王 菁,丁茗敏
隨著實驗室檢測儀器自動化程度的不斷普及,不但提高了臨床檢驗的精密性和敏感性,也為臨床快速診斷提供了可靠的實驗依據(jù)。全自動分析儀的應(yīng)用,解決了尿液分析中的重要問題,但對有些項目的檢查,也存在著不可忽視的缺陷。本文就尿液干化學(xué)分析和傳統(tǒng)手工法測紅細(xì)胞、白細(xì)胞和尿蛋白所得結(jié)果進(jìn)行對比分析。
1.1 一般資料 標(biāo)本均來自筆者所在療養(yǎng)院健康查體人員。
1.2 儀器和試劑 尿液干化學(xué)分析儀(H-300);尿十一項干化學(xué)試紙條(H11-I-I);速而準(zhǔn)膠體金便隱血試紙條;顯微鏡;離心機(jī);酒精燈;冰醋酸;10 ml尖底離心管。
1.3 方法 用一次性塑料杯隨機(jī)收集查體人員潔凈中段尿,充分混勻后分3管,1管用于干化學(xué)分析,1管用于常規(guī)鏡檢,1管用于隱血試驗。按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》對尿標(biāo)本進(jìn)行干化學(xué)分析,并對每份充分混勻的標(biāo)本進(jìn)行測定并記錄試驗結(jié)果,然后再用加熱醋酸法檢測尿蛋白記錄結(jié)果。尿常規(guī)鏡檢用10 ml光底離心管取10 ml混勻的尿液,以1500 r/min,離心5 min,傾去上清液,留取0.2 ml沉渣涂片鏡檢,并記錄紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢驗結(jié)果,對結(jié)果不相符合的,囑查體者重留一份新鮮尿液,如上檢測。
1200份尿液標(biāo)本用尿分析儀和傳統(tǒng)手工兩種方法檢測尿蛋白質(zhì)、紅細(xì)胞和白細(xì)胞,結(jié)果見表1;兩種方法陽性、陰性符合情況見表2。
表1 兩種方法尿液檢測結(jié)果
表2 兩種方法尿液檢測陽性及陰性相符合情況
干化學(xué)法紅細(xì)胞測定有204例陽性,而手工法為186例,對于不相符的標(biāo)本,經(jīng)膠體金隱血試驗,15例隱血陽性,3例加熱重新測定為易熱酶所致假陽性,原因不明。去干擾因素后陽性符合率可達(dá)83%。
由表1可知,尿干化學(xué)分析儀和傳統(tǒng)手工兩種方法檢測尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞和尿蛋白的結(jié)果雖然存在著一定的差異,但經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,差異無顯著性意義。說明兩種方法均可為查體所用,而且兩種方法結(jié)合進(jìn)行還能起到互補的作用。
3.1 關(guān)于紅細(xì)胞 分析儀204份陽性標(biāo)本中,手工鏡檢有22份未見紅細(xì)胞。這種情況在實際工作中經(jīng)常遇到。因為干化學(xué)法測定紅細(xì)胞不僅能測定完整的各種形狀的紅細(xì)胞,還可檢測游離的血紅蛋白,以及具有過氧化酶作用的其他物質(zhì)。1200份尿標(biāo)本中干化學(xué)法紅細(xì)胞測定有204例陽性,鏡檢為186例,對不相符的標(biāo)本經(jīng)膠體金試驗,發(fā)現(xiàn)83%的標(biāo)本隱血呈陽性,17%呈假陽性。分析顯微鏡檢測的漏檢原因,這主要是由于紅細(xì)胞在形態(tài)上發(fā)生了很大的變化,尿液酸堿度、滲透壓的改變及放置時間過長,造成紅細(xì)胞膜破裂,紅細(xì)胞中的血紅蛋白散出,而紅細(xì)胞成碎片或成影細(xì)胞,在普通高倍鏡下難以發(fā)現(xiàn)造成的;其次有可能是由于腎臟病變造成紅細(xì)胞破裂及芽孢的脫落或出現(xiàn)多個芽孢,包體變小,折光性變?nèi)?,或是小球形畸形紅細(xì)胞,整體固縮,折光性強(qiáng),容易將其誤認(rèn)為是真菌孢子等[1]。因此對干化學(xué)法陽性而鏡檢陰性的尿標(biāo)本需進(jìn)行免疫法隱血測定,不能盲目認(rèn)為無有形紅細(xì)胞就否定了干化學(xué)法。根據(jù)表1、2的結(jié)果,手工鏡檢紅細(xì)胞陽性186例標(biāo)本中分析儀有2例呈陰性,詢問查體者其中1例每日口服VitC已有2月有余,另1例口服VitC 3周有余,而大量VitC可造成尿中紅細(xì)胞分析儀檢測出現(xiàn)假陰性。
3.2 關(guān)于白細(xì)胞 分析儀陽性的183份標(biāo)本有4份手工鏡檢未見白細(xì)胞,囑體檢者重留新鮮尿液檢測,還有3份標(biāo)本相符合,這是由于分析儀是檢測粒細(xì)胞漿中特有的酯酶,尿液在膀胱中駐留時間過長或尿標(biāo)本放置過久,尿中pH及各種因素的影響,導(dǎo)致了白細(xì)胞的破壞,其特異酯酶游離于尿中,因此鏡檢時出現(xiàn)了假陰性。檢測中發(fā)現(xiàn)女性白帶增多和鹽類結(jié)晶等情況同樣可造成假陽性。手工鏡檢190份陽性標(biāo)本中而11份分析儀未檢測出,通過重留尿標(biāo)本,結(jié)果還是如前。將尿沉渣涂片干燥、瑞氏染色油鏡觀察發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞80%以上是淋巴細(xì)胞,這是由于淋巴細(xì)胞不含有粒細(xì)胞特有的酯酶因而呈陰性;尿中有大量先鋒或慶大霉素藥物使白細(xì)胞結(jié)果偏低[2]。有1例鏡檢白細(xì)胞陽性,近期無明顯病史和用藥史,而分析儀卻未檢出,可能是由于白細(xì)胞數(shù)太少,分析儀紙條敏感度不夠所致。
3.3 關(guān)于尿蛋白 分析儀檢測尿蛋白陰性標(biāo)本1176例,手工法檢查有4例陽性(即手工法27例陽性標(biāo)本,分析儀有4例檢測陰性),根據(jù)有關(guān)資料分析,尿中球蛋白4000 mg/L以下干化學(xué)分析儀檢測為陰性,只有達(dá)到5500 mg/L時才會出現(xiàn)可疑反應(yīng)。尿分析儀測定球蛋白的敏感性是白蛋白的1/100~1/50,因此導(dǎo)致了假陰性反應(yīng)[3]。分析儀檢測蛋白陽性的24份標(biāo)本中有1份手工加熱醋酸法呈陰性。根據(jù)報道:尿中混有其它分泌物或細(xì)胞成分較多時,可出現(xiàn)假陽性。鏡檢這1份標(biāo)本含有++的黏液絲,且含有白細(xì)胞。
通過以上分析筆者認(rèn)為,尿干化學(xué)分析儀的檢測和傳統(tǒng)手工法聯(lián)合應(yīng)用具有互補性,兩者缺一不可。為了保證檢驗質(zhì)量,首先要把好儀器質(zhì)量關(guān)、試紙條的質(zhì)量關(guān),堅持每日質(zhì)量控制并規(guī)范操作;其次是檢驗人員對尿中有形成分的形態(tài)及變化規(guī)律要有明確的認(rèn)識,切不可為了省事而以分析儀代替必要的手工和鏡檢。
[1]叢玉隆,馬俊龍.尿液干化學(xué)分析與顯微鏡檢查[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志,1997,10(5):135.
[2]劉偉平,殷朋剛,鐘輝秀.UF-100尿沉渣分析儀檢測品液白細(xì)胞、紅細(xì)胞和管型的干擾因素研究[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2013,19(9):77-78.
[3]葉應(yīng)嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].南京:東南大學(xué)出版社,1997.120-125.