王澤祺+李聆睿+張佳燕+杜瑤瑤+杜碧云+崔永一+夏國華

摘要：以樹蘭莖段為外植體，研究不同植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)其愈傷組織誘導(dǎo)、不定芽增殖及生根培養(yǎng)的影響。結(jié)果表明，莖段可同時(shí)誘導(dǎo)出愈傷組織、不定芽。愈傷組織誘導(dǎo)以NAA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.4 mg/L 效果最好，愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)24.44%；以NAA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.2 mg/L對(duì)不定芽的誘導(dǎo)效果最好；生根培養(yǎng)以1/2MS+NAA 1.0 mg/L+活性炭1.0 g/L+蔗糖25 g/L培養(yǎng)基最佳，生根率達(dá)93.06%。

關(guān)鍵詞：樹蘭；組織培養(yǎng)；莖段；不定芽

中圖分類號(hào)：S682.310.4+3；Q943.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2014）08-0045-03

全球約有1 000多種樹蘭屬（Epidendrum）植物。樹蘭屬植物原產(chǎn)自厄瓜多爾，觀賞價(jià)值很高，具有花色繁多、花期長等特點(diǎn)，可作為園林地被植物或室內(nèi)盆栽植物^[1-2]。目前國內(nèi)關(guān)于樹蘭的繁殖技術(shù)還不成熟，一定程度上制約了樹蘭產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。采用組織培養(yǎng)技術(shù)可以大大縮短樹蘭的培育時(shí)間^[3-11]。目前關(guān)于樹蘭組織培養(yǎng)的研究報(bào)道較多^[12-25]。筆者采用正交試驗(yàn)研究樹蘭組織培養(yǎng)技術(shù)，快速生產(chǎn)樹蘭優(yōu)良種苗，旨在為促進(jìn)樹蘭產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供新途徑。

1 材料與方法

1.1 材料

樹蘭無菌苗莖段由浙江農(nóng)林大學(xué)林學(xué)基礎(chǔ)試驗(yàn)教學(xué)中心提供。

1.2 方法

1.2.1 不定芽、愈傷組織誘導(dǎo) 以1/2MS為基本培養(yǎng)基，采用正交試驗(yàn)研究NAA、IBA、6-BA對(duì)樹蘭莖段不定芽及愈傷組織誘導(dǎo)的影響。NAA濃度分別設(shè)置為：0.5、1.0、1.5 mg/L；IBA濃度分別設(shè)置為：0.1、0.2、0.3 mg/L；6-BA濃度分別設(shè)置為：0.2、0.4、1.0 mg/L。將無菌苗莖段切成長約1.0 cm的小段接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每處理接種3瓶，每瓶接種10個(gè)莖段，60 d后觀測(cè)不定芽、愈傷組織的誘導(dǎo)情況，統(tǒng)計(jì)愈傷組織誘導(dǎo)率、不定芽誘導(dǎo)率。計(jì)算公式如下：愈傷組織誘導(dǎo)率=出愈苗數(shù)/接種數(shù)×100%；不定芽誘導(dǎo)率=出芽苗數(shù)/接種數(shù)×100%。

1.2.2 不定芽的增殖培養(yǎng) 以1/2MS為基本培養(yǎng)基，采用正交試驗(yàn)方法研究NAA、IBA、6-BA對(duì)樹蘭莖段不定芽增殖的影響。NAA濃度分別設(shè)置為：0.1、0.2、0.5 mg/L；IBA濃度分別設(shè)置為：0.05、0.1、0.15 mg/L；6-BA濃度分別設(shè)置為：1、1.5、2 mg/L。將不定芽切成長1.0 cm的小段接入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每處理接種3瓶，每瓶接種10個(gè)不定芽，60 d 后觀測(cè)不定芽的增殖情況，統(tǒng)計(jì)不定芽增殖率。計(jì)算公式如下：不定芽增殖率=不定芽數(shù)/接種數(shù)×100%。

1.2.3 生根培養(yǎng) 以1/2MS為基本培養(yǎng)基，研究NAA對(duì)樹蘭莖段不定芽生根的影響，NAA濃度分別設(shè)置為：0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mg/L。每處理都添加1.0 g/L的活性炭，分割增殖培養(yǎng)得到的不定芽，隨后接入生根培養(yǎng)基中，每處理接種3瓶，每瓶接種10個(gè)不定芽，培養(yǎng)60 d后統(tǒng)計(jì)生根數(shù)，計(jì)算生根率。計(jì)算公式如下：生根率=生根苗數(shù)/接種數(shù)×100%。

培養(yǎng)基均加入7 g/L瓊脂粉、25 g/L蔗糖，pH值5.8。培養(yǎng)基裝瓶后在121 ℃、0.14 MPa高溫高壓下滅菌20 min。接種材料后，在25 μmol/（m2·s）的光照下培養(yǎng)，每天光照時(shí)間13 h，培養(yǎng)溫度25 ℃左右，50～60 d 后結(jié)束試驗(yàn)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用PASW Statistics 18.0軟件進(jìn)行Duncan多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 愈傷組織、不定芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)

取長約1.0 cm的樹蘭莖段平放接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，30 d 后部分莖段的兩端隆起，顏色由深變淺，出現(xiàn)愈傷組織，60 d后愈傷組織膨大，數(shù)量增加，呈淺綠色。由表1可知，不同濃度的NAA、IBA、6-BA組合對(duì)樹蘭莖段愈傷組織的誘導(dǎo)效果差異顯著，以NAA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.4 mg/L誘導(dǎo)效果最好，愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)到24.44%。 NAA濃度對(duì)樹蘭莖段愈傷組織誘導(dǎo)影響最大，IBA、6-BA對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)影響相差不大，相比NAA影響略小。

不定芽不僅能誘導(dǎo)出愈傷組織，也會(huì)誘導(dǎo)出不定芽（圖1、圖2），各處理的不定芽誘導(dǎo)率都比較高，且差距不大，最低達(dá)65.56%，以NAA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.2 mg/L 對(duì)不定芽的誘導(dǎo)效果最好（表2）。6-BA濃度對(duì)樹蘭莖段不定芽誘導(dǎo)率的影響最大，其次是IBA濃度，NAA濃度對(duì)不定芽誘導(dǎo)率的影響最小。

2.4 試管苗移栽

樹蘭為附生蘭，選擇松樹皮作為移栽基質(zhì)。組培苗在塑料大棚中進(jìn)行煉苗，先密封放置2～3 d，再開蓋1/3放置2～3 d，最后將蓋子全部打開再放置2～3 d，整個(gè)過程用遮陽網(wǎng)作遮陰處理。隨后將幼苗從瓶中取出并沖洗干凈，在干燥的環(huán)境下放置12 h，然后進(jìn)行移栽。先用熱水浸泡松樹皮，然后取出。移栽時(shí)在塑料花盆底下鋪較大的樹皮，上層用較細(xì)小的樹皮，樹蘭移栽后澆透水，接下來3 d停止?jié)菜乐範(fàn)€根，后期根據(jù)樹皮的潮濕程度確定是否澆水，30 d后有新芽生長可確定成活，移栽成活率達(dá)90%以上（圖5）。

3 結(jié)論與討論

本研究表明，樹蘭部分莖段不僅誘導(dǎo)出了愈傷組織，同時(shí)大部分莖段還誘導(dǎo)出不定芽，愈傷組織誘導(dǎo)率最高達(dá)24.44%，不定芽誘導(dǎo)率最高達(dá)80%，這可能是由于樹蘭大部分誘導(dǎo)出不定芽，故影響了愈傷組織誘導(dǎo)率。NAA、IBA濃度較高不利于不定芽增殖。本試驗(yàn)愈傷組織誘導(dǎo)率均不高，最高僅有24.44%，不定芽增殖的效率相比誘導(dǎo)愈傷組織更高，說明樹蘭莖段在一定條件下誘導(dǎo)不定芽比誘導(dǎo)愈傷組織更容易實(shí)現(xiàn)，對(duì)于快速繁殖來說，直接誘導(dǎo)不定芽更有意義。通過莖段誘導(dǎo)不定芽，對(duì)其進(jìn)行增殖培養(yǎng)，為大量繁殖獲取不定芽提供了途徑，相對(duì)于先誘導(dǎo)原球莖再通過原球莖分化獲取不定芽的方法，本方法優(yōu)化了獲取不定芽的效率及數(shù)量，大大提高了生產(chǎn)效率^[26-27]。不定芽生命力較強(qiáng)，誘導(dǎo)方便，增殖效率高，速度快，培養(yǎng)方便，只須誘導(dǎo)生根即可移栽成活，故取不定芽作為增殖材料對(duì)批量化生產(chǎn)樹蘭有重要意義。移栽時(shí)根據(jù)樹蘭特性，參考其他學(xué)者的研究成果，選擇透氣性好的樹皮作為基質(zhì)，雖然移栽成活率較高，但是生長緩慢，冬季不易越冬，后期的栽培管理技術(shù)還有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]曾宋君. 樹蘭的繁殖栽培[J]. 園林，2001（3）：28-29.

[2]魏翠華. 樹蘭的離體培養(yǎng)和植株再生（簡報(bào)）[J]. 亞熱帶植物科學(xué)，2006，35（2）：64-65.

[3]Nayak N R，Rath S P，Patnaik S. In vitro propagation of three epiphytic orchids，Cymbidium aloifolium（L.）Sw.，Dendrobium aphyllum（Roxb.）Fisch. and Dendrobium moschatum（Buch-Ham）Sw. through thidiazuron-induced high frequency shoot proliferation[J]. Scientia Horticulturae，1997，71（3/4）：243-250.

[4]Chugh S，Guha S，Rao I U. Micropropagation of orchids：a review on the potential of different explants[J]. Scientia Horticulturae，2009，122（4）：507-520.

[5]Chen J T，Chang W C. Efficient plant regeneration through somatic embryogenesis from callus cultures of Oncidium（Orchidaceae）[J]. Plant Science，2000，160（1）：87-93.

[6]Sheelavanthmath S S，Murthy H N，Hema B P，et al. High frequency of protocorm like bodies（PLBs）induction and plant regeneration from protocorm and leaf sections of Aerides crispum[J]. Scientia Horticulturae，2005，106（3）：395-401.

[7]Park S Y，Murthy H N，Paek K Y. Protocorm-like body induction and subsequent plant regeneration from root tip cultures of Doritaenopsis[J]. Plant Science，2003，164（6）：919-923.

[8]Nge K L，Nwe N，Chandrkrachang S，et al. Chitosan as a growth stimulator in orchid tissue culture[J]. Plant Science，2006，170（6）：1185-1190.

[9]Mahendran G，Bai V N. Mass propagation of Satyrium nepalense D.Don.-A medicinal orchid via seed culture[J]. Scientia Horticulturae，2009，119（2）：203-207.

[10]潘學(xué)峰，凌 梅，王安石. 樹蘭未成熟種子離體快繁技術(shù)[J]. 熱帶生物學(xué)報(bào)，2010，1（2）：158-164.

[11]孫 瑤，黃康康. 不同激素對(duì)樹蘭組織培養(yǎng)的影響[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012（3）：342-343.

[12]谷祝平，徐 濤. 樹蘭原球莖增殖中體細(xì)胞胚發(fā)生的研究[J]. 蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)，1990，28（1）：76-79.

[13]Pereira O L，Silva M. Two new hosts，Epidendrum secundum and Epidendrum xanthinum，for the orchid rust Sphenospora kevorkianii（Raveneliaceae）in Brazil[J]. Australasian Plant Disease Notes，2009，4（1）：62-63.

[14]Hossain M M. Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of Epidendrum ibaguense Kunth.（Orchidaceae）[J]. African Journal of Biotechnology，2008，7（20）：3614-3619.

[15]Lawrence W Z，Poulter S B，Mcdonald K I. Conservation-driven propagation of an epiphytic orchid（Epidendrum nocturnum）with a mycorrhizal fungus[J]. Hort Science，2007，42（1）：135-139.

[16]Christenson E A. A new orchid from Saül，F(xiàn)rench Guiana：Epidendrum oldemanii[J]. Brittonia，1994，46（1）：54-56.

[17]Chen L R，Chen J T，Chang W C. Efficient production of protocorm-like bodies and plant regeneration from flower stalk explants of the sympodial orchid Epidendrum radicans[J]. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant，2002，38（5）：441-445.

[18]魏 琪，李鳳蘭，胡國富，等. 蝴蝶蘭快速繁殖研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2006，33（4）：915-920.

[19]曾宋君，陳之林，吳坤林，等. 兜蘭無菌播種和組織培養(yǎng)研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（3）：793-796.

[20]顧德峰，趙春莉，宋彥君，等. 蝴蝶蘭無性快繁規(guī)模化生產(chǎn)的研究[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（1）：193-196.

[21]范成明，李枝林，何月秋. 蘭花組織培養(yǎng)及分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2003，30（4）：487-491.

[22]張志勝，歐秀娟. 墨蘭的組織培養(yǎng)[J]. 園藝學(xué)報(bào)，1995，22（3）：303-304.

[23]崔廣榮，侯喜林，張子學(xué)，等. 蝴蝶蘭葉片離體培養(yǎng)胚狀體的發(fā)生及組織學(xué)觀察[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（2）：431-436.

[24]項(xiàng) 艷，於鳳安，彭鎮(zhèn)華. 墨蘭離體快繁研究[J]. 林業(yè)科學(xué)研究，2003，16（4）：434-438.

[25]崔廣榮，劉云兵，張俊長，等. 文心蘭組織培養(yǎng)的研究[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2004，31（2）：253-255.

[26]李 軍，柴向華，曾寶珰，等. 蝴蝶蘭組培工廠化生產(chǎn)技術(shù)[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2004，31（3）：413-414.

[27]梁巧明，劉運(yùn)權(quán)，葉慶生，等. 4種廢料基質(zhì)對(duì)蝴蝶蘭和石斛蘭生長作用初探[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2006，33（4）：890.

參考文獻(xiàn)：

[1]曾宋君. 樹蘭的繁殖栽培[J]. 園林，2001（3）：28-29.

[2]魏翠華. 樹蘭的離體培養(yǎng)和植株再生（簡報(bào)）[J]. 亞熱帶植物科學(xué)，2006，35（2）：64-65.

[3]Nayak N R，Rath S P，Patnaik S. In vitro propagation of three epiphytic orchids，Cymbidium aloifolium（L.）Sw.，Dendrobium aphyllum（Roxb.）Fisch. and Dendrobium moschatum（Buch-Ham）Sw. through thidiazuron-induced high frequency shoot proliferation[J]. Scientia Horticulturae，1997，71（3/4）：243-250.

[4]Chugh S，Guha S，Rao I U. Micropropagation of orchids：a review on the potential of different explants[J]. Scientia Horticulturae，2009，122（4）：507-520.

[5]Chen J T，Chang W C. Efficient plant regeneration through somatic embryogenesis from callus cultures of Oncidium（Orchidaceae）[J]. Plant Science，2000，160（1）：87-93.

[6]Sheelavanthmath S S，Murthy H N，Hema B P，et al. High frequency of protocorm like bodies（PLBs）induction and plant regeneration from protocorm and leaf sections of Aerides crispum[J]. Scientia Horticulturae，2005，106（3）：395-401.

[7]Park S Y，Murthy H N，Paek K Y. Protocorm-like body induction and subsequent plant regeneration from root tip cultures of Doritaenopsis[J]. Plant Science，2003，164（6）：919-923.

[8]Nge K L，Nwe N，Chandrkrachang S，et al. Chitosan as a growth stimulator in orchid tissue culture[J]. Plant Science，2006，170（6）：1185-1190.

[9]Mahendran G，Bai V N. Mass propagation of Satyrium nepalense D.Don.-A medicinal orchid via seed culture[J]. Scientia Horticulturae，2009，119（2）：203-207.

[10]潘學(xué)峰，凌 梅，王安石. 樹蘭未成熟種子離體快繁技術(shù)[J]. 熱帶生物學(xué)報(bào)，2010，1（2）：158-164.

[11]孫 瑤，黃康康. 不同激素對(duì)樹蘭組織培養(yǎng)的影響[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012（3）：342-343.

[12]谷祝平，徐 濤. 樹蘭原球莖增殖中體細(xì)胞胚發(fā)生的研究[J]. 蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)，1990，28（1）：76-79.

[13]Pereira O L，Silva M. Two new hosts，Epidendrum secundum and Epidendrum xanthinum，for the orchid rust Sphenospora kevorkianii（Raveneliaceae）in Brazil[J]. Australasian Plant Disease Notes，2009，4（1）：62-63.

[14]Hossain M M. Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of Epidendrum ibaguense Kunth.（Orchidaceae）[J]. African Journal of Biotechnology，2008，7（20）：3614-3619.

[15]Lawrence W Z，Poulter S B，Mcdonald K I. Conservation-driven propagation of an epiphytic orchid（Epidendrum nocturnum）with a mycorrhizal fungus[J]. Hort Science，2007，42（1）：135-139.

[16]Christenson E A. A new orchid from Saül，F(xiàn)rench Guiana：Epidendrum oldemanii[J]. Brittonia，1994，46（1）：54-56.

[17]Chen L R，Chen J T，Chang W C. Efficient production of protocorm-like bodies and plant regeneration from flower stalk explants of the sympodial orchid Epidendrum radicans[J]. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant，2002，38（5）：441-445.

[18]魏 琪，李鳳蘭，胡國富，等. 蝴蝶蘭快速繁殖研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2006，33（4）：915-920.

[19]曾宋君，陳之林，吳坤林，等. 兜蘭無菌播種和組織培養(yǎng)研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（3）：793-796.

[20]顧德峰，趙春莉，宋彥君，等. 蝴蝶蘭無性快繁規(guī)?；a(chǎn)的研究[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（1）：193-196.

[21]范成明，李枝林，何月秋. 蘭花組織培養(yǎng)及分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2003，30（4）：487-491.

[22]張志勝，歐秀娟. 墨蘭的組織培養(yǎng)[J]. 園藝學(xué)報(bào)，1995，22（3）：303-304.

[23]崔廣榮，侯喜林，張子學(xué)，等. 蝴蝶蘭葉片離體培養(yǎng)胚狀體的發(fā)生及組織學(xué)觀察[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（2）：431-436.

[24]項(xiàng) 艷，於鳳安，彭鎮(zhèn)華. 墨蘭離體快繁研究[J]. 林業(yè)科學(xué)研究，2003，16（4）：434-438.

[25]崔廣榮，劉云兵，張俊長，等. 文心蘭組織培養(yǎng)的研究[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2004，31（2）：253-255.

[26]李 軍，柴向華，曾寶珰，等. 蝴蝶蘭組培工廠化生產(chǎn)技術(shù)[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2004，31（3）：413-414.

[27]梁巧明，劉運(yùn)權(quán)，葉慶生，等. 4種廢料基質(zhì)對(duì)蝴蝶蘭和石斛蘭生長作用初探[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2006，33（4）：890.

參考文獻(xiàn)：

[1]曾宋君. 樹蘭的繁殖栽培[J]. 園林，2001（3）：28-29.

[2]魏翠華. 樹蘭的離體培養(yǎng)和植株再生（簡報(bào)）[J]. 亞熱帶植物科學(xué)，2006，35（2）：64-65.

[3]Nayak N R，Rath S P，Patnaik S. In vitro propagation of three epiphytic orchids，Cymbidium aloifolium（L.）Sw.，Dendrobium aphyllum（Roxb.）Fisch. and Dendrobium moschatum（Buch-Ham）Sw. through thidiazuron-induced high frequency shoot proliferation[J]. Scientia Horticulturae，1997，71（3/4）：243-250.

[4]Chugh S，Guha S，Rao I U. Micropropagation of orchids：a review on the potential of different explants[J]. Scientia Horticulturae，2009，122（4）：507-520.

[5]Chen J T，Chang W C. Efficient plant regeneration through somatic embryogenesis from callus cultures of Oncidium（Orchidaceae）[J]. Plant Science，2000，160（1）：87-93.

[6]Sheelavanthmath S S，Murthy H N，Hema B P，et al. High frequency of protocorm like bodies（PLBs）induction and plant regeneration from protocorm and leaf sections of Aerides crispum[J]. Scientia Horticulturae，2005，106（3）：395-401.

[7]Park S Y，Murthy H N，Paek K Y. Protocorm-like body induction and subsequent plant regeneration from root tip cultures of Doritaenopsis[J]. Plant Science，2003，164（6）：919-923.

[8]Nge K L，Nwe N，Chandrkrachang S，et al. Chitosan as a growth stimulator in orchid tissue culture[J]. Plant Science，2006，170（6）：1185-1190.

[9]Mahendran G，Bai V N. Mass propagation of Satyrium nepalense D.Don.-A medicinal orchid via seed culture[J]. Scientia Horticulturae，2009，119（2）：203-207.

[10]潘學(xué)峰，凌 梅，王安石. 樹蘭未成熟種子離體快繁技術(shù)[J]. 熱帶生物學(xué)報(bào)，2010，1（2）：158-164.

[11]孫 瑤，黃康康. 不同激素對(duì)樹蘭組織培養(yǎng)的影響[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012（3）：342-343.

[12]谷祝平，徐 濤. 樹蘭原球莖增殖中體細(xì)胞胚發(fā)生的研究[J]. 蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)，1990，28（1）：76-79.

[13]Pereira O L，Silva M. Two new hosts，Epidendrum secundum and Epidendrum xanthinum，for the orchid rust Sphenospora kevorkianii（Raveneliaceae）in Brazil[J]. Australasian Plant Disease Notes，2009，4（1）：62-63.

[14]Hossain M M. Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of Epidendrum ibaguense Kunth.（Orchidaceae）[J]. African Journal of Biotechnology，2008，7（20）：3614-3619.

[15]Lawrence W Z，Poulter S B，Mcdonald K I. Conservation-driven propagation of an epiphytic orchid（Epidendrum nocturnum）with a mycorrhizal fungus[J]. Hort Science，2007，42（1）：135-139.

[16]Christenson E A. A new orchid from Saül，F(xiàn)rench Guiana：Epidendrum oldemanii[J]. Brittonia，1994，46（1）：54-56.

[17]Chen L R，Chen J T，Chang W C. Efficient production of protocorm-like bodies and plant regeneration from flower stalk explants of the sympodial orchid Epidendrum radicans[J]. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant，2002，38（5）：441-445.

[18]魏 琪，李鳳蘭，胡國富，等. 蝴蝶蘭快速繁殖研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2006，33（4）：915-920.

[19]曾宋君，陳之林，吳坤林，等. 兜蘭無菌播種和組織培養(yǎng)研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（3）：793-796.

[20]顧德峰，趙春莉，宋彥君，等. 蝴蝶蘭無性快繁規(guī)模化生產(chǎn)的研究[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（1）：193-196.

[21]范成明，李枝林，何月秋. 蘭花組織培養(yǎng)及分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2003，30（4）：487-491.

[22]張志勝，歐秀娟. 墨蘭的組織培養(yǎng)[J]. 園藝學(xué)報(bào)，1995，22（3）：303-304.

[23]崔廣榮，侯喜林，張子學(xué)，等. 蝴蝶蘭葉片離體培養(yǎng)胚狀體的發(fā)生及組織學(xué)觀察[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（2）：431-436.

[24]項(xiàng) 艷，於鳳安，彭鎮(zhèn)華. 墨蘭離體快繁研究[J]. 林業(yè)科學(xué)研究，2003，16（4）：434-438.

[25]崔廣榮，劉云兵，張俊長，等. 文心蘭組織培養(yǎng)的研究[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2004，31（2）：253-255.

[26]李 軍，柴向華，曾寶珰，等. 蝴蝶蘭組培工廠化生產(chǎn)技術(shù)[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2004，31（3）：413-414.

[27]梁巧明，劉運(yùn)權(quán)，葉慶生，等. 4種廢料基質(zhì)對(duì)蝴蝶蘭和石斛蘭生長作用初探[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2006，33（4）：890.