王志東 張子軍

鐵在人體中含量約為4 g, 主要存在兩類功能性結(jié)構(gòu)中。一種含量占70%左右, 以紅細胞中的血紅蛋白、肌纖維中的肌紅蛋白的形式存在；另一種含量占30%, 以鐵蛋白或含鐵血黃素等貯存鐵的形式貯存于骨髓和肝、脾中。鐵是線粒體呼吸鏈和核糖核酸氧化酶及還原酶的組成成分, 在體內(nèi)氧化-還原反應(yīng)中起著重要作用。而肝臟是其貯存和代謝的重要器官, 因此, 肝臟鐵代謝異常與肝臟疾病密切相關(guān)。通過對2006年1月～2013年12月115例慢性乙型肝炎的肝組織中的沉積性含鐵血黃素染色, 以期了解其與慢性乙型肝炎分級和分期的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 慢性乙型肝炎患者共計115例。男75例,女40例, 年齡21～61歲, 平均年齡31.4歲。慢性乙型肝炎診斷的分級和分期根據(jù)2005年9月中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會、肝病學(xué)分會聯(lián)合修訂的《病毒性肝炎防治方案》進行。依據(jù)分級和分期的結(jié)果進行分組［輕度(A)、中度(B)、重度(C)］, 每組33例；另設(shè)肝硬化組(16例)?？傆嬎慕M。

1.2 研究方法 以中性甲醛固定肝穿組織、85%～100%梯度酒精脫水、二甲苯透明、650石蠟包埋。切片厚度3～4 μm, 每例切4張, 分別進行常規(guī)染色(HE法)、網(wǎng)狀纖維染色(Gomori法)、膠原纖維染色(Masson法)和含鐵血黃素染色(Schmeltzer法)［1］。切片根據(jù)常規(guī)染色、網(wǎng)狀纖維染色、膠原纖維染色進行慢性乙型肝炎的分級和分期；鐵染色結(jié)果觀察：①顯色程度：分弱、中、強, 分別用1、2、3表示。②顯色范圍：a.高倍視野顯色范圍<1/4；b.高倍視野顯色范圍1/4～2/4；c.高倍視野顯色范圍2/4～3/4；d.高倍視野顯色范圍>3/4。③顯色指數(shù)=顯色程度×顯色范圍：取其均數(shù)為每張切片檢測指標(biāo)的最終顯色指數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS13.0進行數(shù)據(jù)處理。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 網(wǎng)狀纖維染色中, 網(wǎng)狀纖維被染成黑色, 背景呈淡黃色；膠原纖維染色中, 膠原纖維被染成綠色, 背景呈紅色。

2.2 含鐵血黃素染色中, 鐵顆粒被染為藍色, 背景呈淡紅色。在輕、中度兩組可見肝細胞內(nèi)少量陽性表達；重度及肝硬化組陽性表達細胞數(shù)明顯增多, 并與肝纖維化程度呈明顯的正相關(guān)性。重度肝炎及肝硬化組織中含鐵血黃素染色的表達明顯高于輕度及中度慢性肝炎(P<0.01)。見表1。

表1 慢性乙型肝炎分級分期含鐵血黃素(±s)

表1 慢性乙型肝炎分級分期含鐵血黃素(±s)

注：重度肝炎及肝硬化組織中含鐵血黃素表達明顯高于輕度及中度慢性肝炎, aP<0.01

項目 含鐵血黃素輕度A(G0-2S0-2)1.50±1.26中度B(G3S3)3.30±1.64重度C(G4S4)6.00±3.63a肝硬化 8.01±3.28a

3 討論

肝臟鐵負荷增加所導(dǎo)致的結(jié)果常表現(xiàn)為肝臟纖維化或肝硬化。其病理組織學(xué)表現(xiàn)為肝組織門脈區(qū)最先積聚鐵而最易受損, 肝細胞中存在異常多的棕色色素(含鐵血黃素沉積)與組織內(nèi)增多的結(jié)締組織, 在鐵過載后期表現(xiàn)更為明顯。

這項研究結(jié)果表明, 慢性乙型肝炎肝組織分級分期的逐漸增高, 肝組織內(nèi)含鐵血黃素染色指數(shù)也逐漸增加, 特別在重型肝炎和肝硬化的肝組織中增加明顯。慢性乙型肝炎肝組織中含鐵血黃素染色指數(shù)增加, 推測和下列因素相關(guān)：①肝細胞壞死時, 細胞中的貯存鐵進入血液, 進而又被其他細胞吸收。②肝臟炎癥, 門脈壓力增高, 導(dǎo)致脾功能亢進, 紅細胞破壞增加, 血中血紅蛋白增加, 肝細胞吸收鐵負荷增加。③肝臟炎癥導(dǎo)致其鐵轉(zhuǎn)化的能力下降。

肝臟纖維化與鐵過剩程度有關(guān), 有作者發(fā)現(xiàn)鐵過剩的大鼠肝貯脂細胞內(nèi)膠原合成及Disse間隙內(nèi)膠原沉積增加, 提示鐵可直接促進肝膠原合成［2］。鐵過?？纱龠M自由基及脂質(zhì)過氧化的發(fā)生與溶酶體破壞, 導(dǎo)致細胞損傷［3］。鐵過剩引起肝纖維化可能也因自由基與膠質(zhì)過氧化使溶酶體破壞導(dǎo)致細胞損傷, 激活間質(zhì)膠原合成系統(tǒng), 從而引起肝纖維化。

Sebastiani等［4］通過回顧性研究發(fā)現(xiàn)：慢性乙型肝炎患者, 肝臟鐵沉積和血清鐵水平升高都很常見, 而血清鐵的水平與鐵蛋白水平正相關(guān), 從而間接說明慢性乙型肝炎患者的血清鐵蛋白水平是普遍升高的。馮紅萍［5］對89例慢性乙型重癥肝炎患者動態(tài)檢測甲胎蛋白與血清鐵蛋白的變化情況時發(fā)現(xiàn), 血清鐵蛋白隨病情加重而逐漸升高, 以重癥肝炎升高最為顯著。而且, 隨著病情的轉(zhuǎn)化, 血清鐵蛋白水平也隨之變化, 最終生存下來的患者血清鐵蛋白由高轉(zhuǎn)低, 而最終死亡的患者血清鐵蛋白則持續(xù)處于高水平, 證實了血清鐵蛋白與肝臟病變嚴(yán)重程度一致。

從既往的研究成果及本項研究結(jié)果看, 在乙型肝炎的發(fā)病過程中, 機體鐵負荷過重增加了肝細胞的損傷。若采取一些減輕機體鐵負荷的方法, 如：低鐵飲食、避免不必要的大量輸血等, 可能會減輕乙肝患者的肝損傷。

［1］中華醫(yī)學(xué)會編叢.臨床技術(shù)操作規(guī)范病理學(xué)分冊.北京：人民軍醫(yī)出版社, 2004(04):1.

［2］Pietrangelo A, Rocchi E, Schiaffonati L, et al.Liver gene expression during chronic dietary iron overload in rats.Hepatology, 1990(11):798.

［3］Ozaki M, Kawabata T, Awai M.Iron-catalyzed Hydroxyl radicals in vitro.Biochem , 1998(250):589.

［4］Sebastiani G, Tempesta D, Alberti A.Hepatic iron overload is common in chronic hepatitis B and is more severe in patients coinfected with hepatitis D virus.J Viral Hepat, 2012(19):170-176.

［5］馮紅萍.甲胎蛋白與血清鐵蛋白聯(lián)合檢測在慢性乙型重癥肝炎中的臨床意義.現(xiàn)代診斷與治療, 2007(18):232-233.