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        番茄果實(shí)成熟時(shí)期維生素C含量的變化

        2014-12-02 18:49:22王彥華趙婷婷李會(huì)佳李景富許向陽(yáng)
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年19期
        關(guān)鍵詞:熟期提取液種質(zhì)

        王彥華+趙婷婷+李會(huì)佳+李景富+許向陽(yáng)+姜景彬

        摘要:通過(guò)對(duì)50份番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)材料進(jìn)行維生素C含量的種質(zhì)資源篩選,挑選4份具有代表性的材料“13003”、“13573”、“13582”、“13719”,測(cè)定不同成熟時(shí)期果實(shí)中維生素C的含量。結(jié)果表明,50份番茄種質(zhì)資源中篩選出高維生素C材料3份,分別為“13582”、“13633”、“13469”,其中材料“13582”完熟期果實(shí)中維生素C含量最高;同一番茄材料不同成熟期果實(shí)中維生素C含量不同,但不同材料維生素C含量在整個(gè)熟期的變化規(guī)律相同,即從綠熟期到白熟期明顯升高,之后趨于平緩,轉(zhuǎn)色期略有下降,到完熟期達(dá)到最高。

        關(guān)鍵詞:番茄(Lycopersicon esculentum Mill.);維生素C;成熟期;紫外分光光度法

        中圖分類號(hào):S641.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)19-4641-03

        DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.19.035

        Changes of Vitamin C in Tomato Fruit During Ripening Period

        WANG Yan-hua, ZHAO Ting-ting, LI Hui-jia, LI Jing-fu, XU Xiang-yang, JING Jing-bin

        (College of Horticulture,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,Heilongjiang,China)

        Abstract: VC content of 50 tomato(Lycopersicon esculentum Mill.) germplasm were screened. Four “13003”,“13573”,“13582”,“13719” were selected as representative materials. The vitamin C content of different ripe periods of the same tomato variety was analyzed. The results showed that 3 varieties with high VC content obtained from 50 varieties were “13582”,“13633”,“13469”. The variety “13582” had the highest content of vitamin C and was significantly different from other varieties. The content of vitamin C of different ripe periods of the same tomato variety were different. The variation of vitamin C content in the tomato fruit throughout the whole ripe periods was the same among different varieties. The fruit VC content was significantly increased from green ripening stage to white ripening stage, and decreased slightly at the turning stage, and then increased to the maximum at the ripe stage.

        Key words:tomato(Lycopersicon esculentum Mill.);vitamin C;mature period;ultraviolet-visible spectrophotometer

        番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)系茄科番茄屬一年生或多年生草本植物,起源于南美洲的秘魯、厄瓜多爾、玻利維亞等地。番茄是一種高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的食用作物,維生素C是衡量番茄品質(zhì)的重要指標(biāo)。維生素C又名抗壞血酸,是一種水溶性維生素[1]。在植物中,維生素C與植物的抗逆性呈正相關(guān),增加植物細(xì)胞內(nèi)維生素C的含量,能夠增強(qiáng)植物耐熱、耐冷和抗鹽堿等特性,具有預(yù)防牙齦萎縮、牙齦出血、動(dòng)脈硬化等功效,還是膠原蛋白合成的重要成分[2]。李秀錦等[3]通過(guò)對(duì)不同豆種和培養(yǎng)時(shí)期豆芽維生素C含量分析得出,不同豆種間維生素C含量差異顯著,同一豆種隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)維生素C含量有明顯升高的趨勢(shì);劉金兵等[4]通過(guò)對(duì)辣椒果實(shí)成熟過(guò)程中維生素C含量變化的分析,結(jié)果表明辣椒果實(shí)從青熟果到紫熟果直至紅熟果過(guò)程中果實(shí)中維生素C含量變化呈增長(zhǎng)趨勢(shì);李敏等[5]通過(guò)對(duì)彩色甜椒果實(shí)發(fā)育及品質(zhì)形成進(jìn)行研究,結(jié)果表明甜椒果實(shí)中含有豐富的維生素C,隨果實(shí)的發(fā)育,維生素C的含量不斷提高,生理成熟果比綠果高3~5倍。

        本試驗(yàn)對(duì)50份番茄材料的維生素C含量進(jìn)行測(cè)定,篩選高維生素C含量的種質(zhì)資源,同時(shí)挑選4種果實(shí)顏色、維生素C含量差異明顯的番茄材料,對(duì)其果實(shí)性狀及不同成熟期果實(shí)維生素C含量進(jìn)行測(cè)定,旨在為番茄果實(shí)針對(duì)性利用提供參考,并為高維生素C優(yōu)質(zhì)番茄品種的選育提供種質(zhì)資源。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        50份番茄材料由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)番茄研究所提供。2012年春季播種于東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝站溫室,進(jìn)行統(tǒng)一的水肥管理。

        1.2 試驗(yàn)方法

        1.2.1 維生素C溶液吸收曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取0.050 g抗壞血酸,溶解于10 mL 10% HCl溶液中,用去離子水定容至500 mL,混勻,即得到100 μg/mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        吸收曲線的繪制:取5 mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液定容至50 mL。用1 cm石英比色皿,以去離子水為參比,在200~280 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)自動(dòng)掃描,繪制吸收曲線。

        標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:準(zhǔn)確移取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別定容至50 mL并搖勻。以蒸餾水作參比,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,以維生素C濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        1.2.2 維生素C含量的測(cè)定 每份番茄材料選取3株長(zhǎng)勢(shì)良好的植株,從每個(gè)植株上取健康的番茄果實(shí),洗凈擦干,取10.00 g果肉于研缽中,加入1% HCl溶液10 mL進(jìn)行研磨,研磨后轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶中,用蒸餾水定容并混勻。將混勻后的液體移至50 mL離心管中,在4 ℃ 4 000 r/min離心10 min,上清液即為待測(cè)樣品提取液,3次重復(fù)。

        取1.0 mL待測(cè)樣品提取液到裝有2 mL 10% HCl的50 mL容量瓶中定容并混勻。以蒸餾水為參比,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,所得吸光度值即為酸處理吸光度。取1.0 mL待測(cè)樣品提取液到裝有10 mL蒸餾水和4 mL 1 mol/L NaOH溶液的50 mL容量瓶中搖勻;靜置20 min后加入4 mL 10% HCl,定容并混勻。以蒸餾水為參比,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,所得吸光度值即為堿處理吸光度。

        番茄樣品提取液的吸光度為酸處理和堿處理吸光度之差。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算番茄樣品提取液中維生素C的濃度。

        維生素C含量[g/100 g(FW)]=

        式中,C表示提取液中維生素C的濃度(μg/mL);V總表示定容時(shí)的體積(mL);V待測(cè)總為離心后上清液體積(mL);V表示測(cè)定吸光度時(shí)所取樣品提取液的體積(mL);W總表示番茄樣品的重量(g)。

        1.2.3 不同成熟期番茄果實(shí)維生素C含量的測(cè)定 從每份種質(zhì)資源中選取3株(3次重復(fù))長(zhǎng)勢(shì)良好的番茄植株,在番茄果實(shí)綠熟期、白熟期、轉(zhuǎn)色期、完熟期4個(gè)時(shí)期,摘取健康的番茄果實(shí)進(jìn)行維生素C含量的測(cè)定,測(cè)定方法同“1.2.2”。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 維生素C溶液的吸收曲線與標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

        由圖1可知,在波長(zhǎng)200~280 nm范圍內(nèi),維生素C溶液有一個(gè)最大吸收峰,最大吸收波長(zhǎng)為243 nm,所以測(cè)定番茄果實(shí)中維生素C的吸光度時(shí)選擇波長(zhǎng)為243 nm。由圖2可知,維生素C的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.065 1x-0.000 8,其中R2=0.997 4,表明溶液吸光度和維生素C的濃度相關(guān)性較大,所以可以通過(guò)吸光度計(jì)算番茄果實(shí)中維生素C的含量。

        2.2 番茄種質(zhì)資源篩選

        對(duì)50份番茄種質(zhì)資源果實(shí)中維生素C含量的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,在50份種質(zhì)資源材料中果實(shí)維生素C含量呈現(xiàn)離散型分布,為7.35~ 37.72 g/100 g(FW),其中維生素C含量較高的有“13582”、“13633”、“13469”,其果實(shí)中維生素C含量分別為37.72、36.78、36.20 g/100 g(FW)。

        2.3 番茄果實(shí)性狀和不同熟期維生素C含量的變化

        通過(guò)對(duì)50份番茄材料維生素C含量的測(cè)定,篩選出3份維生素C含量相對(duì)較高的番茄材料“13582”、“13003”、“13719”和1份維生素C含量較低的番茄材料“13573”,對(duì)其果實(shí)性狀和不同熟期維生素C含量的變化規(guī)律進(jìn)行分析,結(jié)果見(jiàn)表2和圖3。

        由表2可知,材料“13582”果實(shí)中維生素C含量最高,且可溶性固形物含量最高;材料“13003”果實(shí)中維生素C含量相對(duì)較高,可溶性固形物含量較低,果型指數(shù)適中,在4種材料中果實(shí)品質(zhì)最好;材料“13573”果實(shí)中維生素C含量最低,且可溶性固形物含量相對(duì)較高,果型指數(shù)偏大,在4種材料中果實(shí)品質(zhì)最差。

        由圖3可知,不同番茄材料同一熟期果實(shí)中維生素C含量不同,但整個(gè)成熟時(shí)期內(nèi)果實(shí)中維生素C含量的變化呈現(xiàn)一定規(guī)律。在4個(gè)熟期內(nèi),挑選出的4份番茄材料維生素C含量整體呈上升趨勢(shì),從綠熟期到白熟期維生素C含量升高較快,之后變化趨于平緩,轉(zhuǎn)色期略有降低,到完熟期維生素C含量達(dá)到最大值,但與白熟期差別不大。

        3 討論

        目前,對(duì)于維生素C含量的測(cè)定已有多種方法,如碘滴定法、2,6-二氯酚靛酚法、紫外分光光度法、熒光法、高效液相色譜法等,其中高效液相色譜法、熒光法要求樣品的純度較高,需要精密儀器;碘滴定、2,6-二氯酚靛酚法滴定終點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)較難統(tǒng)一;紫外分光光度法精確度相對(duì)較高,測(cè)量方便,因此,本試驗(yàn)采用紫外分光光度法測(cè)定維生素C的含量[6-8]。維生素C包括還原型維生素C和氧化型維生素C兩種[9],其中新鮮番茄中以還原型維生素C為主,所以測(cè)定過(guò)程中研磨時(shí)需要加入0.1%的HCl快速操作,減少還原型維生素C的氧化,確保測(cè)定準(zhǔn)確度更高。

        本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)50份番茄種質(zhì)資源進(jìn)行篩選,選出了3個(gè)高維生素C含量的番茄材料“13582”、“13633”和“13469”,這3份番茄材料果實(shí)中維生素C含量均在36.20 g/100 g(FW)以上,對(duì)于高維生素C含量番茄品種的選育具有利用價(jià)值。在篩選過(guò)程中發(fā)現(xiàn),綠色果皮的番茄果實(shí)與黃色果皮的番茄果實(shí)相比,維生素C含量整體水平較高,推測(cè)番茄果實(shí)維生素C含量可能與果皮顏色有關(guān)。

        對(duì)挑選的4份番茄材料果實(shí)不同熟期維生素C含量變化規(guī)律的研究中發(fā)現(xiàn),不同番茄材料果實(shí)在整個(gè)成熟時(shí)期內(nèi)維生素C含量的變化趨勢(shì)相同,推測(cè)番茄維生素C含量的變化趨勢(shì)和番茄品種無(wú)關(guān),均是從綠熟期到白熟期維生素C含量積累較多,而從白熟期到晚熟期維生素C含量變化較小。根據(jù)這一規(guī)律,可以選擇在番茄綠熟期施用微生物土壤增肥劑提高其維生素C的含量[10]。

        參考文獻(xiàn):

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        [3] 李秀錦,仲 飛.姜麗英,等.對(duì)不同豆種和培養(yǎng)時(shí)期豆芽的維生素C含量分析[J].河業(yè)農(nóng)業(yè)技術(shù)師范學(xué)院學(xué)報(bào),1994,8(4):45-49.

        [4] 劉金兵,趙華侖,孫浩波,等.辣椒果實(shí)成熟過(guò)程中維生素C、辣椒素及干物質(zhì)含量的變化[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2000,16(1):61-62.

        [5] 李 敏,石運(yùn)生.彩色甜椒果實(shí)發(fā)育及品質(zhì)形成研究[J].萊陽(yáng)農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,19(3):187-190.

        [6] 馬宏飛,盧生有,韓秋菊,等.紫外分光光度法測(cè)定五種果蔬中維生素C的含量[J].化學(xué)與生物工程,2012,29(8):92-94.

        [7] 李志英,薛志偉,張海容.用熒光光度法測(cè)定飲料中的VC含量[J].商丘師范學(xué)院學(xué)報(bào),2007,23(9):60-62.

        [8] 王建國(guó),汪敬武,易繡光.流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法測(cè)定飲料中維生素C的含量[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2009,21(5):99-100.

        [9] 魯曉燕,羅強(qiáng)勇.不同草莓品種果實(shí)中維生素C含量變化的研究[J].北方園藝,2005(1):56-57.

        [10] 俞丹宏,祝華明,黃昌勇.SC27微生物土壤增肥劑在柑橘上的應(yīng)用效果[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與科學(xué)版),2001,27(6):624-626.

        吸收曲線的繪制:取5 mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液定容至50 mL。用1 cm石英比色皿,以去離子水為參比,在200~280 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)自動(dòng)掃描,繪制吸收曲線。

        標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:準(zhǔn)確移取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別定容至50 mL并搖勻。以蒸餾水作參比,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,以維生素C濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        1.2.2 維生素C含量的測(cè)定 每份番茄材料選取3株長(zhǎng)勢(shì)良好的植株,從每個(gè)植株上取健康的番茄果實(shí),洗凈擦干,取10.00 g果肉于研缽中,加入1% HCl溶液10 mL進(jìn)行研磨,研磨后轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶中,用蒸餾水定容并混勻。將混勻后的液體移至50 mL離心管中,在4 ℃ 4 000 r/min離心10 min,上清液即為待測(cè)樣品提取液,3次重復(fù)。

        取1.0 mL待測(cè)樣品提取液到裝有2 mL 10% HCl的50 mL容量瓶中定容并混勻。以蒸餾水為參比,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,所得吸光度值即為酸處理吸光度。取1.0 mL待測(cè)樣品提取液到裝有10 mL蒸餾水和4 mL 1 mol/L NaOH溶液的50 mL容量瓶中搖勻;靜置20 min后加入4 mL 10% HCl,定容并混勻。以蒸餾水為參比,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,所得吸光度值即為堿處理吸光度。

        番茄樣品提取液的吸光度為酸處理和堿處理吸光度之差。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算番茄樣品提取液中維生素C的濃度。

        維生素C含量[g/100 g(FW)]=

        式中,C表示提取液中維生素C的濃度(μg/mL);V總表示定容時(shí)的體積(mL);V待測(cè)總為離心后上清液體積(mL);V表示測(cè)定吸光度時(shí)所取樣品提取液的體積(mL);W總表示番茄樣品的重量(g)。

        1.2.3 不同成熟期番茄果實(shí)維生素C含量的測(cè)定 從每份種質(zhì)資源中選取3株(3次重復(fù))長(zhǎng)勢(shì)良好的番茄植株,在番茄果實(shí)綠熟期、白熟期、轉(zhuǎn)色期、完熟期4個(gè)時(shí)期,摘取健康的番茄果實(shí)進(jìn)行維生素C含量的測(cè)定,測(cè)定方法同“1.2.2”。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 維生素C溶液的吸收曲線與標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

        由圖1可知,在波長(zhǎng)200~280 nm范圍內(nèi),維生素C溶液有一個(gè)最大吸收峰,最大吸收波長(zhǎng)為243 nm,所以測(cè)定番茄果實(shí)中維生素C的吸光度時(shí)選擇波長(zhǎng)為243 nm。由圖2可知,維生素C的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.065 1x-0.000 8,其中R2=0.997 4,表明溶液吸光度和維生素C的濃度相關(guān)性較大,所以可以通過(guò)吸光度計(jì)算番茄果實(shí)中維生素C的含量。

        2.2 番茄種質(zhì)資源篩選

        對(duì)50份番茄種質(zhì)資源果實(shí)中維生素C含量的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,在50份種質(zhì)資源材料中果實(shí)維生素C含量呈現(xiàn)離散型分布,為7.35~ 37.72 g/100 g(FW),其中維生素C含量較高的有“13582”、“13633”、“13469”,其果實(shí)中維生素C含量分別為37.72、36.78、36.20 g/100 g(FW)。

        2.3 番茄果實(shí)性狀和不同熟期維生素C含量的變化

        通過(guò)對(duì)50份番茄材料維生素C含量的測(cè)定,篩選出3份維生素C含量相對(duì)較高的番茄材料“13582”、“13003”、“13719”和1份維生素C含量較低的番茄材料“13573”,對(duì)其果實(shí)性狀和不同熟期維生素C含量的變化規(guī)律進(jìn)行分析,結(jié)果見(jiàn)表2和圖3。

        由表2可知,材料“13582”果實(shí)中維生素C含量最高,且可溶性固形物含量最高;材料“13003”果實(shí)中維生素C含量相對(duì)較高,可溶性固形物含量較低,果型指數(shù)適中,在4種材料中果實(shí)品質(zhì)最好;材料“13573”果實(shí)中維生素C含量最低,且可溶性固形物含量相對(duì)較高,果型指數(shù)偏大,在4種材料中果實(shí)品質(zhì)最差。

        由圖3可知,不同番茄材料同一熟期果實(shí)中維生素C含量不同,但整個(gè)成熟時(shí)期內(nèi)果實(shí)中維生素C含量的變化呈現(xiàn)一定規(guī)律。在4個(gè)熟期內(nèi),挑選出的4份番茄材料維生素C含量整體呈上升趨勢(shì),從綠熟期到白熟期維生素C含量升高較快,之后變化趨于平緩,轉(zhuǎn)色期略有降低,到完熟期維生素C含量達(dá)到最大值,但與白熟期差別不大。

        3 討論

        目前,對(duì)于維生素C含量的測(cè)定已有多種方法,如碘滴定法、2,6-二氯酚靛酚法、紫外分光光度法、熒光法、高效液相色譜法等,其中高效液相色譜法、熒光法要求樣品的純度較高,需要精密儀器;碘滴定、2,6-二氯酚靛酚法滴定終點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)較難統(tǒng)一;紫外分光光度法精確度相對(duì)較高,測(cè)量方便,因此,本試驗(yàn)采用紫外分光光度法測(cè)定維生素C的含量[6-8]。維生素C包括還原型維生素C和氧化型維生素C兩種[9],其中新鮮番茄中以還原型維生素C為主,所以測(cè)定過(guò)程中研磨時(shí)需要加入0.1%的HCl快速操作,減少還原型維生素C的氧化,確保測(cè)定準(zhǔn)確度更高。

        本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)50份番茄種質(zhì)資源進(jìn)行篩選,選出了3個(gè)高維生素C含量的番茄材料“13582”、“13633”和“13469”,這3份番茄材料果實(shí)中維生素C含量均在36.20 g/100 g(FW)以上,對(duì)于高維生素C含量番茄品種的選育具有利用價(jià)值。在篩選過(guò)程中發(fā)現(xiàn),綠色果皮的番茄果實(shí)與黃色果皮的番茄果實(shí)相比,維生素C含量整體水平較高,推測(cè)番茄果實(shí)維生素C含量可能與果皮顏色有關(guān)。

        對(duì)挑選的4份番茄材料果實(shí)不同熟期維生素C含量變化規(guī)律的研究中發(fā)現(xiàn),不同番茄材料果實(shí)在整個(gè)成熟時(shí)期內(nèi)維生素C含量的變化趨勢(shì)相同,推測(cè)番茄維生素C含量的變化趨勢(shì)和番茄品種無(wú)關(guān),均是從綠熟期到白熟期維生素C含量積累較多,而從白熟期到晚熟期維生素C含量變化較小。根據(jù)這一規(guī)律,可以選擇在番茄綠熟期施用微生物土壤增肥劑提高其維生素C的含量[10]。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 曲 佳,楊靜慧,等.果蔬中的維生素C研究進(jìn)展[J].西南園藝,2005,33(6):14-16.

        [2] 曾翔云.維生素C的十大功效[J].健康指南(中老年),2012(2):34-35.

        [3] 李秀錦,仲 飛.姜麗英,等.對(duì)不同豆種和培養(yǎng)時(shí)期豆芽的維生素C含量分析[J].河業(yè)農(nóng)業(yè)技術(shù)師范學(xué)院學(xué)報(bào),1994,8(4):45-49.

        [4] 劉金兵,趙華侖,孫浩波,等.辣椒果實(shí)成熟過(guò)程中維生素C、辣椒素及干物質(zhì)含量的變化[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2000,16(1):61-62.

        [5] 李 敏,石運(yùn)生.彩色甜椒果實(shí)發(fā)育及品質(zhì)形成研究[J].萊陽(yáng)農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,19(3):187-190.

        [6] 馬宏飛,盧生有,韓秋菊,等.紫外分光光度法測(cè)定五種果蔬中維生素C的含量[J].化學(xué)與生物工程,2012,29(8):92-94.

        [7] 李志英,薛志偉,張海容.用熒光光度法測(cè)定飲料中的VC含量[J].商丘師范學(xué)院學(xué)報(bào),2007,23(9):60-62.

        [8] 王建國(guó),汪敬武,易繡光.流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法測(cè)定飲料中維生素C的含量[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2009,21(5):99-100.

        [9] 魯曉燕,羅強(qiáng)勇.不同草莓品種果實(shí)中維生素C含量變化的研究[J].北方園藝,2005(1):56-57.

        [10] 俞丹宏,祝華明,黃昌勇.SC27微生物土壤增肥劑在柑橘上的應(yīng)用效果[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與科學(xué)版),2001,27(6):624-626.

        吸收曲線的繪制:取5 mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液定容至50 mL。用1 cm石英比色皿,以去離子水為參比,在200~280 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)自動(dòng)掃描,繪制吸收曲線。

        標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:準(zhǔn)確移取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別定容至50 mL并搖勻。以蒸餾水作參比,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,以維生素C濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        1.2.2 維生素C含量的測(cè)定 每份番茄材料選取3株長(zhǎng)勢(shì)良好的植株,從每個(gè)植株上取健康的番茄果實(shí),洗凈擦干,取10.00 g果肉于研缽中,加入1% HCl溶液10 mL進(jìn)行研磨,研磨后轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶中,用蒸餾水定容并混勻。將混勻后的液體移至50 mL離心管中,在4 ℃ 4 000 r/min離心10 min,上清液即為待測(cè)樣品提取液,3次重復(fù)。

        取1.0 mL待測(cè)樣品提取液到裝有2 mL 10% HCl的50 mL容量瓶中定容并混勻。以蒸餾水為參比,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,所得吸光度值即為酸處理吸光度。取1.0 mL待測(cè)樣品提取液到裝有10 mL蒸餾水和4 mL 1 mol/L NaOH溶液的50 mL容量瓶中搖勻;靜置20 min后加入4 mL 10% HCl,定容并混勻。以蒸餾水為參比,在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,所得吸光度值即為堿處理吸光度。

        番茄樣品提取液的吸光度為酸處理和堿處理吸光度之差。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算番茄樣品提取液中維生素C的濃度。

        維生素C含量[g/100 g(FW)]=

        式中,C表示提取液中維生素C的濃度(μg/mL);V總表示定容時(shí)的體積(mL);V待測(cè)總為離心后上清液體積(mL);V表示測(cè)定吸光度時(shí)所取樣品提取液的體積(mL);W總表示番茄樣品的重量(g)。

        1.2.3 不同成熟期番茄果實(shí)維生素C含量的測(cè)定 從每份種質(zhì)資源中選取3株(3次重復(fù))長(zhǎng)勢(shì)良好的番茄植株,在番茄果實(shí)綠熟期、白熟期、轉(zhuǎn)色期、完熟期4個(gè)時(shí)期,摘取健康的番茄果實(shí)進(jìn)行維生素C含量的測(cè)定,測(cè)定方法同“1.2.2”。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 維生素C溶液的吸收曲線與標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

        由圖1可知,在波長(zhǎng)200~280 nm范圍內(nèi),維生素C溶液有一個(gè)最大吸收峰,最大吸收波長(zhǎng)為243 nm,所以測(cè)定番茄果實(shí)中維生素C的吸光度時(shí)選擇波長(zhǎng)為243 nm。由圖2可知,維生素C的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.065 1x-0.000 8,其中R2=0.997 4,表明溶液吸光度和維生素C的濃度相關(guān)性較大,所以可以通過(guò)吸光度計(jì)算番茄果實(shí)中維生素C的含量。

        2.2 番茄種質(zhì)資源篩選

        對(duì)50份番茄種質(zhì)資源果實(shí)中維生素C含量的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,在50份種質(zhì)資源材料中果實(shí)維生素C含量呈現(xiàn)離散型分布,為7.35~ 37.72 g/100 g(FW),其中維生素C含量較高的有“13582”、“13633”、“13469”,其果實(shí)中維生素C含量分別為37.72、36.78、36.20 g/100 g(FW)。

        2.3 番茄果實(shí)性狀和不同熟期維生素C含量的變化

        通過(guò)對(duì)50份番茄材料維生素C含量的測(cè)定,篩選出3份維生素C含量相對(duì)較高的番茄材料“13582”、“13003”、“13719”和1份維生素C含量較低的番茄材料“13573”,對(duì)其果實(shí)性狀和不同熟期維生素C含量的變化規(guī)律進(jìn)行分析,結(jié)果見(jiàn)表2和圖3。

        由表2可知,材料“13582”果實(shí)中維生素C含量最高,且可溶性固形物含量最高;材料“13003”果實(shí)中維生素C含量相對(duì)較高,可溶性固形物含量較低,果型指數(shù)適中,在4種材料中果實(shí)品質(zhì)最好;材料“13573”果實(shí)中維生素C含量最低,且可溶性固形物含量相對(duì)較高,果型指數(shù)偏大,在4種材料中果實(shí)品質(zhì)最差。

        由圖3可知,不同番茄材料同一熟期果實(shí)中維生素C含量不同,但整個(gè)成熟時(shí)期內(nèi)果實(shí)中維生素C含量的變化呈現(xiàn)一定規(guī)律。在4個(gè)熟期內(nèi),挑選出的4份番茄材料維生素C含量整體呈上升趨勢(shì),從綠熟期到白熟期維生素C含量升高較快,之后變化趨于平緩,轉(zhuǎn)色期略有降低,到完熟期維生素C含量達(dá)到最大值,但與白熟期差別不大。

        3 討論

        目前,對(duì)于維生素C含量的測(cè)定已有多種方法,如碘滴定法、2,6-二氯酚靛酚法、紫外分光光度法、熒光法、高效液相色譜法等,其中高效液相色譜法、熒光法要求樣品的純度較高,需要精密儀器;碘滴定、2,6-二氯酚靛酚法滴定終點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)較難統(tǒng)一;紫外分光光度法精確度相對(duì)較高,測(cè)量方便,因此,本試驗(yàn)采用紫外分光光度法測(cè)定維生素C的含量[6-8]。維生素C包括還原型維生素C和氧化型維生素C兩種[9],其中新鮮番茄中以還原型維生素C為主,所以測(cè)定過(guò)程中研磨時(shí)需要加入0.1%的HCl快速操作,減少還原型維生素C的氧化,確保測(cè)定準(zhǔn)確度更高。

        本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)50份番茄種質(zhì)資源進(jìn)行篩選,選出了3個(gè)高維生素C含量的番茄材料“13582”、“13633”和“13469”,這3份番茄材料果實(shí)中維生素C含量均在36.20 g/100 g(FW)以上,對(duì)于高維生素C含量番茄品種的選育具有利用價(jià)值。在篩選過(guò)程中發(fā)現(xiàn),綠色果皮的番茄果實(shí)與黃色果皮的番茄果實(shí)相比,維生素C含量整體水平較高,推測(cè)番茄果實(shí)維生素C含量可能與果皮顏色有關(guān)。

        對(duì)挑選的4份番茄材料果實(shí)不同熟期維生素C含量變化規(guī)律的研究中發(fā)現(xiàn),不同番茄材料果實(shí)在整個(gè)成熟時(shí)期內(nèi)維生素C含量的變化趨勢(shì)相同,推測(cè)番茄維生素C含量的變化趨勢(shì)和番茄品種無(wú)關(guān),均是從綠熟期到白熟期維生素C含量積累較多,而從白熟期到晚熟期維生素C含量變化較小。根據(jù)這一規(guī)律,可以選擇在番茄綠熟期施用微生物土壤增肥劑提高其維生素C的含量[10]。

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        [9] 魯曉燕,羅強(qiáng)勇.不同草莓品種果實(shí)中維生素C含量變化的研究[J].北方園藝,2005(1):56-57.

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