吳 馳，黃 江，李焱鑫，于 露，鄒 俊，呂 琴，劉躍建

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 a.呼吸科;b.檢驗(yàn)科，四川 成都 610072)

支氣管肺泡灌洗常用于肺部炎性疾病及間質(zhì)性肺病的診斷與治療，支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞計(jì)數(shù)對協(xié)助診斷與鑒別肺部炎癥有重要價(jià)值。但灌洗液中細(xì)胞計(jì)數(shù)檢查繁復(fù)耗時(shí)，而臨床醫(yī)生常需要盡早判斷氣道炎癥輕重及鑒別急慢性疾病，以便及時(shí)治療。粒細(xì)胞酯酶由中性粒細(xì)胞合成分泌，常用于泌尿系統(tǒng)感染篩查［1］，檢查方法成熟，但缺乏在支氣管肺疾病中應(yīng)用的報(bào)道，尤其缺乏在支氣管肺泡灌洗液檢測應(yīng)用的報(bào)道。本研究為探討支氣管肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶水平對支氣管肺部疾病診斷的應(yīng)用價(jià)值，對我院2008年1月至2012年12月458例門診患者進(jìn)行了研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 2008年1月至2012年12月我院呼吸科門診肺部炎性疾病患者458例，其中男230例，女228例，年齡17～78歲，平均年齡69.6歲。肺炎168例，肺間質(zhì)纖維化13例，肺內(nèi)結(jié)節(jié)38例，肺內(nèi)占位80例，胸腔積液34例，肺間質(zhì)炎癥7例，慢性咳嗽65例，慢性阻塞疾病53例。入選患者相關(guān)疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)見參考文獻(xiàn)［2～5］。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)，入選者均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 支氣管鏡檢查評估氣道炎癥 嚴(yán)格掌握適應(yīng)證、禁忌證，完善術(shù)前常規(guī)檢查，由呼吸科專業(yè)醫(yī)師按支氣管鏡檢查常規(guī)步驟進(jìn)行。依據(jù)支氣管鏡下氣道黏膜充血水腫嚴(yán)重程度評估炎癥級別為正常、輕度、中度、中重度及重度并記錄。

1.2.2 支氣管肺泡灌洗液采集 具體操作和方法依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會2002年7月制定的《支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)規(guī)范(草案)》［6］?；颊咝g(shù)前6小時(shí)禁飲禁食，術(shù)前以2%利多卡因霧化吸入局部麻醉，應(yīng)用日本產(chǎn)的Olympus BF-260型電子支氣管鏡，灌洗部位以感染病灶部位及影像學(xué)確定，首先經(jīng)活檢孔注入2%利多卡因1～2 ml，做灌洗肺段局部麻醉，然后將氣管鏡對準(zhǔn)段或亞段支氣管開口處，再經(jīng)活檢孔快速注入37℃滅菌生理鹽水。每次25～50 ml，總量100～250 ml，一般不超過300 ml;立即用50～100 mmHg負(fù)壓吸引回收灌洗液，通?；厥章蕿?0% ～80%;用雙層無菌紗布過濾除去懸浮物，保證標(biāo)本清澈透明并記錄總量;裝入硅塑瓶，凍存于-70～-20℃冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，3～6月內(nèi)檢測。肺泡灌洗液經(jīng)雙層紗布過濾后以3000r/min離心，吸取上清液置-70℃冰箱保存，以備以后的檢查。沉淀的細(xì)胞成分用Hank'S液沖洗2次后做細(xì)胞記數(shù)和分類。合格的BAL液:①達(dá)到規(guī)定的回收比例;②紅細(xì)胞數(shù)小于10%;③上皮細(xì)胞小于3%。

1.2.3 支氣管肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶檢測 由檢驗(yàn)科技師采用化學(xué)法對支氣管肺泡灌洗液進(jìn)行檢測，采用半定量方法記錄結(jié)果。

1.2.4 支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 將灌洗液裝入離心管內(nèi)，在4℃下以1200 r/min離心10 min，去除上清液，將離心沉淀的細(xì)胞成分用Hank，S液重復(fù)沖洗、離心2次，每次5 min。最后加Hank'S液3～5 ml制成細(xì)胞懸液。然后在改良的Neubauer計(jì)數(shù)臺上計(jì)數(shù)BALF中的細(xì)胞總數(shù)，以1×106/L表示。采用細(xì)胞離心涂片裝置，在4℃下以1200 r/min離心10 min，將離心細(xì)胞直接平鋪于載玻片上，冷風(fēng)吹干，置于無水乙醇中固定30 min后進(jìn)行HE染色。在40倍光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，進(jìn)行具體的細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn);變量之間關(guān)系分析采用Logistic回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 炎癥評估及支氣管肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶測定結(jié)果 168例肺炎患者中163例支氣管鏡下有炎癥表現(xiàn)，中度以上炎癥表現(xiàn)133例，灌洗液粒細(xì)胞酯酶陽性結(jié)果166例(陽性構(gòu)成比95%)。13例肺間質(zhì)纖維化患者中11例支氣管鏡下有炎癥表現(xiàn)，灌洗液粒細(xì)胞酯酶陽性結(jié)果12例(陽性構(gòu)成比76%)。7例間質(zhì)性肺炎患者均有支氣管鏡下炎癥表現(xiàn)，肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶檢測6例陽性(陽性構(gòu)成比85%)。38例肺內(nèi)結(jié)節(jié)患者僅有4例有鏡下輕度炎癥，無中度以上炎癥表現(xiàn)，其灌洗液粒細(xì)胞酯酶檢測結(jié)果均為陰性。65例慢性咳嗽患者有31例鏡下輕度炎癥表現(xiàn)，其肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶檢測有10例陽性(陽性構(gòu)成比15%)，見表1。

表1 氣管鏡炎癥評估及支氣管肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶測定結(jié)果

2.2 支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 見表2。因素有灌洗液粒細(xì)胞數(shù)、氣管鏡下炎癥程度及C反應(yīng)蛋白，見表3。

表2 支氣管肺泡灌洗細(xì)胞分類計(jì)數(shù) (n)

表3 粒細(xì)胞酯酶與臨床指標(biāo)的Logistic回歸分析

2.3 粒細(xì)胞酯酶與臨床指標(biāo)的相關(guān)性 Logistic回歸分析顯示與支氣管肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶有關(guān)的

3 討論

目前常用C反應(yīng)蛋白、降鈣素原等指標(biāo)評估炎癥，C反應(yīng)蛋白在全身應(yīng)用敏感性高但特異性不高，降鈣素原對評估感染嚴(yán)重程度較好［7］，但對評估間質(zhì)性疾病以及局部氣道炎癥程度缺乏依據(jù)。粒細(xì)胞酯酶由中性粒細(xì)胞合成，與體液中性粒細(xì)胞相關(guān)［8］。本研究顯示支氣管肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶與肺泡灌洗液中性粒細(xì)胞相關(guān)，肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶水平反映氣道粒細(xì)胞水平，進(jìn)一步研究顯示粒細(xì)胞酯酶水平與氣管鏡下炎癥程度密切相關(guān)，通過檢測支氣管肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶有助于客觀評估支氣管肺疾病氣道炎癥程度。

支氣管肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶與患者炎癥指標(biāo)C反應(yīng)蛋白相關(guān)，提示粒細(xì)胞酯酶能較好反映局部的炎癥水平，是較好的炎癥評估指標(biāo)。本研究提示粒細(xì)胞酯酶在間質(zhì)性疾病及急性炎癥陽性構(gòu)成比高，慢性疾病粒細(xì)胞酯酶陽性構(gòu)成比低，檢測支氣管肺泡灌洗液粒細(xì)胞酯酶可以協(xié)助診斷急、慢性炎性疾病，部分占位疾病患者陽性考慮與合并阻塞性炎癥有關(guān)，需進(jìn)一步研究明確。

［1］den Heijer CD，van Dongen MC，Donker GA.Stobberingh EE.Diagnostic approach to urinary tract infections in male general practice patients:a national surveillance study［J］.Br J Gen Pract，2012，62(604):e780-786.

［2］中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會.社區(qū)獲得性肺炎診斷和治療指南［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志，2006，29(10):651-655.

［3］Raghu G，Collard HR，Egan JJ，et al.An official ATS/ERS/JRS/ALAT statement:idiopathicpulmonaryfibrosis:evidence-based guidelines for diagnosis and management.ATS/ERS/JRS/ALAT Committee on Idiopathic Pulmonary Fibrosis［J］.Am J Respir Crit Care Med，2011，183(6):788-824.

［4］中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會哮喘學(xué)組.咳嗽的診斷與治療指南［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志，2009，32(6):407-413.

［5］中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會慢性阻塞性肺疾病學(xué)組.慢性阻塞性肺疾病診治指南(2013年修訂版)［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志，2013，36(4):255-264.

［6］中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會.支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)規(guī)范(草案)［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志，2002，25(7):390-391.

［7］保勇，史夢，喻華，等.檢測血清降鈣素原對感染性疾病及膿毒癥的診斷價(jià)值［J］.實(shí)用醫(yī)院臨床雜志，2012，9(1):94-96.

［8］Jacobs JA，De Brauwer Els IGB，Cornelissen EIM，et al.Correlation of leukocyte esterase detection by reagent strips and the presence of neutrophils［J］.Chest，2000，118:1450-1454.