趙 琴 王曉榮 (新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院超聲診斷科，新疆 烏魯木齊 830054)

甲狀腺腫瘤是頭頸部較常見的實體腫瘤，其種類較多，有良性和惡性之分。臨床研究表明，甲狀腺癌病理類型與患者預(yù)后密切相關(guān)，其中良性腫瘤切除后即可治愈，預(yù)后良好;而惡性腫瘤預(yù)后不如良性腫瘤，且惡性程度越高，預(yù)后越差〔1〕。因此，早期鑒別出良惡性甲狀腺腫瘤對指導(dǎo)臨床治療和判斷預(yù)后有一定的參考價值〔2〕。而血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在甲狀腺癌中呈高水平表達(dá)，且其表達(dá)水平與腫瘤的分化程度、轉(zhuǎn)移及預(yù)后顯著相關(guān)。本研究采用多普勒超聲對甲狀腺腫瘤的宏觀血管變化進(jìn)行觀察及應(yīng)用免疫組化法檢測腫瘤組織VEGF的表達(dá)情況，以探討超聲影像和VEGF在甲狀腺腫瘤良惡性鑒別方面的意義，并分析其相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院2010年1月至2013年7月經(jīng)手術(shù)及穿刺病理證實的84例甲狀腺腫瘤患者，其中甲狀腺腺瘤23例，乳頭狀癌47例，濾泡狀癌14例;其中男20例，女64例;年齡55 ～76〔(平均64.3±8.9)〕歲。術(shù)前均未給予任何治療，術(shù)后取腫瘤切除標(biāo)本進(jìn)行VEGF的免疫組化染色。

1.2 超聲檢查 術(shù)前7 d內(nèi)行多普勒超聲檢查，采用西門子Acuson Sequoia型及美國GE Logic-7型多普勒超聲診斷儀，探頭頻率為5～12 MHz，對頸部、甲狀腺及其周圍行灰階超聲檢查，以了解甲狀腺癌的一般情況，調(diào)整多普勒超聲血流技術(shù)參數(shù)，然后觀察并記錄腫瘤內(nèi)部及周圍血流分布情況。Ⅰ級:結(jié)節(jié)內(nèi)和周邊血流信號分布范圍小于結(jié)節(jié)面積或結(jié)節(jié)周長的1/3;Ⅱ級:結(jié)節(jié)內(nèi)和周邊血流信號分布范圍大于結(jié)節(jié)面積或結(jié)節(jié)周長的1/3;Ⅲ級:結(jié)節(jié)內(nèi)和周邊血流信號分布幾乎充滿結(jié)節(jié)或占據(jù)整個周長。并觀察結(jié)節(jié)內(nèi)搏動性血流，以收縮期最高峰值流速對應(yīng)的RI為記錄值〔3〕。

1.3 免疫組化法 鼠抗人VEGF單克隆抗體、SP試劑盒和二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色試劑盒均由武漢博士德公司提供。術(shù)后取腫瘤切除標(biāo)本，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)厚切片(5 μm)，貼附于載玻片。采用SP法行VEGF的免疫組化染色，磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗，復(fù)染、脫水、封片。VEGF陽性染色顆粒多位于胞質(zhì)內(nèi)，并以＞10%的腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)染成棕褐色或棕黃色顆粒判斷為VEGF表達(dá)陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS16.0軟件進(jìn)行分析，計量資料以s表示，組間比較采用t檢驗;率的比較采用χ2檢驗;血流阻力指數(shù)(RI)與VEGF的相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 不同血流信號分級的VEGF陽性表達(dá)比較 不同血流分級的甲狀腺腫瘤彩色多普勒顯像;Ⅰ級陽性率為28.00%(7例)，Ⅱ級為50.00%(16例)，Ⅲ級陽性率為77.78%(21例)，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.472，P ＜0.05)。

2.2 不同類型甲狀腺癌RI及VEGF陽性表達(dá)比較 濾泡狀癌組織中 VEGF表達(dá)(92.86%)顯著高于甲狀腺腺瘤(21.74%)和乳頭狀癌(55.32%);甲狀腺腺瘤、乳頭狀癌及濾泡狀癌組織 RI值分別為(0.78 ± 0.07)、(0.70 ± 0.06)和(0.59 ±0.06)，見圖1。

圖1 VEGF在不同類型甲狀腺癌中的表達(dá)

2.3 VEGF表達(dá)與RI的關(guān)系分析 甲狀腺癌患者中VEGF陽性表達(dá)組RI值為0.72±0.07，顯著高于陰性表達(dá)組的0.61±0.06，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);經(jīng) Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，RI與 VEGF陽性表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r=0.732，P＜0.05)。

3 討論

正常生理狀況下，機(jī)體血管生成因子與抑制因子形成一種相對平衡的狀態(tài)，但在特殊病理情況下，如細(xì)胞惡化轉(zhuǎn)移過程中，癌細(xì)胞將釋放大量VEGF等以啟動癌細(xì)胞“血管生成開關(guān)”，從而形成腫瘤新生血管并進(jìn)一步生長，導(dǎo)致不平衡狀態(tài)的加劇，最終形成腫瘤無限制生長的惡性循環(huán)〔4，5〕。VEGF是目前參與腫瘤血管生成特異性最高且作用最強(qiáng)的血管生成因子〔6〕。有研究表明，VEGF在多種腫瘤中均呈高水平表達(dá)，且其表達(dá)水平與腫瘤的分化程度、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)〔7〕。因此，檢測甲狀腺腫瘤組織VEGF的表達(dá)情況，對鑒別良惡性腫瘤具有重要的臨床意義。

彩色多普勒超聲是目前應(yīng)用最廣泛的超聲波檢查，不僅能清晰顯示腫瘤內(nèi)完整的血管結(jié)構(gòu)，展現(xiàn)腫瘤內(nèi)新生微血管，還可觀察到腫瘤形態(tài)的大小、特征、血管網(wǎng)絡(luò)及與周邊血管結(jié)構(gòu)的三維位置關(guān)系〔8，9〕。故多普勒彩超是一種能夠直觀、立體顯示腫瘤血流情況的非創(chuàng)傷性技術(shù)。本研究提示甲狀腺癌的多普勒超聲表現(xiàn)與VEGF表達(dá)水平密切相關(guān)，腫瘤內(nèi)血流越豐富，VEGF表達(dá)越高，能夠在一定程度上反映腫瘤血管的生成情況〔10〕。RI是反映血流阻力的重要參數(shù)，其客觀性較強(qiáng)，測量時不因角度的變化而受影響〔11〕。本文發(fā)現(xiàn)，甲狀腺癌惡性程度越高，RI值越高，且RI值越高的部位VEGF呈陽性表達(dá)，提示腫瘤的分化程度與血管形成有一定的相關(guān)性〔12〕。Salajegheh等〔13〕報道，甲狀腺癌組織通過分泌大量的VEGF以誘導(dǎo)產(chǎn)生功能結(jié)構(gòu)異常的新生血管，呈不規(guī)則密集網(wǎng)絡(luò)狀分布，促成血流紊亂，使RI值增高。本研究結(jié)果與上述報道相吻合。

綜上，多普勒彩超檢測血流分級對老年甲狀腺癌具有較高的診斷價值，而血流分級和RI能反映甲狀腺癌VEGF的表達(dá)情況，多普勒超聲影像和VEGF對甲狀腺腫瘤良惡性的鑒別具有重要的臨床意義。

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