王業(yè)盈 施 明

南京同仁堂藥業(yè)有限責(zé)任公司，江蘇 南京 210012

膽舒排石顆粒是我公司自行研制的新藥品種，由梔子、金錢草、茵陳等18味中藥組成，臨床上主要用于膽石病合并慢性膽囊炎濕熱兼氣血瘀阻證。為保證該制劑的安全、有效、質(zhì)量可控，采用高效液相色譜法測定該藥品中梔子苷的含量。

1 儀器與試藥

Agilent 1100高效液相色譜儀，十萬分之一電子天平(sartorius)，KQ－300DE型數(shù)控超聲儀。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水。梔子苷對照品 (批號:110749－200309，中國藥品生物制品檢定所提供)。膽舒排石顆粒 (南京同仁堂藥業(yè)有限責(zé)任公司)。缺味陰性樣品:按處方分別配成相應(yīng)的缺味處方藥，模擬制劑工藝，加相應(yīng)輔料制成。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:依利特 SinoChrom ODS－BP柱(5um，4.6×250mm);流動相:乙腈－水 (15∶85);流速:1.0ml/min;柱溫:35℃;檢測波長:238nm。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 取梔子苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40μg的梔子苷溶液，備用。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品裝量差異項下的顆粒，粉碎成細粉，取1g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，超聲提取40分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，備用［1－2］。

2.2.3 陰性對照溶液的制備 取缺梔子的樣品，按2.2.2項下的方法制成陰性對照溶液。

2.3 干擾試驗 分別吸取對照品、供試品溶液、陰性對照溶液各10μL，按照“2.1項”下的色譜條件測定，結(jié)果陰性無干擾［3］。色譜圖見圖1、圖2、圖3。

2.4 線性考察 分別精密量取1ml、2ml、4ml、6ml、8ml、10ml的梔子苷對照品溶液 (70.5μg/ml)，移入10ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻。分別吸取10μl注入高效液相色譜儀，測定，記錄峰面積。以峰面積Y對進樣濃度X(μg/ml)進行線性回歸，得回歸方程為:Y=1820043X+11313，r=0.9998(n=6)，線性范圍為70.5ug～705ug。

2.5 精密度試驗 取同一批次的樣品1.0g，精密稱定，按“2.2.2項”下的方法制備成供試品溶液，連續(xù)進樣6次，體積10μml，測定其峰面積［4］。計算RSD為1.02%，符合要求，表明該方法的精密度較好。

2.6 重現(xiàn)性試驗 精密稱取6份同一批號的樣品，按照“2.2.2”項下的方法制成供試品溶液，進樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積［4］。計算得RSD為0.52%，符合要求。表明該方法的重現(xiàn)性較好。

2.7 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，分別于0h、4h、8h、12h、16h、20h進樣，進樣體積10μl，注入高效液相中測定其峰面積，計算得RSD為1.13%，符合要求。表明供試品溶液在20h內(nèi)比較穩(wěn)定。

2.8 加樣回收率試驗 取已知含量的樣品約0.5g，精密稱定，加入一定量的橙皮苷對照品，按“2.2.2項”下的方法制成供試品溶液，測定其峰面積。計算得平均回收率為100.6%，RSD為1.9%，均符合要求，說明該方法可以用于橙皮苷的含量測定。具體結(jié)果見表1所示。

表1 加樣回收率試驗結(jié)果 (n=2)

2.9 含量測定 分別取三個不同批次的膽舒排石顆粒樣品1g，精密稱定，按照2.2.2項下的方法制成供試品溶液，測定橙皮苷的含量，結(jié)果見表2所示。

表2 樣品含量測定結(jié)果(n=2)

3 討論

膽舒排石顆粒是由金錢草、梔子等十八味中藥精制而成，處方藥味多，相互干擾大，最初標(biāo)準(zhǔn)是采用薄層掃描法測定梔子苷的含量，但操作復(fù)雜，精密度較差，回收率低，現(xiàn)經(jīng)過研究改為采用高效液相色譜法測定成品中梔子苷的含量，方法快速，結(jié)果準(zhǔn)確，操作簡便，可用于膽舒排石顆粒的質(zhì)量研究。

［1］中華人民共和國藥典2010年版 (一部)［S］．北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010，202．

［2］譚忠軍，楊慈海，程麗軍，等．HPLC測定清火梔麥片中梔子苷的含量［J］．中成藥，2005，27，(28):988－989．

［3］奚永蘭，徐富柱．高效液相色譜法測定乳寧顆粒中芍藥苷的含量［J］．中國民族民間醫(yī)藥，2012，21(6):42－43．

［4］蔣永海．高效液相色譜法測定金膽片中虎杖苷的含量［J］．西北藥學(xué)雜志，2006，21(4):148－150．