呂若君 楊 穎 白曉雪 宋曉杰 李 丹 華樹成 谷 月

(淄博市第一醫(yī)院感染性疾病科，山東 淄博 255200)

結(jié)核病是世界范圍內(nèi)最具挑戰(zhàn)性的健康問題之一，約造成每年200萬人死亡及2億人的感染〔1〕。在眾多的結(jié)核患者中，老年人作為一個(gè)特殊群體，由于其免疫功能的下降和衰退，致使老年肺結(jié)核呈逐漸增多的趨勢(shì)，成為社會(huì)上重要的感染源。并且老年肺結(jié)核患者的臨床表現(xiàn)和客觀影像學(xué)檢查結(jié)果往往不典型，故誤診率較高，其對(duì)抗結(jié)核藥物的敏感性也常不如年輕人滿意，因此亟需發(fā)展可用于診斷以及監(jiān)測(cè)藥物治療效果的新的生物學(xué)標(biāo)志物。本文擬通過檢測(cè)老年肺結(jié)核患者血漿中α2巨球蛋白(α2MG)的表達(dá)，擬探索其對(duì)老年肺結(jié)核臨床診斷與治療的指導(dǎo)意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 肺結(jié)核患者來源于吉林大學(xué)白求恩第一醫(yī)院和吉林省結(jié)核病醫(yī)院明確診斷為結(jié)核病的患者，診斷依據(jù)痰中抗酸桿菌(涂片或培養(yǎng))陽(yáng)性者。受試人員年齡均大于60歲，其中結(jié)核患者34例(男19例，女15例)，健康人18例(男10例，女8例)。所有受試人員近期無手術(shù)史，無血液病或其他呼吸系統(tǒng)疾病病史。

1.2 主要試劑和儀器 α2MG、C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒(Abcam，美國(guó))，酶標(biāo)儀(Bio-Tek，美國(guó))。

1.3 檢測(cè)方法 采集靜脈血 5 ml，不抗凝，800 r/min離心10 min后取血漿，儲(chǔ)存于－80℃冰箱中保存。測(cè)定時(shí)將樣品放于冰上解凍，嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行操作。在450 nm處測(cè)各樣品的OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線方計(jì)算各樣品的濃度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS15.0軟件進(jìn)行分析，結(jié)果以s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析。α2MG對(duì)老年結(jié)核診斷價(jià)值的評(píng)定采用工作特征曲線(ROC)分析，與CRP和血沉(ESR)相關(guān)性的分析采用Spearman線相關(guān)法。

2 結(jié)果

2.1 血漿α2MG的表達(dá) 正常老年人血漿中α2MG的含量為(1.53±0.04)g/L，而老年肺結(jié)核患者為(1.88±0.05)g/L，兩者差異顯著(P＜0.01)。經(jīng)抗結(jié)核藥物規(guī)律治療后，老年肺結(jié)核患者血漿中的α2MG的含量為(2.11±0.05)g/L，較治療前明顯升高(P＜0.05)。

2.2 α2MG對(duì)老年結(jié)核的診斷價(jià)值 α2MG可作為診斷老年肺結(jié)核的血漿生物學(xué)標(biāo)志物，其最佳診斷切點(diǎn)值(cut off)為1.61 g/L(AUC=0.846，P＜0.01)，此值在診斷老年肺結(jié)核時(shí)的敏感度為85.3%，特異度為77.8%。

2.3 α2MG與炎癥反應(yīng)的相關(guān)性 老年肺結(jié)核患者血漿中的α2MG水平 與CRP及ESR的呈正相關(guān)(r=0.443，0.796，均P＜0.05)，見圖1。

圖1 α2MG與炎癥反應(yīng)的相關(guān)性

3 討論

α2MG是血漿中分子量最大的蛋白質(zhì)，約為652～800 kD，主要由肝細(xì)胞和單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)合成。生理情況下，α2MG最突出的功能是能與多種分子或離子結(jié)合，特別是與多種蛋白水解酶結(jié)合從而影響這些酶的活性〔2〕。并有研究表明，α2MG與蛋白水解酶相互作用可使α2MG的分子構(gòu)象發(fā)生變化，可被相關(guān)的細(xì)胞受體所識(shí)別并加以清除。在炎癥和感染等病理情況下，機(jī)體大量合成α2MG，與過量產(chǎn)生的蛋白水解酶結(jié)合并加速其清除，從而起到保護(hù)組織免于炎癥或免疫損傷〔3〕。同時(shí)，α2MG還可以通過抑制侵入機(jī)體的寄生蟲和病原體釋放的多種蛋白酶與毒素，減少其對(duì)宿主的破壞。在兒童和成人結(jié)核時(shí)，血漿中α2MG水平升高，并在進(jìn)行抗結(jié)核藥物治療后水平進(jìn)一步升高〔4，5〕。然而對(duì)于免疫功能下降的老年結(jié)核患者群體，血漿α2MG水平并無相關(guān)研究。本研究表明在老年肺結(jié)核感染免疫時(shí)，α2MG的功能及變化與年輕群體相似。

老年肺結(jié)核的早期診斷，特別是在機(jī)體免疫缺陷時(shí)，仍是一個(gè)巨大挑戰(zhàn)。但由于老年人肺結(jié)核臨床癥狀和影像學(xué)表現(xiàn)多不典型，且多合并其他呼吸系統(tǒng)疾病，給其診斷帶來了極大的困難。血中生物學(xué)標(biāo)志物是目前作為肺結(jié)核在內(nèi)的多種呼吸道疾病輔助檢查的一種新型手段，其優(yōu)點(diǎn)在于特異性強(qiáng)、檢查迅速并且相對(duì)無創(chuàng)，因此成為目前全球性的攻關(guān)熱點(diǎn)。比如，降鈣素原、IL－10、CRP和ESR可作為區(qū)別肺結(jié)核和社區(qū)獲得性肺炎的血清生物學(xué)標(biāo)志物〔6〕。前期研究中發(fā)現(xiàn)，α2MG等蛋白可作為哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)的輔助診斷手段〔7〕。在本研究中，α2MG還可作為區(qū)別正常人與老年肺結(jié)核患者的血漿生物學(xué)標(biāo)志物。

生物標(biāo)靶除可用于診斷結(jié)核外，還可用于監(jiān)測(cè)抗結(jié)核藥物治療效果及判斷結(jié)核患者的預(yù)后。CRP和ESR是反映機(jī)體炎癥反應(yīng)的兩個(gè)最常用指標(biāo)。本研究表明除了作為診斷依據(jù)外，血漿α2MG水平還可作為評(píng)估老年肺結(jié)核疾病嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)。

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