(chuàng)新 2014年19期
        關鍵詞:神經(jīng)肽清液源性

        何雪梅 盧育明

        感染后咳嗽是亞急性咳嗽中最常見的原因。由感覺神經(jīng)末梢(主要是C纖維末梢)釋放的神經(jīng)肽所介導的神經(jīng)源性炎癥可能在咳嗽反射敏感性改變以及感染后咳嗽發(fā)病中起重要作用[1]。肺通氣功能檢查可對受檢者呼吸生理功能的基本情況作出質與量的評價,對探索疾病的發(fā)病機制、病理生理、明確診斷、指導治療、判斷療效等都有重大的意義[2]。本研究擬闡述在感染后咳嗽中神經(jīng)源性炎癥與肺功能之間的關系,從微觀及宏觀方面探討感染后咳嗽的發(fā)病機制,為臨床治療決策提供更可靠依據(jù),現(xiàn)報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取2012年5月-2013年12月深圳市沙河醫(yī)院內科門診及住院患者37例作為病例組,其中男20例,女17例,平均年齡(38.3±8.7)歲,平均身高(1.65±0.12)m;平均體重(52.3±4.6)kg。具體診斷標準如下:(1)呼吸道感染癥狀消失后持續(xù)性干咳3周以上。(2)X線胸片檢查正常。(3)肺通氣功能正常,氣道反應性正常(組胺累積吸入劑量7.8 μmol,1秒鐘用力呼氣容積(FEV1)下降<20%)。(4)既往無慢性呼吸系統(tǒng)疾病史。(5)排除其他原因引起的慢性咳嗽,如嗜酸細胞性支氣管炎、胃食管反流性咳嗽等[1]。

        另外選取35例健康成人志愿者作為正常對照組,其中男18例,女17例,平均年齡(39.2±9.3)歲,平均身高(1.66±0.14)m,平均體重(51.4±4.3)kg;均無吸煙史、無慢性呼吸道和消化道癥狀及病史,近2個月無呼吸道感染病史,血常規(guī)、X線胸片檢查正常,肺通氣功能正常,組胺激發(fā)試驗陰性。兩組研究對象的性別、年齡、身高、體重等一般資料比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。

        1.2 方法

        1.2.1 研究方法 所有對象均于入組開始0 d、28 d取痰上清液,測P物質(SP),并測定比較其與相應時間點的肺功能情況。

        1.2.2 檢測方法

        1.2.2.1 誘導痰及處理方法 采用梯度高滲鹽水法進行超聲霧化誘導。痰液經(jīng)4倍體積的0.1%二硫蘇糖醇(DTT)水浴處理,濾液進行細胞總計數(shù);離心后上清液分裝于-70 ℃凍存待檢,沉淀用磷酸鹽緩沖液(PBS)懸浮,涂片,蘇木素-伊紅(HE)染色,進行細胞分類觀察。其余涂片風干后4%多聚甲醛固定,作免疫組化備用。

        1.2.2.2 痰上清液中P物質(SP)檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法),試劑盒購自美國Peninsula laboratories,嚴格按照試劑盒的說明進行操作。

        1.2.2.3 肺功能檢查 使用意大利Quark PFT-1肺功能儀,按儀器使用要求,由專人操作。受檢者為立位,每人測試2~3次,選擇其最佳一次值。測試項目有用力肺活量(FVC)、第1秒時間肺活量(FEV1)、第1秒時間肺活量和用力肺活量比FEV1/FVC(FEV1%)。

        1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 15.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,計量資料用(±s)表示,采用自身配對t檢驗對患者前后P物質、肺通氣功能各項指標進行對比分析,采用t檢驗對組間比較,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結果

        病例組內28 d痰上清液中SP較0 d明顯升高(P<0.05),且組內28 d對應時間點的FEV1及FEV1/FVC較0 d均明顯下降(P<0.05)。病例組0、28 d痰上清液中SP較正常對照組均明顯升高(P<0.01),同樣,病例組28 d對應時間點的FEV1及FEV1/FVC較正常對照組的28 d均明顯下降(P<0.01),見表1。說明肺功能中FEV1及FEV1/FVC與痰上清液中SP呈反相關。而組內和組間FVC、FVC%相互之間比較,各數(shù)值未見明顯差異性(P>0.05)。

        3 討論

        感染后咳嗽(cough post infectious,CPI)是慢性咳嗽的主要病因,在上呼吸道感染流行季節(jié)發(fā)生率極高(可達25%~50%)。近年來有研究發(fā)現(xiàn),氣道有神經(jīng)肽網(wǎng)的廣泛分布,感染引起的炎癥,通過感覺神經(jīng)末梢(主要是C纖維末梢)釋放感覺神經(jīng)肽,如P物質(SP)、神經(jīng)激肽(NKA)、降鈣素基因相關肽(CGRP)等,造成氣道血管擴張及通透性增加,使氣道炎性滲出增加而引起氣管的敏感性增加[3-4]??人苑瓷涿舾行裕–RS)異常增高是咳嗽反應的關鍵原因,故由此推斷感染引起的神經(jīng)-受體失衡可通過改變氣道的敏感性,而在慢性咳嗽過程中發(fā)揮作用[3-5]。

        表1 兩組氣道神經(jīng)肽水平與肺功能各項數(shù)據(jù)的比較(±s)

        表1 兩組氣道神經(jīng)肽水平與肺功能各項數(shù)據(jù)的比較(±s)

        *與本組0 d比較,P<0.05;△與正常對照組比較,P<0.01

        組別 時間 SP(ng/L) FVC(L) FVC%(%) FEV1(L) FEV1/FVC(%)病例組(n=37) 0 d 392.3±278.6△ 3.72±0.46 0.85±0.11 3.01±0.36 0.80±0.22 28 d 475.4±256.8*△ 3.87±0.47 0.90±0.11 2.82±0.38*△ 0.70±0.12*△正常對照組(n=35) 0 d 131.7±49.5 3.76±0.61 0.86±0.19 3.08±0.39 0.82±0.07 28 d 142.1±36.7 4.03±0.66 0.95±0.20 3.27±0.44 0.81±0.08

        目前,感覺神經(jīng)肽與慢性咳嗽的相關研究如下:國外學者Sekizawa等[6]發(fā)現(xiàn),呼吸道感染患者霧化吸入SP可誘發(fā)咳嗽,健康人霧化吸入SP卻并不直接誘導咳嗽。Cho等[7]發(fā)現(xiàn),CRS增高的CPI患者鼻灌洗液的SP質量濃度明顯高于CRS正常組。國內學者陳如沖等[8]發(fā)現(xiàn),CPI患者痰上清液神經(jīng)肽SP與CGRP較正常對照組顯著增高,痰細胞涂片中SP以及其受體NK-1表達也顯著高于正常對照組。葉新民等[9-10]發(fā)現(xiàn),人副流感病毒及呼吸道合胞病毒可引起豚鼠CRS明顯增高,同時也可引起氣道SP含量增高和蛋白表達增強。他們也發(fā)現(xiàn)支配神經(jīng)肽SP亞群的神經(jīng)纖維分布的蛋白基因產(chǎn)物9.5(PGP-9.5),在感染后12 d組的表達明顯增強。表明人副流感病毒及呼吸道合胞病毒可引起氣道神經(jīng)源性炎癥的表達,同時也證實了氣道神經(jīng)源性炎癥與氣道敏感性之間的相關性。

        肺通氣功能檢查可明確肺通氣功能障礙的程度和類型,對受檢者呼吸生理功能的基本情況作出質與量的評價。在探索疾病的發(fā)病機制、病理生理、明確診斷、指導治療、判斷療效和疾病的康復、勞動力鑒定以及評估胸、腹部大手術的耐受性等方面均有重大的意義[2]。本研究將從可反映氣道敏感性的肺功能檢查入手,進一步闡述氣道神經(jīng)性炎癥與氣道敏感性之間的關系。

        本研究結果表明,CPI患者痰上清液神經(jīng)肽SP較正常對照組顯著增高,而在肺功能指標中反應氣道反應性的FEV1及FEV1/FVC指標,與痰上清液中SP呈反相關,說明CPI患者的氣道敏感性較正常對照組顯著升高,且與痰上清液神經(jīng)肽SP的質量濃度呈正相關。其機制可能是:(1)SP主要參與氣道平滑肌收縮機制[11];(2)特發(fā)性咳嗽患者呼吸道速激肽陽性神經(jīng)纖維數(shù)量明顯增加[12]。因此,氣道敏感性增高并伴隨以神經(jīng)肽SP增高為特點的氣道神經(jīng)源性炎癥是CPI的重要特征,可能是CPI發(fā)病的重要機制。

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