茍連平 曠英華 劉長(zhǎng)萍 雷 蕾 朱 潔

(川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心內(nèi)科，四川 南充 637000)

心血管病變是人類死亡的主要原因，而血脂代謝異常會(huì)導(dǎo)致許多心血管疾病。降脂通絡(luò)軟膠囊(JZTL)主要成分是姜黃素及其衍生物，姜黃素有調(diào)脂、抗炎、抗氧化、保護(hù)肝臟等作用，動(dòng)物及人體實(shí)驗(yàn)均已證實(shí)了其有降低總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，升高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的功效，且毒副反應(yīng)小〔1～4〕。中藥 JZTL與他汀類藥物比較兩者的調(diào)脂作用及副反應(yīng)的研究較少。本研究用洛伐他汀和JZTL比較兩者的調(diào)脂作用及副反應(yīng)，以探討JZTL的臨床療效及調(diào)脂作用可能機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 入選2010年1月至2011年11月住院或門診就診的高血脂患者80例(并簽署知情同意書)，排除合并糖尿病、高血壓、Cushing綜合征、冠心病、甲亢、甲減、嚴(yán)重肝腎功能異常疾病。高血脂診斷依據(jù)按《2006年中國(guó)成人血脂防治指南》TC≥5.7 mmol/L(或)TG≥1.7 mmol/L。隨機(jī)分成洛伐他汀組和JZNL組，各40例。兩組一般情況無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，具有可比性，見表 1。

表1 兩組一般資料的比較( s，n=40)

表1 兩組一般資料的比較( s，n=40)

組別 男/女(n)年齡(歲)TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)GPT(U/L)GOT(U/L)洛伐他汀組 20/20 56 ±11 6.20 ±0.88 2.55 ±1.06 1.23 ±0.29 3.89 ±1.11 55.09 ±25.16 35.28 ±12.67 JZTL 組 21/19 57 ±13 6.22 ±0.91 2.53 ±1.21 1.25 ±0.24 3.80 ±1.23 54.77 ±23.64 34.90 ±13.68

1.2 方法 所有受檢者治療前及過程中禁用利尿劑、β受體阻滯劑、激素等影響血脂的藥物。所有患者正常飲食，治療前查血脂、血糖、肝功、腎功。抽血前1 d禁食高脂飲食及禁飲酒，前12 h禁食。生化指標(biāo)用我院生化儀檢測(cè)。治療前及治療6個(gè)月后測(cè)定血脂及肝功。

1.3 ABCA1蛋白的檢測(cè) 空腹抽取靜脈血20 ml，等體積Hank液稀釋此血液，徐徐加至20 ml Ficoll液(密度為1.007)液面上。2 000 r/min離心20 min，將單個(gè)核細(xì)胞從乳白色層中吸出，反復(fù)用Hank液洗滌3次(1 500 r/min離心5 min);臺(tái)盼藍(lán)染色，計(jì)活細(xì)胞數(shù)＞95%，重懸于 RPMI1640培養(yǎng)基，置于37℃5%CO2培養(yǎng)箱2 h;用37℃預(yù)熱的培養(yǎng)基清洗2次，將未貼壁細(xì)胞洗脫，貼壁的為單核細(xì)胞;瑞氏染色鑒定貼壁細(xì)胞為單核細(xì)胞，占90%以上;將貼壁細(xì)胞用細(xì)胞刮片輕輕刮下，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×105/ml備實(shí)驗(yàn)用。

各組測(cè)定孔細(xì)胞經(jīng)4%多聚甲醛室溫下固定30 min，再用含1%小牛血清的PBS液洗3遍，每次5 min，加入含1% 小牛血清、1.5%ABCA1一抗的PBS，置室溫60 min，用含1%小牛血清的PBS液洗3遍，加1∶200FITC標(biāo)記的羊抗鼠二抗，室溫避光反應(yīng)30 min，含1%小牛血清的PBS液洗3遍后，移入測(cè)試管。流式細(xì)胞儀收集10 000個(gè)細(xì)胞/份。測(cè)定各空白孔時(shí)以PBS代替一抗，余條件同各組測(cè)定孔。采用488 nm的激發(fā)波長(zhǎng)，利用門技術(shù)，Cell Quest分析軟件，測(cè)定細(xì)胞熒光強(qiáng)度。各組測(cè)定孔細(xì)胞熒光強(qiáng)度值減去相應(yīng)空白孔細(xì)胞熒光強(qiáng)度值為平均熒光強(qiáng)度，代表該組細(xì)胞ABCA1蛋白表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS11.0軟件。計(jì)量資料用s表示，組間比較采用方差分析及t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后血脂及ABCA1蛋白水平的變化 兩組在治療后 TC、TG 、LDL-C較治療前顯著降低(P＜0.05)，而HDL-C較治療前明顯升高(P＜0.05)。洛伐他汀組ABCA1蛋白治療前后無(wú)明顯改變(P＞0.05)，而JZTL組ABCA1蛋白在治療后卻顯著增加(P＜0.05)，見表2。

2.2 治療前后肝功的變化 JZNL組治療后GPT、GOT有明顯下降，治療前6例GPT、GOT升高的患者，治療后全部恢復(fù)正常;治療后GPT、GOT升高超過2倍者，洛伐他汀組有1例。見表3。

表2 兩組治療前后血脂及ABCA1蛋白水平的變化( s，n=40)

表2 兩組治療前后血脂及ABCA1蛋白水平的變化( s，n=40)

與本組治療前比較:1)P＜0.05;下表同

治療后洛伐他汀組 6.20 ±0.88 4.14 ±1.131)2.55 ±1.06 1.98 ±0.901)1.23 ±0.29 1.29 ±0.351)3.89 ±1.11 2.12 ±0.921)組別 TC(mmol/L)治療前 治療后TG(mmol/L)治療前 治療后HDL-C(mmol/L)治療前 治療后LDL-C(mmol/L)治療前 治療后ABCA1治療前4.21 ±0.55 4.42 ±0.67 JZTL 組 6.22 ±0.91 4.21 ±1.071)2.53 ±1.21 2.03 ±1.041)1.25 ±0.24 1.33 ±0.281)3.80 ±1.23 2.05 ±0.871)4.33 ±0.61 80.92 ±15.141)

表3 兩組治療前后肝功能的變化(s，n=40，U/L)

表3 兩組治療前后肝功能的變化(s，n=40，U/L)

組別 GPT治療前 治療后 變化率(%)GOT治療前 治療后 變化率(%)洛伐他汀組 55.09 ±25.16 58.12 ±28.34 6.5 35.28 ±12.67 38.92 ±9.05 9.3 JZTL 組 54.77 ±23.64 41.09 ±18.151) -25.8 34.90 ±13.68 26.17 ±9.271)122.1

3 討論

循證醫(yī)學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)已證實(shí)了調(diào)脂治療在心腦血管疾病防治中有著重要作用，特別是在動(dòng)脈粥樣硬化(AS)、冠心病(CHD)的一級(jí)、二級(jí)預(yù)防中，調(diào)脂治療可不同程度地改善患者的長(zhǎng)期預(yù)后。他汀能降低TC、TG、LDL-C，而劑量加倍時(shí)，其降脂效應(yīng)僅增加8%〔5〕，但不良反應(yīng)會(huì)相應(yīng)增加。他汀可出現(xiàn)GPT、GOT等肝酶增高，也可有肌炎、肌病等不良作用。作為一級(jí)、二級(jí)預(yù)防的調(diào)脂藥基本要長(zhǎng)期服用，因此研發(fā)既有較強(qiáng)調(diào)脂作用，又沒明顯副反應(yīng)的藥物，顯得尤為重要，本課題結(jié)果顯示了JZTL獨(dú)特的保肝作用。其可能的機(jī)制:①姜黃素具有促進(jìn)細(xì)胞LDL-C受體表達(dá)的作用〔6〕，通過上調(diào)LDLR，促進(jìn)血清LDL-C的清除。②姜黃素能升高肝素化血漿脂解酶、脂蛋白酯酶和肝酯酶活性〔7〕，從而加快TG及富含TG脂蛋白的代謝，另外姜黃素可抑制脂肪酸合成。③姜黃素提取物能降低四氯化碳、D-半乳糖胺誘導(dǎo)的肝損害、脂肪變性及壞死等。研究發(fā)現(xiàn)〔8〕1 mg/ml濃度的姜黃素可使四氯化碳引起實(shí)驗(yàn)小鼠升高的GPT、GOT分別降低53%和20% ，并可使D-半乳糖胺引起實(shí)驗(yàn)小鼠GPT升高減少44%。同時(shí)發(fā)現(xiàn)姜黃素可拮抗氧自由基對(duì)細(xì)胞的損傷，從而保護(hù)肝細(xì)胞。對(duì)于高脂血癥患者，常需要聯(lián)合用藥，比較常用的聯(lián)合方案是:他汀類藥物加非諾貝特或他汀類藥物加煙酸，但合用后常加重患者的不良反應(yīng)，特別是加重肝臟的損害。由于JZTL明確的調(diào)脂作用，并有獨(dú)特的保肝效果，使得臨床醫(yī)生在對(duì)高脂血癥特別是合并肝功能異常的患者治療中多了一個(gè)選擇。

以往研究表明ABCA1蛋白是HDL介導(dǎo)RCT的第一步，具有抗AS作用〔9〕。ABCA1蛋白介導(dǎo)RCT分兩步:第一步，正常外周細(xì)胞膜上的ABCA1首先介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)的磷脂流出，并與細(xì)胞外的載脂蛋白AI(ApoAI)結(jié)合形成盤狀的磷脂-ApoAI復(fù)合物。第二步，細(xì)胞內(nèi)的膽固醇通過擴(kuò)散跨膜流出，被前述復(fù)合物捕獲，形成前βHDL，在卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶作用下，轉(zhuǎn)變成富含膽固醇脂的球狀的成熟HDL，這表明ABCA1間接作為膽固醇流出的調(diào)節(jié)蛋白，與HDL的合成有關(guān)，ABCA1蛋白在RCT中發(fā)揮重要作用，促進(jìn)ABCA1蛋白的表達(dá)無(wú)疑對(duì)防治AS是有益的〔10，11〕。本研究結(jié)果說(shuō)明ABCA1蛋白的表達(dá)可能不是他汀防治AS及CHD的機(jī)制，相反可能是JZTL調(diào)脂的機(jī)制之一，為中成藥防治AS及CHD提供新的思路。

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