張小華

（武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，湖北 武漢430071；公安縣人民醫(yī)院普外科，湖北 公安434300）

黃玉榮，楊娟

（公安縣人民醫(yī)院普外科，湖北 公安434300）

內(nèi)皮素（ET）是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的重要血管活性物質(zhì)，其對(duì)肝硬化患者肝損害和門脈血流動(dòng)力學(xué)的影響受到廣泛關(guān)注［1－3］。我們通過(guò)檢測(cè)患者血清ET－1、透明質(zhì)酸酶（HA）、Ⅲ型前膠原（PⅢP）、Ⅳ型膠原（Ⅳ－C）、層粘連蛋白（LN）水平，探討ET－1在肝硬化形成中的意義，并分析ET－1與門脈血流動(dòng)力學(xué)的關(guān)系，為疾病的治療提供依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

選取我院2013年1月至2014年1月收治的肝炎肝硬化患者60例（觀察組）和慢性肝炎患者20例（對(duì)照組）。觀察組中男36例、女24例，年齡19～71（42±11）歲。均符合2000年西安第10次全國(guó)傳染病與寄生蟲(chóng)病會(huì)議修訂的 《病毒性肝炎防治方案》中肝硬化診斷標(biāo)準(zhǔn)，肝功能Child－Pugh分級(jí)A級(jí)20例、B級(jí)22例、C級(jí)18例。對(duì)照組中男13例、女7例，年齡21～68（36±12）歲。所有患者均無(wú)原發(fā)性心、肺、腎疾病和糖尿病、高血壓等內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病及其他炎性疾病。觀察組與對(duì)照組一般情況比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

所有患者采血前3d停用血管活性劑、利尿劑等，禁食12h后自肘靜脈采血3ml注入裝有10g／dl EDTA－Na2和抑肽酶的聚苯乙烯試管中混勻，4℃離心，分離血漿－20℃保存待測(cè)；進(jìn)行彩色多普勒超聲檢查，觀察門靜脈主干血流方向，用脈沖多普勒在門靜脈官腔中取樣，取樣角度＜60°，并測(cè)量門靜脈寬度（Dpv）、門靜脈血流速度（Vpv），根據(jù)血管面積和流速計(jì)算門靜脈血流量（Qpv）。

主要儀器：GC－1500型γ放射免疫計(jì)數(shù)器（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司）、EOS－880半自動(dòng)生化分析儀（意大利）、HP－M2410型彩色多普勒超聲儀（日本）。主要試劑及藥盒：北京東亞免疫技術(shù)研究所制造的ET測(cè)定試劑盒、10g／dl EDTA－Na2、抑肽酶，上海海軍醫(yī)學(xué)生物技術(shù)中心制造的 HA、Ⅳ－C、LN試劑盒，芬蘭Orion Diagnostica公司制造PⅢP試劑盒。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料均以（±s）表示，計(jì)量資料組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)及直線相關(guān)分析。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肝硬化患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平及其與肝功能分級(jí)的關(guān)系

觀察組患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平均明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；血清ET－1、HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平呈現(xiàn)出肝功能C級(jí)＞B級(jí)＞A級(jí)，且均明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 肝硬化患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN水平及其與肝功能分級(jí)的關(guān)系

2.2 肝硬化患者血清ET－1與HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN的相關(guān)性分析

肝硬化患者血清ET－1與HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN呈現(xiàn)明顯正相關(guān)。見(jiàn)表2。

表2 肝硬化患者血清ET－1與HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN的相關(guān)性

2.3 不同肝功能狀態(tài)下血清ET－1與Dpv、Vpv、Qpv的關(guān)系

觀察組患者血清ET－1、Dpv、Vpv、Qpv均明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與肝功能分級(jí)同步，Dpv呈現(xiàn)C級(jí)＞B級(jí)＞A級(jí)，且與A級(jí)比較，B級(jí)明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與B級(jí)比較，C級(jí)明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。Vpv、Qpv均呈現(xiàn)A級(jí)＞B級(jí)＞C級(jí)，且與A級(jí)比較，B級(jí)明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與B級(jí)比較，C級(jí)明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同肝功能狀態(tài)下血清ET－1與Dpv、Vpv、Qpv的關(guān)系

由表3知，患者血清ET－1與Dpv呈現(xiàn)強(qiáng)正相關(guān)（r＝0.837，P＜0.05），與Vpv、Qpv呈明顯負(fù)相關(guān)（r＝－0.752、－0.714，P＜0.05）。

3 討論

肝硬化是臨床上常見(jiàn)的慢性肝病，肝功能損害、門脈高壓是其突出表現(xiàn)［4］。內(nèi)皮素（ET）來(lái)源于內(nèi)皮細(xì)胞，由21個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，具有廣泛的病理生理作用，對(duì)機(jī)體多種組織、器官產(chǎn)生復(fù)雜的生物學(xué)效應(yīng)［5－8］。ET家族認(rèn)為由3個(gè)血管活性肽構(gòu)成，在ET－1、ET－2、ET－3中，ET－1具有最強(qiáng)的縮血管作用［9－10］，肝臟為機(jī)體ET來(lái)源的主要場(chǎng)所之一，而ET－1和其受體作為病原因素和誘發(fā)因子在肝臟疾病中被廣泛研究［11－12］。

肝硬化時(shí)ET－1水平表現(xiàn)為肝功能C級(jí)＞B級(jí)＞A級(jí)＞對(duì)照組，表明肝硬化患者血清ET－1升高與肝功能損害程度有關(guān)。肝功能越差，ET－1升高越明顯，提示ET－1對(duì)肝硬化形成和發(fā)展起重要作用。肝臟合成ET－1部位主要在間質(zhì)細(xì)胞及膽道上皮細(xì)胞［13－14］。正常人肝臟間質(zhì)細(xì)胞及膽道上皮細(xì)胞ET－1弱表達(dá)，ET－1受體在肝內(nèi)廣泛分布于肝細(xì)胞、竇狀隙內(nèi)皮細(xì)胞、門靜脈、中央靜脈，故肝硬化內(nèi)皮細(xì)胞、膽道上皮細(xì)胞ET－1合成明顯升高［15－16］。ET－1能調(diào)節(jié)肝臟微循環(huán)，促使肝血竇收縮，導(dǎo)致肝血竇血流減少甚至完全停止，細(xì)胞供氧減少，從而發(fā)生缺血、缺氧性損傷及慢性纖維化等［17－19］。同時(shí)肝臟是ET－1清除場(chǎng)所之一，肝硬化患者清除ET－1能力下降，血清ET－1會(huì)明顯升高。肝硬化時(shí)肝細(xì)胞變性壞死外，同時(shí)部分肝細(xì)胞增生，肝內(nèi)血管重建，增生的血管內(nèi)皮合成分泌ET－1，肝功能減退對(duì)ET－1滅活能力降低［20］。隨著ET－1水平增高，引起肝內(nèi)小血管、肝竇、門靜脈收縮而導(dǎo)致門脈血流動(dòng)力學(xué)改變，血管壁對(duì)切應(yīng)力的感應(yīng)變化進(jìn)一步刺激ET－1釋放增加，加重門脈高壓，構(gòu)成惡性循環(huán)［21］。

HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN可以反映膠原生成及纖維化情況。本研究中患者血清ET－1和HA、PⅢP、Ⅳ－C、LN均明顯高于對(duì)照組，并且肝硬化患者血漿中ET－1水平隨Child－PughA、B、C級(jí)呈遞增變化，B級(jí)與A級(jí)、C級(jí)與B級(jí)ET－1水平差異明顯，表明ET－1與肝硬化的嚴(yán)重程度呈明顯正相關(guān)性。

門靜脈寬度（Dpv）、門靜脈血流速度（Vpv）和門靜脈血流量（Qpv）反映了門脈血流動(dòng)力學(xué)的變化。本研究中比較了不同肝功能狀態(tài)下門靜脈寬度（Dpv）、門靜脈血流速度（Vpv）和門靜脈血流量（Qpv）水平與血清ET－1水平相關(guān)性，呈現(xiàn)血清ET－1與Dpv呈現(xiàn)強(qiáng)正相關(guān)，與Vpv、Qpv呈明顯負(fù)相關(guān)，反映了ET－1對(duì)門脈血流動(dòng)力學(xué)的影響。

綜上所述，肝硬化者血漿ET－1水平反映了肝硬化的嚴(yán)重程度，并對(duì)肝硬化門脈血流動(dòng)力學(xué)造成紊亂，在門脈高壓的形成及發(fā)展中起重要作用。

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