高 敏，劉愛蘭，郭存九

(山西醫(yī)科大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)科，太原 030001;*通訊作者，E-mail:guocunjiu@126.com)

巨大兒(macrosomia，MS)是指出生時(shí)體重≥4 000 g的新生兒，在我國(guó)巨大兒的發(fā)生率為7%－10%［1］，并且發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)。巨大兒引起的近期、遠(yuǎn)期并發(fā)癥嚴(yán)重影響母嬰的健康，研究巨大兒發(fā)生的原因備受廣大研究者的關(guān)注，目前認(rèn)為妊娠期糖尿病與巨大兒的發(fā)生密切相關(guān)，但具體機(jī)制尚未完全明了。人新飽食分子蛋白1(nesfatin-1)是一種新近在下丘腦和腦干中發(fā)現(xiàn)的分泌肽，在2型糖尿病和胰島素抵抗人群中表達(dá)異常［2，3］。RBP4是一種新的循環(huán)性脂肪源性因子，其水平的增加能夠?qū)е乱葝u素敏感性的降低，改變葡萄糖的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)［4］。本研究旨在探討nesfatin-1和RBP4在妊娠糖尿病巨大兒母血、臍血中的表達(dá)及意義，為巨大兒的研究提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象及分組

收集2009－09～2011－01期間在山西醫(yī)科大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院、第一臨床醫(yī)學(xué)院進(jìn)行產(chǎn)前檢查并行剖宮產(chǎn)終止妊娠的單胎初產(chǎn)婦，分為以下幾組:①妊娠糖尿病(GDM)巨大兒組25例，分娩新生兒出生體重≥4 000 g的妊娠期糖尿病(妊娠糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)參照1999年美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)診斷標(biāo)準(zhǔn))孕婦。②糖耐量正常(NGT)巨大兒組25例，分娩新生兒出生體重≥4 000 g，孕婦糖耐量正常。③妊娠期糖尿病正常兒組25例，孕婦診斷為妊娠糖尿病，新生兒體重介于2 500－4 000 g之間。④妊娠對(duì)照組25例，孕婦糖耐量及新生兒體重均正常。各組產(chǎn)婦在孕周、年齡方面的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 母血、臍血中nesfatin-1與RBP4的檢測(cè)

研究對(duì)象于入院擇期剖宮產(chǎn)術(shù)晨，抽取空腹肘靜脈血5 ml，放于消毒干燥的EP管中，待血液凝固后1 000 r/min離心15 min，分離血清。剖宮產(chǎn)術(shù)中抽取臍靜脈血3 ml，1小時(shí)內(nèi)分離，4℃，3 500 r/min，10 min。離心后留取血清于消毒干燥EP管中，－70℃保存待用。血清 nesfatin-1(美國(guó) Phoenix Pharmaceuticals)與 RBP4(美國(guó) R＆D)采用 ELISA法，檢測(cè)過程按照試劑盒說明進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 不同組別母血、臍血中nesfatin-1，RBP4的表達(dá)

不同組別臍血中nesfatin-1及RBP4的表達(dá)趨勢(shì)與母血基本一致(見表1)，GDM巨大兒母血nesfatin-1的濃度低于NGT巨大兒，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=－2.287，P=0.034)，GDM 正常兒母血 nesfatin-1的濃度低于NGT正常兒，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=－3.007，P=0.016)。母血 nesfatin-1 在 GDM巨大兒與 GDM 正常兒(t=0.220，P=0.674)，NGT巨大兒與 NGT 正常兒(t=0.987，P=0.342)中的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

GDM巨大兒、GDM正常兒及NGT巨大兒母血RBP4的濃度均高于NGT正常兒，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t分別為 8.052，6.735，3.872，均 P＜0.01)。母血RBP4的濃度在GDM巨大兒及NGT巨大兒(t=1.788，P=0.082)，GDM 巨大兒與 GDM 正常兒(t=0.695，P=0.212)中的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 不同組別母血、臍血中Nesfatin-1及RBP4的表達(dá)情況

2.2 母血中nesfatin-1，RBP4的表達(dá)與母血葡萄糖濃度、胎兒體重的相關(guān)性

母血nesfatin-1表達(dá)水平與母血葡萄糖濃度呈負(fù)相關(guān)(r=－0.223，P=0.021)，與胎兒體重?zé)o顯著相關(guān)性(r=－0.055，P=0.602);母血 RBP4 表達(dá)水平與母血葡萄糖濃度(r=0.305，P=0.002)及胎兒體重(r=0.537，P=0.001)呈正相關(guān)。

3 討論

巨大兒發(fā)生由多因素構(gòu)成，機(jī)制復(fù)雜，糖代謝異常與巨大兒的關(guān)系密切，糖代謝異常母親的代謝紊亂是引起胎兒肥胖的原因，由于血糖可自由通過胎盤，引起胎兒高胰島素血癥，從而促進(jìn)胎兒蛋白合成增加、肝糖原、脂肪沉積增多，胎兒生長(zhǎng)發(fā)育加速。

nesfatin-1是由核組蛋白2(NUCB2)經(jīng)激素原轉(zhuǎn)化酶剪切成的片段之一［5］，廣泛分布于下丘腦的各個(gè)核團(tuán)、腦干、垂體中樞神經(jīng)系統(tǒng)及胃黏膜、胰腺、睪丸等外周組織，主要發(fā)揮抑食功能。最近研究報(bào)道，nesfatin-1在糖尿病及糖調(diào)節(jié)受損(IGR)等方面發(fā)揮著潛在作用。Li等［6］的研究表明，l型糖尿病患者空腹Nesfatin-1水平較健康對(duì)照者輕度升高，而2型糖尿病患者則明顯低于健康對(duì)照者和l型糖尿病患者。許麗萍等［7］報(bào)道，nesfatin-1水平在肥胖的T2DM患者中顯著降低，且與BMI相關(guān)，而nesfatin-1水平在巨大兒患者母血及臍血中表達(dá)的研究鮮見報(bào)道。本研究結(jié)果顯示，不同組別臍血中nesfatin-1的表達(dá)趨勢(shì)與母血基本一致，nesfatin-1水平由低至高分別為GDM巨大兒、GDM正常兒、NGT巨大兒、NGT正常兒。當(dāng)孕婦糖耐量正常時(shí)，其血清nesfatin-1表達(dá)無(wú)顯著差異。當(dāng)孕婦診斷為妊娠期糖尿病時(shí)，無(wú)論新生兒是否為巨大兒，其血清nesfatin-1表達(dá)均下調(diào)。相關(guān)性分析顯示母血nesfatin-1表達(dá)水平與母血葡萄糖濃度呈負(fù)相關(guān)，而與胎兒體重?zé)o顯著相關(guān)性。

RBP4屬于RBP家族成員，是一種新的循環(huán)性脂肪源性因子。RBP4與糖代謝密切相關(guān)，在動(dòng)物和人體實(shí)驗(yàn)中可見RBP4水平的增加能夠?qū)е乱葝u素敏感性的降低，改變葡萄糖的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。它釋放瘦素、抵抗素、脂聯(lián)素，改變其他器官脂肪的組織聚集和能量狀態(tài)，從而改變胰島素分泌和胰島素敏感性，與非妊娠正常對(duì)照組相比，妊娠期婦女血清RBP4水平均明顯升高［8］，妊娠糖尿病患者血清RBP4水平較正常妊娠婦女顯著升高［9］。基于上述研究基礎(chǔ)，本研究進(jìn)一步觀察了RBP4在巨大兒母血及臍血中的表達(dá)情況，結(jié)果表明:不同組別臍血中RBP4的表達(dá)趨勢(shì)與母血基本一致，與NGT正常兒相比，GDM巨大兒、GDM正常兒、NGT巨大兒血清RBP4的表達(dá)水平增高。當(dāng)新生兒為巨大兒時(shí)，無(wú)論孕婦是否診斷為妊娠期糖尿病，其RBP4的表達(dá)水平均上調(diào);當(dāng)新生兒為正常兒時(shí)，GDM孕婦血清RBP4的表達(dá)水平高于NGT孕婦。相關(guān)性分析顯示母血RBP4表達(dá)水平與母血葡萄糖濃度及胎兒體重呈正相關(guān)。

綜上所述，nesfatin-1可能參與了妊娠糖尿病的發(fā)生發(fā)展，與巨大兒的形成無(wú)明顯關(guān)系，而RBP4不但與妊娠糖尿病密切相關(guān)，并且可能是巨大兒發(fā)生的危險(xiǎn)因素，二者發(fā)揮作用的具體機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。

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