饒鳴皋

(安徽省巢湖市第二人民醫(yī)院兒科，安徽巢湖 238000)

難治性肺炎支原體肺炎(refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia，RMPP)是經(jīng)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療后，患者的病情仍然得不到緩解的一種肺炎支原體肺炎，該類患者的病情發(fā)展較快、病程較長且肺內(nèi)病變加重，甚至容易引起各種肺外并發(fā)癥［1］，此外，近年來兒童RMPP的發(fā)病率逐漸上升［2］，嚴重影響了患兒的健康。目前臨床上缺乏該類患兒的早期判別方法，有研究指出，RMPP可能與免疫反應(yīng)有關(guān)［3］，而血清炎性因子在免疫反應(yīng)過程中具有重要的意義，故本研究從血清炎性因子入手，分析血清炎性因子在該類患者中變化情況，旨在進一步探究RMPP患兒的早期診斷方法，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年6月—2013年6月期間，在我院接受治療的肺炎支原體肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP)患兒共40 例，其中男性 28 例(70.0%)，女性12例(30.0%);年齡在1～13歲，平均年齡(5.3±1.6)歲，均符合《諸福棠實用兒科學(xué)·上冊》中關(guān)于的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］。分組:將19例符合以下診斷標(biāo)準(zhǔn)之一的 MPP患兒，設(shè)為RMPP組:(1)發(fā)生脫水的患兒;(2)小兒全身炎癥反應(yīng)綜合征患兒;(3)經(jīng)X線胸片顯示雙側(cè)多肺葉受累;(4)經(jīng)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療無效，且發(fā)熱癥狀持續(xù)10 d以上的患兒。普通MPP組:剩下的21例作為普通MPP組。對照組:同時納入21例同期健康體檢兒童作為對照組。本次研究排除標(biāo)準(zhǔn):(1)患有呼吸系統(tǒng)疾病患兒，如肺結(jié)核、支氣管哮喘等;(2)使用免疫抑制劑、調(diào)節(jié)劑或糖皮質(zhì)激素患兒;(3)近期急性感染病史、過敏性和免疫相關(guān)疾病者。三組在年齡、性別等方面差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 采集入院時RMPP組與普通MPP組患者的外周靜脈血2 mL，作為實驗標(biāo)本，經(jīng)3 000 r·min-1離心后，分離出血清并保存在溫度為-80℃的冰箱中待檢測，同時，抽取對照組的血液樣本2 mL，均送至檢驗科進行檢驗。采用流式細胞儀對血清中的白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-4(IL-4)、白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-10(IL-10)、干擾素-γ(IFN-γ)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等炎性因子含量，此外，RMPP組與普通MPP組治療后，按同樣方法檢測血清炎性因子含量。實驗每一步的操作步驟，均嚴格按規(guī)程進行操作，并由同一專業(yè)檢驗師進行檢驗。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用統(tǒng)計軟件SPSS17.0進行分析。相關(guān)指標(biāo)數(shù)據(jù)，主要為計量數(shù)據(jù)，采用(±s)表示，均通過正態(tài)性檢驗，三組間的比較為單因素方差分析+LSD多重比較;其它計數(shù)資料，采用百分比表示，組間的兩兩比較，采用卡方檢驗。以檢驗結(jié)果P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清炎性因子檢測結(jié)果對比 入院時三組的血清炎性因子 IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ 等指標(biāo)對比，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且RMPP組的IL-4、IL-10等指標(biāo)顯著高于普通MPP組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，而兩組在IL-2、IL-6、IFN-γ及 TNF-α等的表達相比較其差異不顯著，見表1。

表1 三組血清炎性因子檢測結(jié)果對比/ng·L-1

2.2 普通MPP組與RMPP組入院時與治療后血清炎性因子對比 RMPP組治療后的IL-10與入院時相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.05)，而 IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ 及 TNF-α等指標(biāo)對比，治療前后差異不顯著(P＞0.05)，而普通MPP組治療后 IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ等指標(biāo)，分別與入院時相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P＜0.05)，見表2。

表2 普通MPP組與、RMPP組入院時與治療后血清炎性因子對比(±s)

表2 普通MPP組與、RMPP組入院時與治療后血清炎性因子對比(±s)

注:各組治療前后差值的(±s)未在表中列示。前后比較為配對t檢驗。

指標(biāo)RMPP組(n=19)普通MPP組(n=21)入院時 治療后t P 入院時 治療后t P 56 1.73±0.40 1.132 0.265 IL-4 3.72±0.88 3.56±0.71 0.617 0.542 3.29±1.10 1.22±0.31 8.300 0.000 IL-6 9.78±6.31 8.14±3.32 1.003 0.325 8.10±3.38 4.83±1.69 3.965 0.000 IL-10 7.89±2.11 4.33±1.10 6.521 0.000 4.32±1.11 2.69±0.62 5.875 0.000 IFN-γ 13.21±3.30 12.01±3.13 1.150 0.258 10.51±3.22 7.91±1.88 3.195 0.003 TNF-α 2.66±0.89 2.52±0.79 0.513 0.611 2.49±0.75 2.IL-2 1.86±0.51 1.71±0.43 0.980 0.334 1.90±0.39±0.98 0.371 0.713

3 討論

肺炎支原體肺炎經(jīng)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療1 w后，病情仍無明顯好轉(zhuǎn)，則往往容易發(fā)展為RMPP，此外若肺炎支原體肺炎患者合并有心血管系統(tǒng)疾病、皮膚病、腎臟等重要器官病變以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病等并發(fā)癥，則病程往往大于3 w，嚴重者甚至導(dǎo)致遷延不愈［4］，進而成為難治性肺炎支原體肺炎。據(jù)相關(guān)研究資料表明，RMPP的發(fā)生及發(fā)展與免疫功能紊亂密切相關(guān)［5］，而對免疫功能紊亂發(fā)生機制的研究，已逐漸成為臨床研究的熱點之一，但導(dǎo)致難治性肺炎支原體肺炎患者的血清炎性因子變化原因，尚有諸多不明之處。

在血清炎性細胞因子中，IL-2、IFN-γ是由T淋巴細胞體系中的Th1細胞分泌的，與組織的損傷及炎癥反應(yīng)等有關(guān)，而IL-4、IL-6、IL-10則是由Th2細胞所產(chǎn)生的，不同的血清炎性因子產(chǎn)生相互影響，共同在免疫反應(yīng)過程中發(fā)揮著重要的作用。在本次研究中，三組研究對象之間的血清炎性因子 IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ 等指標(biāo)，經(jīng)單因素方差分析后，均顯示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，這說明Th1細胞與Th2細胞的免疫反應(yīng)，均參與了肺炎支原體肺炎的發(fā)病過程。在進一步的分析中發(fā)現(xiàn)，RMPP組的IL-4、IL-10等指標(biāo)顯著高于普通MPP組，這與施弦等［6］的報道結(jié)果相符合，表明IL-4、IL-10等指標(biāo)在判別RMPP的過程中具有重要的意義，此外，RMPP組患兒治療前后IL-10的表達差異顯著，故IL-10可能作為評估RMPP的療效指標(biāo)。實際上IL-4屬于多功能細胞因子，它不僅可以促進炎癥的發(fā)生，而且還能夠誘導(dǎo)自身免疫性疾病的發(fā)生，而IL-10則是一種抗炎因子，通過抑制促血清炎性因子的表達，從而起到保護機體的作用，這可能是導(dǎo)致RMPP組IL-4、IL-10等的表達高于普通MPP組的原因。而 Martín-Loeches［7］及 Martínez［8］等均指出，IL-6 與抗感染中的過度免疫反應(yīng)有關(guān)，可以作為評估病情嚴重程度及預(yù)測預(yù)后情況等的指標(biāo)。此外，在孫立鋒等［9］的研究中顯示，IFN-γ在MPP急性期感染的患兒中，出現(xiàn)明顯的升高，在本次研究中，普通MPP組與RMPP組的IFN-γ表達與對照組相比，亦出現(xiàn)顯著的上升，但普通MPP組與RMPP組的差異并不顯著，且治療前后RMPP組患兒的IFN-γ的變化并不顯著，故建議IFN-γ不宜作為評估RMPP病情及療效的指標(biāo)。而從IL-2、TNF-α等方面看，本研究中的三組中的對比，均不具有統(tǒng)計學(xué)意義，這與喬紅梅等［10］的報道不相符，可能是由于在機體免疫反應(yīng)中，IL-2、TNF-α未能起到主導(dǎo)作用有關(guān)，有待進一步研究。

綜上所述，RMPP病情的發(fā)生及發(fā)展可能與IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ等變化有關(guān)，IL-4、IL-10等指標(biāo)可以作為判別RMPP的指標(biāo)，而IL-10可能作為評估RMPP的療效指標(biāo)。

［1］ Pereyre S，Renaudin H，Charron A，et al.Clonal spread of Mycoplasma pneumoniae in primary school，Bordeaux，F(xiàn)rance ［J］.Emerg Infect Dis，2012，18(2):343-345.

［2］ 孫漢慶.2006～2010年肺炎支原體肺炎發(fā)病情況調(diào)查分析［J］.安徽醫(yī)藥，2012，16(2):222-224.

［3］ Smith LG.Mycoplasma pneumonia and its complications［J］.Infect Dis Clin North Am，2010，24(1):57-60.

［4］ 胡亞美，江載芳.諸福棠實用兒科學(xué)(上冊)［M］.7版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:1204-1205.

［5］ Shimizu T，Kica Y，Kuwano K.Cytoadherence-dependent induction of inflammatory responses by mycoplasma pneumoniae［J］.Immunology，2011，133(1):51-61.

［6］ 施 弦，黃秋玲，郁 峰，等.兒童難治性肺炎支原體肺炎血清炎性細胞因子的檢測［J］.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報，2013，35(2):221-223.

［7］ Martín-Loeches I，Solé-Violán J，Rodríguez de Castro F，et al.Variants at the promoter of the interleukin-6 gene are associated with severity and outcome of pneumococcal community-acquired pneumonia［J］.Intensive Care Med，2012，38(2):256-262.

［8］ Martínez R，Menéndez R，Reyes S，et al.Factors associated with inflammatory cytokine patterns in community-acquired pneumonia［J］.Eur Respir J，2011，37(2):393-399.

［9］ 孫立鋒，鞠云飛，陳 星，等.肺炎支原體肺炎急性期患兒血清Th1/Th2類細胞因子水平變化及臨床意義［J］.山東醫(yī)藥，2010，50(49):49-50.

［10］喬紅梅，龐煥香，張云峰，等.肺炎支原體肺炎患兒IL-6、IL-10、TNF-α 的變化［J］.臨床兒科雜志，2012，30(1):59-61.