朱梅（荊州市傳染病（胸科）醫(yī)院麻醉科，湖北 荊州434000）

萬(wàn)紹華（長(zhǎng)江大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北 荊州434023）

肺缺血再灌注損傷常見(jiàn)于肺移植、體外循環(huán)、肺動(dòng)脈切除重建、失血性休克等，炎性反應(yīng)在肺缺血再灌注損傷中起重要作用［1］。丙泊酚是常用的鎮(zhèn)靜催眠藥、麻醉藥，在臨床上被廣泛應(yīng)用于各種麻醉。研究表明，丙泊酚可影響多種細(xì)胞因子和炎癥反應(yīng)通路，具有抗氧自由基、抗脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的功能及減輕炎癥反應(yīng)的作用［2］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察丙泊酚對(duì)肺組織中炎性介質(zhì)和脂質(zhì)過(guò)氧化的變化，進(jìn)一步探討丙泊酚對(duì)肺缺血再灌注損傷炎性反應(yīng)的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

健康雄性SD大鼠30只，體質(zhì)量210～280g，由長(zhǎng)江大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。丙泊酚注射液由AstraZeneca公司提供。腫瘤壞死因子－α（TNF－α）、IL－6、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）測(cè)定試劑盒購(gòu)自博士德公司。722型光柵分光光度計(jì)。

1.2 方法

1.2.1 模型建立 依照文獻(xiàn)［3］，3%戊巴比妥鈉25mg／kg腹腔注射麻醉，氣管切開(kāi)插管后接小動(dòng)物呼吸機(jī)，通氣頻率60～70次／min，潮氣量10ml／kg，呼吸比2∶1。持續(xù)心電監(jiān)測(cè)。于左第5肋間左前側(cè)開(kāi)胸，暴露左肺門，肝素2mg／kg腹腔注射，5min后，用微血管夾夾閉左肺門，同時(shí)潮氣量減少1／3。缺血90min后開(kāi)放，恢復(fù)原潮氣量，再灌注2h后處死動(dòng)物，提取肺泡灌洗液（BALF），留取左肺組織標(biāo)本。

1.2.2 動(dòng)物分組 隨機(jī)將實(shí)驗(yàn)大鼠分為3組，每組10只。假手術(shù)對(duì)照組（A組）：左肺門游離后不夾閉；肺缺血再灌注組（B組）：夾閉左肺門90min后開(kāi)放，機(jī)械通氣2h；丙泊酚預(yù)處理組（C組）：左肺門夾閉前20min，經(jīng)尾靜脈注射丙泊酚20mg／kg。肺缺血再灌注組給予同體積的生理鹽水。

1.2.3 指標(biāo)測(cè)定 采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）測(cè)定BALF中的TNF－α、IL－6的含量；選取部分肺組織置于玻璃勻漿器制備肺組織勻漿，采用722型光柵分光光度計(jì)測(cè)定SOD、MDA含量。剩下肺組織稱重，80℃下烘干24h再稱其重量，兩者之比為肺組織濕干質(zhì)量比（W／D）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

計(jì)量資料以（±s）表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與假手術(shù)組（A組）比較，肺缺血再灌注組（B組）BALF中TNF－α、IL－6和肺組織 W／D均增高，SOD含量明顯下降，MDA含量明顯上升，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。給予丙泊酚預(yù)處理（C組），與肺缺血再灌注組相比，BALF中TNF－α、IL－6和肺組織 W／D均降低，肺組織SOD含量明顯升高，MDA含量明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠BALF中TNF－α、IL－6以及肺組織W／D、SOD和MDA的比較

3 討論

研究表明，在肺缺血再灌注損傷中，細(xì)胞因子等炎性介質(zhì)的異常釋放是重要環(huán)節(jié)［4］。TNF－α和IL－6的作用極為重要，TNF－α是主要炎性介質(zhì)，IL－6是由單核巨噬細(xì)胞分泌的多效應(yīng)細(xì)胞因子，它能引起其他炎性介質(zhì)如TNF－α等進(jìn)一步釋放，加重全身性炎癥反應(yīng)。本研究觀察到肺缺血再灌注組BALF中TNF－α、IL－6較假手術(shù)組增高，也表明再灌注期間炎性反應(yīng)增強(qiáng)。

目前認(rèn)為肺缺血再灌注損傷與血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的失調(diào)密切有關(guān)，表現(xiàn)為損傷后血管通透性增加［4］。肺W／D用來(lái)評(píng)價(jià)肺水含量，其增高反映血管通透性的增加。本研究發(fā)現(xiàn)肺缺血再灌注損傷和丙泊酚預(yù)處理組肺W／D明顯增高，亦表明再灌注期間肺血管損傷后通透性增加，肺水腫加重。

在缺血和再灌注時(shí)，機(jī)體或細(xì)胞內(nèi)自由基的產(chǎn)生和抗氧化防御之間嚴(yán)重失衡，導(dǎo)致活性氧在機(jī)體或細(xì)胞內(nèi)蓄積而引起細(xì)胞毒性反應(yīng)，從而導(dǎo)致組織損傷的過(guò)程［5］。本研究觀察到再灌注后肺組織SOD含量明顯下降，MDA含量明顯上升，與文獻(xiàn)［2］一致。表明缺血再灌注后肺組織內(nèi)氧自由基的產(chǎn)生與清除的動(dòng)態(tài)平衡遭到破壞，進(jìn)而破壞肺內(nèi)皮細(xì)胞及細(xì)胞器膜結(jié)構(gòu)和功能，最終引起肺水腫、出血、滲出等損害。

本研究觀察到，丙泊酚能夠降低再灌大鼠BALF中TNF－α、IL－6含量和肺組織W／D比值，提高肺組織中SOD水平，降低MDA含量，表明丙泊酚能夠減輕缺血再灌注損傷后的炎性反應(yīng)，發(fā)揮對(duì)缺血再灌注后肺損傷的保護(hù)作用。有研究表明，丙泊酚可調(diào)節(jié)FMLP受體而抑制細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度增加，也可直接抑制電壓依賴性鈣離子通道或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)儲(chǔ)備的鈣離子釋放［6－7］。目前普遍認(rèn)為丙泊酚具有抗自由基、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的作用，降低自由基損害，丙泊酚可能通過(guò)抗擊腦缺血再灌注后自由基損傷而起到保護(hù)作用。還有實(shí)驗(yàn)證明丙泊酚能抑制缺血再灌注后神經(jīng)元凋亡，阻止延遲性神經(jīng)元死亡［8］。此外，丙泊酚的大豆油溶劑－長(zhǎng)鏈甘油三酯（LCT）也可參與丙泊酚的抑制作用，LCT可能利用其脂溶特性，直接與膜NADPH結(jié)合，延遲NADPH氧化酶復(fù)合物形成，抑制黏附、吞噬作用和呼吸爆發(fā)［9］。

綜上所述，缺血再灌注肺損傷實(shí)質(zhì)是一種炎癥損傷。丙泊酚主要通過(guò)抑制缺血再灌注過(guò)程中TNF－α、IL－6等炎性介質(zhì)的釋放，減輕肺血管損傷，降低肺毛細(xì)血管的通透性，降低脂質(zhì)過(guò)氧化水平，減輕炎癥反應(yīng)及肺水腫，從而對(duì)肺缺血再灌注產(chǎn)生保護(hù)作用。

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