摘 要：用帶頂芽的幼嫩莖段作外植體，采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。試驗(yàn)表明：誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L，成苗的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

關(guān)鍵詞：驅(qū)蚊香草；組織培養(yǎng)；繁殖

中圖分類號(hào) S567.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2014）18-25-02

驅(qū)蚊香草，又名凈蚊香草，屬牻牛兒苗科天竺葵屬的多年生常綠草本植物。最早是荷蘭、法國(guó)的生物學(xué)家運(yùn)用細(xì)胞融合技術(shù)，將香茅草中所產(chǎn)生香茅醛的基因轉(zhuǎn)移到天竺葵中培育而成的新型植物，在自然條件下可散發(fā)驅(qū)蚊物質(zhì)香茅醛，達(dá)到驅(qū)蚊效果，且具有檸檬香味，由此而得名。驅(qū)蚊香草株型優(yōu)美，氣味芳香，具有生態(tài)驅(qū)蚊、凈化空氣、提神醒腦、抗菌消毒等功效，在歐洲深受歡迎。近幾年來(lái)，我國(guó)許多大中城市開始引進(jìn)栽培驅(qū)蚊香草，需求量逐漸增大，但因其花不育，不能結(jié)實(shí)，傳統(tǒng)的扦插繁殖方法已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)的需求，而組織培養(yǎng)方法可短期內(nèi)獲得大量的再生植株，解決種苗的供求矛盾。為此，筆者采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。

1 材料與方法

1.1 取材與處理 從植株上切下帶頂芽的幼嫩莖段，用0.1%的洗衣粉水?dāng)噭?dòng)漂洗10min，自來(lái)水沖洗20min，以除去外植體表面附著的灰塵和絕大部分雜菌。無(wú)菌條件下用70%的酒精溶液浸泡20s左右，再用0.1%的HgCl2消毒8～10min，無(wú)菌水沖洗4次。將消毒好的外植體切段，以帶2個(gè)節(jié)間為宜，接種到制備好的培養(yǎng)基上。

1.2 試驗(yàn)方法 外植體接種在附加不同濃度的6-BA、NAA和IAA等生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基中（食用糖3%、瓊脂0.6%、pH值5.5～5.8），溫度25±2℃，連續(xù)14h/d光照條件下培養(yǎng)，30d左右形成芽叢；將芽叢分別分割成含2～3個(gè)小芽的小塊進(jìn)行繼代培養(yǎng)，20d左右形成新的芽叢，再繼代；當(dāng)群體達(dá)到所需要的數(shù)量時(shí)，將芽叢轉(zhuǎn)接到成苗培養(yǎng)基上；20d左右，當(dāng)苗高長(zhǎng)1～2cm時(shí)，將無(wú)根苗接種到附加不同濃度NAA、IAA和IBA的1/2MS培養(yǎng)基上，15～20d，苗高達(dá)2～3cm，且根系發(fā)達(dá)時(shí)，即可進(jìn)行煉苗定植。

2 結(jié)果與分析

2.1 叢生芽的誘導(dǎo) 以MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，激素濃度配比見(jiàn)表1。外植體接種7d后，3、4、5、6號(hào)培養(yǎng)基上的莖段腋芽處出現(xiàn)許多綠點(diǎn)；1、2號(hào)培養(yǎng)基上的莖段切口處形成大量愈傷組織，腋芽膨大伸長(zhǎng)；7號(hào)培養(yǎng)基上的莖段僅腋芽伸長(zhǎng)。15d后，3、4、5、6號(hào)培養(yǎng)基上的外植體莖節(jié)處分化出大量小芽，形成芽叢；3號(hào)培養(yǎng)基上形成的幼芽最多（20個(gè)左右），其次為5號(hào)；1、2號(hào)培養(yǎng)基上外植體形成的愈傷組織逐漸老化，無(wú)幼芽分化，膨大伸長(zhǎng)的腋芽也逐漸枯死；7號(hào)培養(yǎng)基上莖段的腋芽繼續(xù)伸長(zhǎng)，無(wú)新的幼芽產(chǎn)生。因此，3號(hào)培養(yǎng)基，即MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L為誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基。

2.2 繼代培養(yǎng) 將誘導(dǎo)分化20d左右的芽叢分割成含2～3個(gè)幼芽的小塊，接種到表1所示的各培養(yǎng)基上，20d后，3、4、5、6、7號(hào)培養(yǎng)基上均分化出新的芽叢，其中以5號(hào)培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的配比最佳，繁殖系數(shù)高，且芽體健壯；6、7號(hào)培養(yǎng)基上的芽叢繁殖系數(shù)偏低；3、4號(hào)培養(yǎng)基雖然也能分出大量芽叢，但芽體多為畸形，逐漸形成水漬狀的玻璃化苗；1、2號(hào)培養(yǎng)基上的幼苗基部形成大量愈傷組織，并逐漸枯死。因此，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為5號(hào)，即MS+9-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

2.3 成苗培養(yǎng) 當(dāng)幼芽群體達(dá)到需要的數(shù)量時(shí)，將芽叢轉(zhuǎn)接到仍以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成苗培養(yǎng)基（下轉(zhuǎn)34頁(yè)）（上接25頁(yè)）上進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，激素配比見(jiàn)表2。7d以后，接種到各培養(yǎng)基上的幼芽均有不同程度的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)，其中以10號(hào)培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L的配比最為適宜，幼苗生長(zhǎng)快而健壯，20d左右苗高達(dá)1～2cm，莖部有少量白根產(chǎn)生，并伴有新的幼芽分化，逐漸成苗。因此，成苗培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為10號(hào)，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L。

表2 成苗培養(yǎng)基的激素配比（mg/L）

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2.4 生根培養(yǎng) 將2cm左右高，具有3～4片葉的無(wú)根苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，以1/2MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加不同濃度的生長(zhǎng)素（見(jiàn)表3）。7d后，17號(hào)即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L培養(yǎng)基上的幼苗長(zhǎng)出大量白根，15d左右，每棵幼苗基部產(chǎn)生7～10條3cm左右長(zhǎng)的根系；而其它激素配比的培養(yǎng)基上，雖幼苗也能長(zhǎng)出根系，但發(fā)根慢，數(shù)量少，苗和根的長(zhǎng)勢(shì)均不如17號(hào)培養(yǎng)基上的幼苗。因此，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為17號(hào)，即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

表3 生根培養(yǎng)的激素配比（mg/L）

[編號(hào)＼&NAA＼&IBA＼&IAA＼&13

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3 煉苗及定植技術(shù)

3.1 煉苗 將2～3cm高、根系發(fā)達(dá)的瓶苗取出，沖洗凈根部瓊脂，栽植于以純蛭石為基質(zhì)的煉苗盤中，澆透水后，用800～1 000倍的百菌清藥液澆灌，放在遮光50%的陰棚內(nèi)，加蓋塑料薄膜保濕，溫度控制在15～25℃，7d后逐漸去掉薄膜，成活率達(dá)90%以上，15d后即可定植。

3.2 定植 驅(qū)蚊香草為多年生常綠草本植物，只要溫度適宜，一年四季均可定植，以春、秋兩季最適。由于煉苗后的瓶苗仍較弱，應(yīng)先定植于疏松透氣、排水良好的基質(zhì)中。本試驗(yàn)采用1∶1的腐殖土和蛭石作基質(zhì)，生長(zhǎng)過(guò)程中，定期噴施適量的尿素和磷酸二氫鉀溶液，苗長(zhǎng)至20cm左右高時(shí)，再次換盒移栽，并作摘心整形處理。驅(qū)蚊香草最適生長(zhǎng)溫度15～25℃，0℃以上的可安全越冬，喜富含有機(jī)質(zhì)、排水良好、疏松肥沃、pH值中性的土壤，喜光、喜溫、怕積水。15℃以上即可正常散發(fā)檸檬香味，適當(dāng)向植株噴霧，可使香芽醛物質(zhì)源源不斷地釋放，30片葉以上的植株驅(qū)蚊效果明顯。

4 討論

（1）由于受時(shí)間和材料的限制，本試驗(yàn)的設(shè)計(jì)帶有很強(qiáng)的經(jīng)驗(yàn)性，范圍窄，其結(jié)果可能具有一定的局限性，有待于進(jìn)一步優(yōu)化、完善。

（2）誘導(dǎo)分化過(guò)程中，一些斷裂的葉柄處也能分化出幼芽，說(shuō)明外植體的取材范圍可擴(kuò)大，應(yīng)作更深入的試驗(yàn)研究。

（3）繼代培養(yǎng)基中的6-BA濃度須低于誘導(dǎo)分化的6-BA濃度，可能與材料體內(nèi)6-BA的積累有關(guān)。

（4）誘導(dǎo)分化培養(yǎng)及繼代培養(yǎng)超過(guò)25d后，瓶苗葉片開始黃化；生根培養(yǎng)超過(guò)20d后，根尖開始變黑，可能與瓶口密閉、材料散發(fā)的醛類物質(zhì)積累濃度過(guò)高有關(guān)。

（5）生根培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，幼苗的發(fā)根對(duì)溫度非常敏感，同一培養(yǎng)架的上下層之間差異很大，應(yīng)做更細(xì)的試驗(yàn)，探索其生根的最佳溫度。

（6）對(duì)驅(qū)蚊香草的驅(qū)蚊效果還應(yīng)進(jìn)行更科學(xué)、深入的試驗(yàn)研究，以便對(duì)其價(jià)值作更客觀的評(píng)價(jià)。

（責(zé)編：張宏民）endprint

摘 要：用帶頂芽的幼嫩莖段作外植體，采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。試驗(yàn)表明：誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L，成苗的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

關(guān)鍵詞：驅(qū)蚊香草；組織培養(yǎng)；繁殖

中圖分類號(hào) S567.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2014）18-25-02

驅(qū)蚊香草，又名凈蚊香草，屬牻牛兒苗科天竺葵屬的多年生常綠草本植物。最早是荷蘭、法國(guó)的生物學(xué)家運(yùn)用細(xì)胞融合技術(shù)，將香茅草中所產(chǎn)生香茅醛的基因轉(zhuǎn)移到天竺葵中培育而成的新型植物，在自然條件下可散發(fā)驅(qū)蚊物質(zhì)香茅醛，達(dá)到驅(qū)蚊效果，且具有檸檬香味，由此而得名。驅(qū)蚊香草株型優(yōu)美，氣味芳香，具有生態(tài)驅(qū)蚊、凈化空氣、提神醒腦、抗菌消毒等功效，在歐洲深受歡迎。近幾年來(lái)，我國(guó)許多大中城市開始引進(jìn)栽培驅(qū)蚊香草，需求量逐漸增大，但因其花不育，不能結(jié)實(shí)，傳統(tǒng)的扦插繁殖方法已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)的需求，而組織培養(yǎng)方法可短期內(nèi)獲得大量的再生植株，解決種苗的供求矛盾。為此，筆者采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。

1 材料與方法

1.1 取材與處理 從植株上切下帶頂芽的幼嫩莖段，用0.1%的洗衣粉水?dāng)噭?dòng)漂洗10min，自來(lái)水沖洗20min，以除去外植體表面附著的灰塵和絕大部分雜菌。無(wú)菌條件下用70%的酒精溶液浸泡20s左右，再用0.1%的HgCl2消毒8～10min，無(wú)菌水沖洗4次。將消毒好的外植體切段，以帶2個(gè)節(jié)間為宜，接種到制備好的培養(yǎng)基上。

1.2 試驗(yàn)方法 外植體接種在附加不同濃度的6-BA、NAA和IAA等生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基中（食用糖3%、瓊脂0.6%、pH值5.5～5.8），溫度25±2℃，連續(xù)14h/d光照條件下培養(yǎng)，30d左右形成芽叢；將芽叢分別分割成含2～3個(gè)小芽的小塊進(jìn)行繼代培養(yǎng)，20d左右形成新的芽叢，再繼代；當(dāng)群體達(dá)到所需要的數(shù)量時(shí)，將芽叢轉(zhuǎn)接到成苗培養(yǎng)基上；20d左右，當(dāng)苗高長(zhǎng)1～2cm時(shí)，將無(wú)根苗接種到附加不同濃度NAA、IAA和IBA的1/2MS培養(yǎng)基上，15～20d，苗高達(dá)2～3cm，且根系發(fā)達(dá)時(shí)，即可進(jìn)行煉苗定植。

2 結(jié)果與分析

2.1 叢生芽的誘導(dǎo) 以MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，激素濃度配比見(jiàn)表1。外植體接種7d后，3、4、5、6號(hào)培養(yǎng)基上的莖段腋芽處出現(xiàn)許多綠點(diǎn)；1、2號(hào)培養(yǎng)基上的莖段切口處形成大量愈傷組織，腋芽膨大伸長(zhǎng)；7號(hào)培養(yǎng)基上的莖段僅腋芽伸長(zhǎng)。15d后，3、4、5、6號(hào)培養(yǎng)基上的外植體莖節(jié)處分化出大量小芽，形成芽叢；3號(hào)培養(yǎng)基上形成的幼芽最多（20個(gè)左右），其次為5號(hào)；1、2號(hào)培養(yǎng)基上外植體形成的愈傷組織逐漸老化，無(wú)幼芽分化，膨大伸長(zhǎng)的腋芽也逐漸枯死；7號(hào)培養(yǎng)基上莖段的腋芽繼續(xù)伸長(zhǎng)，無(wú)新的幼芽產(chǎn)生。因此，3號(hào)培養(yǎng)基，即MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L為誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基。

2.2 繼代培養(yǎng) 將誘導(dǎo)分化20d左右的芽叢分割成含2～3個(gè)幼芽的小塊，接種到表1所示的各培養(yǎng)基上，20d后，3、4、5、6、7號(hào)培養(yǎng)基上均分化出新的芽叢，其中以5號(hào)培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的配比最佳，繁殖系數(shù)高，且芽體健壯；6、7號(hào)培養(yǎng)基上的芽叢繁殖系數(shù)偏低；3、4號(hào)培養(yǎng)基雖然也能分出大量芽叢，但芽體多為畸形，逐漸形成水漬狀的玻璃化苗；1、2號(hào)培養(yǎng)基上的幼苗基部形成大量愈傷組織，并逐漸枯死。因此，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為5號(hào)，即MS+9-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

2.3 成苗培養(yǎng) 當(dāng)幼芽群體達(dá)到需要的數(shù)量時(shí)，將芽叢轉(zhuǎn)接到仍以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成苗培養(yǎng)基（下轉(zhuǎn)34頁(yè)）（上接25頁(yè)）上進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，激素配比見(jiàn)表2。7d以后，接種到各培養(yǎng)基上的幼芽均有不同程度的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)，其中以10號(hào)培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L的配比最為適宜，幼苗生長(zhǎng)快而健壯，20d左右苗高達(dá)1～2cm，莖部有少量白根產(chǎn)生，并伴有新的幼芽分化，逐漸成苗。因此，成苗培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為10號(hào)，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L。

表2 成苗培養(yǎng)基的激素配比（mg/L）

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2.4 生根培養(yǎng) 將2cm左右高，具有3～4片葉的無(wú)根苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，以1/2MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加不同濃度的生長(zhǎng)素（見(jiàn)表3）。7d后，17號(hào)即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L培養(yǎng)基上的幼苗長(zhǎng)出大量白根，15d左右，每棵幼苗基部產(chǎn)生7～10條3cm左右長(zhǎng)的根系；而其它激素配比的培養(yǎng)基上，雖幼苗也能長(zhǎng)出根系，但發(fā)根慢，數(shù)量少，苗和根的長(zhǎng)勢(shì)均不如17號(hào)培養(yǎng)基上的幼苗。因此，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為17號(hào)，即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

表3 生根培養(yǎng)的激素配比（mg/L）

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3 煉苗及定植技術(shù)

3.1 煉苗 將2～3cm高、根系發(fā)達(dá)的瓶苗取出，沖洗凈根部瓊脂，栽植于以純蛭石為基質(zhì)的煉苗盤中，澆透水后，用800～1 000倍的百菌清藥液澆灌，放在遮光50%的陰棚內(nèi)，加蓋塑料薄膜保濕，溫度控制在15～25℃，7d后逐漸去掉薄膜，成活率達(dá)90%以上，15d后即可定植。

3.2 定植 驅(qū)蚊香草為多年生常綠草本植物，只要溫度適宜，一年四季均可定植，以春、秋兩季最適。由于煉苗后的瓶苗仍較弱，應(yīng)先定植于疏松透氣、排水良好的基質(zhì)中。本試驗(yàn)采用1∶1的腐殖土和蛭石作基質(zhì)，生長(zhǎng)過(guò)程中，定期噴施適量的尿素和磷酸二氫鉀溶液，苗長(zhǎng)至20cm左右高時(shí)，再次換盒移栽，并作摘心整形處理。驅(qū)蚊香草最適生長(zhǎng)溫度15～25℃，0℃以上的可安全越冬，喜富含有機(jī)質(zhì)、排水良好、疏松肥沃、pH值中性的土壤，喜光、喜溫、怕積水。15℃以上即可正常散發(fā)檸檬香味，適當(dāng)向植株噴霧，可使香芽醛物質(zhì)源源不斷地釋放，30片葉以上的植株驅(qū)蚊效果明顯。

4 討論

（1）由于受時(shí)間和材料的限制，本試驗(yàn)的設(shè)計(jì)帶有很強(qiáng)的經(jīng)驗(yàn)性，范圍窄，其結(jié)果可能具有一定的局限性，有待于進(jìn)一步優(yōu)化、完善。

（2）誘導(dǎo)分化過(guò)程中，一些斷裂的葉柄處也能分化出幼芽，說(shuō)明外植體的取材范圍可擴(kuò)大，應(yīng)作更深入的試驗(yàn)研究。

（3）繼代培養(yǎng)基中的6-BA濃度須低于誘導(dǎo)分化的6-BA濃度，可能與材料體內(nèi)6-BA的積累有關(guān)。

（4）誘導(dǎo)分化培養(yǎng)及繼代培養(yǎng)超過(guò)25d后，瓶苗葉片開始黃化；生根培養(yǎng)超過(guò)20d后，根尖開始變黑，可能與瓶口密閉、材料散發(fā)的醛類物質(zhì)積累濃度過(guò)高有關(guān)。

（5）生根培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，幼苗的發(fā)根對(duì)溫度非常敏感，同一培養(yǎng)架的上下層之間差異很大，應(yīng)做更細(xì)的試驗(yàn)，探索其生根的最佳溫度。

（6）對(duì)驅(qū)蚊香草的驅(qū)蚊效果還應(yīng)進(jìn)行更科學(xué)、深入的試驗(yàn)研究，以便對(duì)其價(jià)值作更客觀的評(píng)價(jià)。

（責(zé)編：張宏民）endprint

摘 要：用帶頂芽的幼嫩莖段作外植體，采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。試驗(yàn)表明：誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L，成苗的最佳培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

關(guān)鍵詞：驅(qū)蚊香草；組織培養(yǎng)；繁殖

中圖分類號(hào) S567.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2014）18-25-02

驅(qū)蚊香草，又名凈蚊香草，屬牻牛兒苗科天竺葵屬的多年生常綠草本植物。最早是荷蘭、法國(guó)的生物學(xué)家運(yùn)用細(xì)胞融合技術(shù)，將香茅草中所產(chǎn)生香茅醛的基因轉(zhuǎn)移到天竺葵中培育而成的新型植物，在自然條件下可散發(fā)驅(qū)蚊物質(zhì)香茅醛，達(dá)到驅(qū)蚊效果，且具有檸檬香味，由此而得名。驅(qū)蚊香草株型優(yōu)美，氣味芳香，具有生態(tài)驅(qū)蚊、凈化空氣、提神醒腦、抗菌消毒等功效，在歐洲深受歡迎。近幾年來(lái)，我國(guó)許多大中城市開始引進(jìn)栽培驅(qū)蚊香草，需求量逐漸增大，但因其花不育，不能結(jié)實(shí)，傳統(tǒng)的扦插繁殖方法已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)的需求，而組織培養(yǎng)方法可短期內(nèi)獲得大量的再生植株，解決種苗的供求矛盾。為此，筆者采用組織培養(yǎng)技術(shù)，篩選驅(qū)蚊香草的最佳快繁方案。

1 材料與方法

1.1 取材與處理 從植株上切下帶頂芽的幼嫩莖段，用0.1%的洗衣粉水?dāng)噭?dòng)漂洗10min，自來(lái)水沖洗20min，以除去外植體表面附著的灰塵和絕大部分雜菌。無(wú)菌條件下用70%的酒精溶液浸泡20s左右，再用0.1%的HgCl2消毒8～10min，無(wú)菌水沖洗4次。將消毒好的外植體切段，以帶2個(gè)節(jié)間為宜，接種到制備好的培養(yǎng)基上。

1.2 試驗(yàn)方法 外植體接種在附加不同濃度的6-BA、NAA和IAA等生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基中（食用糖3%、瓊脂0.6%、pH值5.5～5.8），溫度25±2℃，連續(xù)14h/d光照條件下培養(yǎng)，30d左右形成芽叢；將芽叢分別分割成含2～3個(gè)小芽的小塊進(jìn)行繼代培養(yǎng)，20d左右形成新的芽叢，再繼代；當(dāng)群體達(dá)到所需要的數(shù)量時(shí)，將芽叢轉(zhuǎn)接到成苗培養(yǎng)基上；20d左右，當(dāng)苗高長(zhǎng)1～2cm時(shí)，將無(wú)根苗接種到附加不同濃度NAA、IAA和IBA的1/2MS培養(yǎng)基上，15～20d，苗高達(dá)2～3cm，且根系發(fā)達(dá)時(shí)，即可進(jìn)行煉苗定植。

2 結(jié)果與分析

2.1 叢生芽的誘導(dǎo) 以MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，激素濃度配比見(jiàn)表1。外植體接種7d后，3、4、5、6號(hào)培養(yǎng)基上的莖段腋芽處出現(xiàn)許多綠點(diǎn)；1、2號(hào)培養(yǎng)基上的莖段切口處形成大量愈傷組織，腋芽膨大伸長(zhǎng)；7號(hào)培養(yǎng)基上的莖段僅腋芽伸長(zhǎng)。15d后，3、4、5、6號(hào)培養(yǎng)基上的外植體莖節(jié)處分化出大量小芽，形成芽叢；3號(hào)培養(yǎng)基上形成的幼芽最多（20個(gè)左右），其次為5號(hào)；1、2號(hào)培養(yǎng)基上外植體形成的愈傷組織逐漸老化，無(wú)幼芽分化，膨大伸長(zhǎng)的腋芽也逐漸枯死；7號(hào)培養(yǎng)基上莖段的腋芽繼續(xù)伸長(zhǎng)，無(wú)新的幼芽產(chǎn)生。因此，3號(hào)培養(yǎng)基，即MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L為誘導(dǎo)分化的最佳培養(yǎng)基。

2.2 繼代培養(yǎng) 將誘導(dǎo)分化20d左右的芽叢分割成含2～3個(gè)幼芽的小塊，接種到表1所示的各培養(yǎng)基上，20d后，3、4、5、6、7號(hào)培養(yǎng)基上均分化出新的芽叢，其中以5號(hào)培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的配比最佳，繁殖系數(shù)高，且芽體健壯；6、7號(hào)培養(yǎng)基上的芽叢繁殖系數(shù)偏低；3、4號(hào)培養(yǎng)基雖然也能分出大量芽叢，但芽體多為畸形，逐漸形成水漬狀的玻璃化苗；1、2號(hào)培養(yǎng)基上的幼苗基部形成大量愈傷組織，并逐漸枯死。因此，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為5號(hào)，即MS+9-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

2.3 成苗培養(yǎng) 當(dāng)幼芽群體達(dá)到需要的數(shù)量時(shí)，將芽叢轉(zhuǎn)接到仍以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成苗培養(yǎng)基（下轉(zhuǎn)34頁(yè)）（上接25頁(yè)）上進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，激素配比見(jiàn)表2。7d以后，接種到各培養(yǎng)基上的幼芽均有不同程度的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)，其中以10號(hào)培養(yǎng)基，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L的配比最為適宜，幼苗生長(zhǎng)快而健壯，20d左右苗高達(dá)1～2cm，莖部有少量白根產(chǎn)生，并伴有新的幼芽分化，逐漸成苗。因此，成苗培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為10號(hào)，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L。

表2 成苗培養(yǎng)基的激素配比（mg/L）

[編號(hào)＼&6-BA＼&NAA＼&8

9

10

11

12＼&0.1

0.05

0.05

0.01

0.01＼&0.2

0.1

0.2

0.1

0.2＼&]

2.4 生根培養(yǎng) 將2cm左右高，具有3～4片葉的無(wú)根苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，以1/2MS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，附加不同濃度的生長(zhǎng)素（見(jiàn)表3）。7d后，17號(hào)即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L培養(yǎng)基上的幼苗長(zhǎng)出大量白根，15d左右，每棵幼苗基部產(chǎn)生7～10條3cm左右長(zhǎng)的根系；而其它激素配比的培養(yǎng)基上，雖幼苗也能長(zhǎng)出根系，但發(fā)根慢，數(shù)量少，苗和根的長(zhǎng)勢(shì)均不如17號(hào)培養(yǎng)基上的幼苗。因此，生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為17號(hào)，即1/2MS+IBA0.2mg/L+IAA0.2mg/L。

表3 生根培養(yǎng)的激素配比（mg/L）

[編號(hào)＼&NAA＼&IBA＼&IAA＼&13

14

15

16

17

18＼&0

0.2

0

0.2

0

0.2＼&0

0

0.2

0.2

0.2

0＼&0

0

0

0

0.2

0.2＼&]

3 煉苗及定植技術(shù)

3.1 煉苗 將2～3cm高、根系發(fā)達(dá)的瓶苗取出，沖洗凈根部瓊脂，栽植于以純蛭石為基質(zhì)的煉苗盤中，澆透水后，用800～1 000倍的百菌清藥液澆灌，放在遮光50%的陰棚內(nèi)，加蓋塑料薄膜保濕，溫度控制在15～25℃，7d后逐漸去掉薄膜，成活率達(dá)90%以上，15d后即可定植。

3.2 定植 驅(qū)蚊香草為多年生常綠草本植物，只要溫度適宜，一年四季均可定植，以春、秋兩季最適。由于煉苗后的瓶苗仍較弱，應(yīng)先定植于疏松透氣、排水良好的基質(zhì)中。本試驗(yàn)采用1∶1的腐殖土和蛭石作基質(zhì)，生長(zhǎng)過(guò)程中，定期噴施適量的尿素和磷酸二氫鉀溶液，苗長(zhǎng)至20cm左右高時(shí)，再次換盒移栽，并作摘心整形處理。驅(qū)蚊香草最適生長(zhǎng)溫度15～25℃，0℃以上的可安全越冬，喜富含有機(jī)質(zhì)、排水良好、疏松肥沃、pH值中性的土壤，喜光、喜溫、怕積水。15℃以上即可正常散發(fā)檸檬香味，適當(dāng)向植株噴霧，可使香芽醛物質(zhì)源源不斷地釋放，30片葉以上的植株驅(qū)蚊效果明顯。

4 討論

（1）由于受時(shí)間和材料的限制，本試驗(yàn)的設(shè)計(jì)帶有很強(qiáng)的經(jīng)驗(yàn)性，范圍窄，其結(jié)果可能具有一定的局限性，有待于進(jìn)一步優(yōu)化、完善。

（2）誘導(dǎo)分化過(guò)程中，一些斷裂的葉柄處也能分化出幼芽，說(shuō)明外植體的取材范圍可擴(kuò)大，應(yīng)作更深入的試驗(yàn)研究。

（3）繼代培養(yǎng)基中的6-BA濃度須低于誘導(dǎo)分化的6-BA濃度，可能與材料體內(nèi)6-BA的積累有關(guān)。

（4）誘導(dǎo)分化培養(yǎng)及繼代培養(yǎng)超過(guò)25d后，瓶苗葉片開始黃化；生根培養(yǎng)超過(guò)20d后，根尖開始變黑，可能與瓶口密閉、材料散發(fā)的醛類物質(zhì)積累濃度過(guò)高有關(guān)。

（5）生根培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，幼苗的發(fā)根對(duì)溫度非常敏感，同一培養(yǎng)架的上下層之間差異很大，應(yīng)做更細(xì)的試驗(yàn)，探索其生根的最佳溫度。

（6）對(duì)驅(qū)蚊香草的驅(qū)蚊效果還應(yīng)進(jìn)行更科學(xué)、深入的試驗(yàn)研究，以便對(duì)其價(jià)值作更客觀的評(píng)價(jià)。

（責(zé)編：張宏民）endprint