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        絨毛和胎盤中Jagged-1/Jagged-2的表達(dá)與蛻膜中CD56+NK表達(dá)相關(guān)性探討

        2014-11-20 05:56:06蔣春林
        中外醫(yī)療 2014年24期
        關(guān)鍵詞:蛻膜絨毛陽性細(xì)胞

        于 哲 蔣春林

        廣州中醫(yī)藥大學(xué)祈福醫(yī)院婦產(chǎn)科,廣東廣州 511495

        流產(chǎn)是婦女妊娠過程中的一個(gè)過程,妊娠期流產(chǎn)和免疫系統(tǒng)有著密切的關(guān)系[1]。該研究2013年3月—2014年2月間通過對(duì)該院妊娠期流產(chǎn)病例臨床資料分析,觀察流產(chǎn)病例胎盤中Notch配體Jagged-1、Jagged-2和CD56+NK細(xì)胞定位和表達(dá)情況,從而分析妊娠期脫膜中CD56+NK細(xì)胞表達(dá)水平和Notch配體Jagged-1、Jagged-2之間的關(guān)系,為分析流產(chǎn)原因,給予相應(yīng)的措施以相應(yīng)的理論依據(jù)。報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取該院2013年3月—2014年2月收治的妊娠期流產(chǎn)對(duì)象42例和30例正常剖宮產(chǎn)對(duì)象臨床資料進(jìn)行分析,其中依據(jù)流產(chǎn)方式對(duì)42例妊娠期流產(chǎn)對(duì)象進(jìn)行分組,人工流產(chǎn)組22例,年齡 22~36歲,平均年齡(25.6±5.4)歲,孕周 5~11周,平均孕周(7.5±2.0)周,自然流產(chǎn)組 20例,年齡 23~37 歲,平均年齡(25.2±5.1)歲,孕周 6~10 周,平均孕周(7.3±2.1)周。另外取 42例流產(chǎn)對(duì)象的絨毛組織標(biāo)本作為絨毛組,剖宮產(chǎn)對(duì)象取其胎盤作為胎盤組,年齡23~37歲,平均年齡(26.5±4.4)歲。人工流產(chǎn)組和自然流產(chǎn)組、絨毛組和胎盤組研究對(duì)象的資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,具有可比性。

        1.2 方法

        Jagged-1、Jagged-2和CD56+NK細(xì)胞均采用免疫組化方法進(jìn)行測定。首先進(jìn)行固定標(biāo)本、對(duì)其進(jìn)行脫水、透明、浸蠟然后包埋,將其切至厚度為3~5μm。染色之前37℃烤箱過夜,脫蠟,水化,酒精、水進(jìn)行清洗,制成玻片放在濕盒內(nèi),加入3%過氧化氫,蒸餾水沖洗,緩沖液浸泡振蕩,進(jìn)行抗原修復(fù)。分別滴加鼠抗人單克隆抗體CD56和CD16,兔抗人多克隆抗體Jagged-2、Jagged-1在組織上,通過PBS沖洗切片,加酶標(biāo)抗鼠/兔聚合物,37℃孵育30 min,沖洗切片,緩沖液浸潤、振蕩,加入DAB進(jìn)行顯色,1min通過蒸餾水終止顯色,通過蘇木素進(jìn)行復(fù)染。通過高倍顯微鏡進(jìn)行觀察,隨機(jī)選擇15個(gè)高倍視野,計(jì)算每隔視野陽性細(xì)胞面積和視野總面積的比值,呈現(xiàn)黃色或者棕黃色為陽性反應(yīng)。

        1.3 觀察指標(biāo)

        ①觀察絨毛組和胎盤組Jagged-1、Jagged-2表達(dá)情況;②觀察自然流產(chǎn)組和人工流產(chǎn)組絨毛中的CD56+、Jagged-1及Jagged-2的表達(dá)情況;③觀察CD56+、Jagged-1及Jagged-2表達(dá)的相關(guān)情況。

        1.4 統(tǒng)計(jì)方法

        通過采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0建立數(shù)據(jù)庫進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,通過t檢驗(yàn)主要對(duì)計(jì)量資料進(jìn)行分析,運(yùn)用直線相關(guān)性的分析。

        2 結(jié)果

        2.1 絨毛組和胎盤組Jagged-1、Jagged-2表達(dá)情況

        絨毛組和胎盤組Jagged-1、Jagged-2表達(dá)情況,見表1。胎盤組Jagged-1高于絨毛組,Jagged-2低于絨毛組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        表1 絨毛組和胎盤組Jagged-1、Jagged-2表達(dá)情況()

        表1 絨毛組和胎盤組Jagged-1、Jagged-2表達(dá)情況()

        組別Jagged-1 Jagged-2絨毛組(n=42)胎盤組(n=30)t值P值13.5±1.015.3±1.17.22<0.0527.6±1.216.7±1.435.44<0.05

        2.2 人工流產(chǎn)組和自然流產(chǎn)組絨毛中 Jagged-1、Jagged-2及CD56+的表達(dá)情況

        自然流產(chǎn)組和人工流產(chǎn)組絨毛中CD56+、Jagged-1及Jagged-2的表達(dá)情況,見表2。自然流產(chǎn)組Jagged-1、Jagged-2及CD56+的表達(dá)均低于人工流產(chǎn)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        表2 人工流產(chǎn)組和自然流產(chǎn)組絨毛中Jagged-1、Jagged-2及CD56+的表達(dá)情況()

        表2 人工流產(chǎn)組和自然流產(chǎn)組絨毛中Jagged-1、Jagged-2及CD56+的表達(dá)情況()

        組別Jagged-1Jagged-2 CD56+人工流產(chǎn)組(n=22)自然流產(chǎn)組(n=20)t值P值13.6±1.111.0±1.010.26<0.0527.3±1.113.7±1.053.69<0.059.6±1.26.7±1.010.82<0.05

        2.3 Jagged-1陽性細(xì)胞和Jagged-2陽性細(xì)胞的表達(dá)水平

        CD56+NK細(xì)胞和絨毛組織中的Jagged-1陽性細(xì)胞表達(dá)水平、Jagged-2陽性細(xì)胞表達(dá)水平均呈現(xiàn)明顯正相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.91,0.95,P<0.05)。

        3 討論

        胚胎與母體之間接觸的界面稱為母胎界面,它包含了胎兒滋養(yǎng)層和母體子宮蛻膜。由當(dāng)蛻膜化誘導(dǎo)因子對(duì)子宮的內(nèi)膜間質(zhì)刺激時(shí)導(dǎo)致增殖分化從而形成了異質(zhì)性組織,這種組織叫做脫膜組織。脫膜組織由多種細(xì)胞組成[2]。胚胎及其附屬物的主要營養(yǎng)來源是蛻膜,其不僅具有很好的營養(yǎng)作用,同時(shí)也是一種局部的免疫器官,對(duì)于妊娠有著重要的作用。免疫細(xì)胞的入侵和蛻膜化是妊娠早期的主要過程,蛻膜中的B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的在早期妊娠中的數(shù)有所減少,大約占蛻膜組織中20%左右的免疫細(xì)胞,子宮蛻膜自然殺傷細(xì)胞占子宮淋巴細(xì)胞的70%,主要分布在受精卵著床部位的周圍。Notch信號(hào)通路主要包括Notch受體、Notch配體、CSL DNA結(jié)合蛋白,其中Notch受體在T細(xì)胞、B細(xì)胞、干細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等多種細(xì)胞表面分布,其包括五種配體,主要是 Jagged-1、Jagged-2、Delta-like1、Delta-like3、Delta-like4.Jagged-1在胎盤、心臟、肺、腎均有廣泛的表達(dá),其主要是對(duì)組織發(fā)育進(jìn)行調(diào)控,對(duì)造血前體細(xì)胞發(fā)育有效的維持,并且參與增殖分化[3]。有研究表明[4],Notch信號(hào)在人胎盤中有重要的調(diào)節(jié)作用,Notch信號(hào)和配體Jagged-1參與了血管的塑性和穩(wěn)定。Jagged-1通過Notch信號(hào)系統(tǒng)參與T/NK細(xì)胞的更新和發(fā)育。以往資料顯示[5],人體侵襲性胃癌和Notch配體Jagged-1有著密切的關(guān)系。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)證實(shí)Jagged-1對(duì)Notch型號(hào)途徑介導(dǎo),從而誘發(fā)多發(fā)性骨髓瘤發(fā)生增殖。有資料顯示[6],Jagged-2在造血干細(xì)胞上表達(dá)豐富,提高了造血祖細(xì)胞的增生能力。在正常的妊娠絨毛組織中,有四種Notch受體進(jìn)行表達(dá),其中第一期絨毛組織中的Jagged-1表達(dá)遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于在妊娠第三期的胎盤組織中的Jagged-1表達(dá),而Jagged-2的表達(dá)和 Jagged-1正好相反,Jagged-2、Jagged-1、對(duì)妊娠成功起著顯著的重要的作用[7]。在早期妊娠中,有不同功能的NK細(xì)胞和外周血表型在蛻膜中,其主要是CD56brightCD16dim,此類因子在滋養(yǎng)層細(xì)胞和受精卵著床周圍浸潤。資料顯示[8],自然流產(chǎn)蛻膜中的表達(dá)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于人工流產(chǎn)蛻膜中CD56+NK細(xì)胞表達(dá)量,通過研究顯示,當(dāng)自然流CD56+NK細(xì)胞的數(shù)量下降,可以導(dǎo)致母胎界面細(xì)胞因子中的GM-CSF和TGF-β表達(dá)的降低,進(jìn)一步的對(duì)胎兒的生長發(fā)育環(huán)境造成了影響,最終導(dǎo)致流產(chǎn)。Jagged-1會(huì)刺激造血祖細(xì)胞發(fā)生分化,形成NK細(xì)胞Jagged-2可以誘導(dǎo)臍帶血 CD34+細(xì)胞表達(dá) CD56brightCD16-、CD94-和CD117+NK細(xì)胞,并且表達(dá)NKG2D表達(dá),對(duì)于K256細(xì)胞有一定的殺傷活性。綜上所述,Jagged-1、Jagged-2可能共同參與了NK細(xì)胞表型的變化,從而對(duì)妊娠結(jié)局造成影響,并且形成妊娠免疫耐受。

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