劉慧民 ，陳向齊 ，劉玉明 ，李珂嫻 ，何穎 ，沈先榮

（1.福建中醫(yī)藥大學(xué)，福州350122；2.福建中醫(yī)藥大學(xué)福總教學(xué)醫(yī)院（南京軍區(qū)福州總醫(yī)院），福州350025；3.海軍醫(yī)學(xué)研究所，上海 200433）

皮膚病是日常生活中的一種常見病和多發(fā)病，尤其在現(xiàn)代軍事戰(zhàn)爭中，皮膚病的發(fā)生已成為影響戰(zhàn)斗力的主要因素之一，這對部隊(duì)訓(xùn)練和官兵作戰(zhàn)構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。目前在臨床中皮膚病的治療主要配發(fā)一些西藥制劑如皮炎平軟膏、達(dá)克寧軟膏、酮康唑軟膏等，也有用抗生素對皮膚病進(jìn)行治療的?？股氐闹委熞桩a(chǎn)生耐藥性，而在采用西藥進(jìn)行治療時(shí)，其作用單一、抗菌譜窄、不良反應(yīng)多且常易復(fù)發(fā)。本文所研究的皮膚病防治藥物復(fù)方苦參酊劑，其組方以苦參、苦瓜、辣椒、延胡索等組成，該藥物具有清熱利濕，殺菌消炎，去濕消滯，消炎止癢之功效。在前期研究中，已對該藥物的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、藥效學(xué)等內(nèi)容進(jìn)行研究，本文旨在通過觀察該藥對兔子皮膚的刺激性，了解其在外用給藥過程中的安全性，以期為臨床用藥提供參考，也為該藥的新藥申報(bào)項(xiàng)目資料奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 藥品和試劑 復(fù)方苦參酊劑、賦形劑（70%乙醇溶液）均自制。

1.1.2 動(dòng)物 成年健康白色家兔,雌雄各半，體質(zhì)量1.8～2.5 kg，由中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物合格證：2007000545126；動(dòng)物房合格證：200808096754。試驗(yàn)環(huán)境為第二軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，溫度（23±2）℃，濕度（60±10）%。試驗(yàn)期間動(dòng)物單獨(dú)分籠飼養(yǎng)，飼喂全價(jià)顆粒飼料和適量青飼料，自由飲用清潔自來水。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物準(zhǔn)備[1-2]于給藥前24 h，用動(dòng)物剃毛刀將背部脊柱兩側(cè)去毛,每側(cè)去毛面積約為5 cm×10 cm[3]。破損皮膚模型的制作方法：給藥前用消毒處理的細(xì)砂紙打磨皮膚,以滲血為度制作破損皮膚，只限于損傷皮膚，不傷及皮下組織。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組與處理 選取16只健康白色家兔，雌雄各半，體質(zhì)量1.8～2.5 kg，隨機(jī)分為2組,每組8只,分別為完整皮膚組和破損皮膚組;各組均于左側(cè)脫毛部位涂抹酊劑1 mL，右側(cè)涂賦形劑（70%體積分?jǐn)?shù)乙醇）作為對照,每只家兔分籠飼養(yǎng)，2次/d，連續(xù)給藥8 d，停藥后用溫水清洗皮膚后觀察1周，每天進(jìn)行體質(zhì)量稱量，觀察記錄每日的紅斑及水腫并進(jìn)行評分,并觀察噴涂部位是否有色素沉著、出血點(diǎn)、皮膚粗糙或皮膚菲薄等情況,記錄其發(fā)生及消退時(shí)間。

1.2.3 評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 按刺激強(qiáng)度及刺激反應(yīng)評分標(biāo)準(zhǔn)見表1，評價(jià)多次給藥對完整與破損皮膚的刺激強(qiáng)度、刺激反應(yīng)的恢復(fù)情況和時(shí)間，并與對照組比較。反應(yīng)平均值的計(jì)算方法為紅斑形成總分與水腫形成總分的和除以同組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物總數(shù)。根據(jù)所計(jì)算皮膚刺激性反應(yīng)評分反應(yīng)分值，其判斷標(biāo)準(zhǔn)為，無刺激性:平均反應(yīng)分值≤0.5；輕度刺激性：0.5＜平均反應(yīng)分值≤2.0；中度刺激性：平均反應(yīng)分值2.0～6.0；重度刺激性：平均反應(yīng)分值＞6.0[1-2]。

表1 皮膚刺激反應(yīng)的評分標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果

2.1 一般情況 實(shí)驗(yàn)期間各組白兔外觀體征、行為活動(dòng)、進(jìn)食、排泄均正常。

無異常瘙癢行為，所有動(dòng)物體質(zhì)量增長正常，受藥部位皮膚無色素沉著、無出血點(diǎn)、無皮膚粗糙、無皮膚菲薄，從給藥至觀察期結(jié)束，全部動(dòng)物一般情況良好，無一只死亡。

2.2 皮膚刺激性反應(yīng)、皮膚刺激性強(qiáng)度 按照表1標(biāo)準(zhǔn)，逐日對白兔進(jìn)行紅斑和水腫情況觀察和記錄，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2～4。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，白色家兔完整皮膚刺激未見異常改變，破損皮膚涂藥部位亦未出現(xiàn)紅斑、水腫、出血點(diǎn)、色素沉著以及皮膚粗糙等。完整皮膚與破損皮膚刺激性反應(yīng)平均反應(yīng)分值均≤0.5，可評為無刺激性。表明該酊劑是一種安全性較好的外用制劑。

表2 多次給藥期間皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果

表3 停藥后，溫水擦凈藥液后各組皮膚反應(yīng)

3 討論

復(fù)方苦參酊劑是以苦參、苦瓜、辣椒、延胡索為主要成分，經(jīng)過現(xiàn)代提取工藝，制備而得的一種純中藥外用制劑?？鄥槎箍苹睂僦参锟鄥⒌母?，性苦、涼，具有抗滴蟲、阿米巴原蟲作用，對結(jié)核菌、致病性皮膚真菌均有抑制作用，外用治療外陰瘙癢、陰道滴蟲病、燒燙傷；苦瓜為葫蘆科苦瓜屬植物，清熱解毒，外用治痱子、疔瘡癤腫；辣椒為茄科辣椒屬植物辣椒，性辛、熱，溫中散寒，健胃消食，外用能促進(jìn)皮膚血循環(huán)、促進(jìn)藥物吸收；延胡索為罌粟科紫堇屬植物延胡索的塊莖，性苦、微辛、溫，有活血散瘀、理氣止痛之功效。復(fù)方苦參酊劑通過清熱利濕，殺菌消炎，去濕消滯，消炎止癢等作用，從而用于治療各種常見皮膚病。

表4 對家兔損傷皮膚刺激的平均反應(yīng)分值 （n＝8）

致謝：感謝第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，在本實(shí)驗(yàn)期間提供的優(yōu)好的動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)條件，尤其感謝曹培老師在動(dòng)物飼養(yǎng)中給予的指導(dǎo)和幫助；感謝第二軍醫(yī)大學(xué)生藥學(xué)教研室黃寶康教授在實(shí)驗(yàn)期間給予的指導(dǎo)。

[1]謝秀瓊.中藥制劑開發(fā)與應(yīng)用[M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2000:565-568.

[2]國家食品藥品監(jiān)督管理局.中藥、天然藥物刺激性和溶血性研究的技術(shù)指導(dǎo)原則[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2005:3.

[3]肖煜華，歐陽松山.速效止血涂膜劑對家兔皮膚刺激性試驗(yàn)[J].中醫(yī)臨床研究，2012,11（4）：24-26.

[4]李黃仕孫，高桂娥，吳曙粵，等.中藥退黃外洗液皮膚給藥刺激性試驗(yàn)[J].兒科藥學(xué)雜志，2008，14（1）：23-25.