近來(lái)?yè)诫s高含氮組份偽造高蛋白含量假象的事件，促使食品制造商和監(jiān)管部門使用快速而準(zhǔn)確的分析方法提前確定產(chǎn)品安全性。早在2007年，面筋粉中的三聚氰胺和三聚氰酸就導(dǎo)致了腎衰竭等病癥的發(fā)生，引起大量貓狗死亡。2008年，中國(guó)檢測(cè)部門在數(shù)種牛奶和嬰兒配方奶粉中發(fā)現(xiàn)了三聚氰胺。這導(dǎo)致了成百上千的受害者及6例死亡案例，同時(shí)相關(guān)產(chǎn)品也在很多國(guó)家進(jìn)行了召回。

為了應(yīng)對(duì)三聚氰胺的污染，大量針對(duì)三聚氰胺及其同系物的檢測(cè)方法被開發(fā)出來(lái)，其中包括美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）開發(fā)的針對(duì)三聚氰酸的一些方法。

無(wú)論如何，凱氏定氮法，這種通過測(cè)定食品中氮元素含量，間接衡量蛋白質(zhì)含量的傳統(tǒng)方法，依然是最為常用的。只要食品中蛋白質(zhì)的含量仍然不是直接進(jìn)行測(cè)量的，唯利是圖的使用含氮量高的化合物進(jìn)行摻假就依舊是一個(gè)嚴(yán)重的問題。

檢測(cè)潛在摻假物（非蛋白氮源），包括脒基脲，氰尿二氰尿酰胺、三聚氰酸、縮二脲、環(huán)丙三氨三嗪、滅蠅胺、雙氰胺、三聚氰胺、三脲、尿素的方法已經(jīng)被開發(fā)并驗(yàn)證，用以檢測(cè)奶制品和蛋白樣品。

我們發(fā)布一種快速、簡(jiǎn)單、靈敏的液質(zhì)質(zhì)方法，用以檢測(cè)牛奶和其他高蛋白食品中，μg/kg級(jí)的雙氰胺以及其他的高氮量化合物。

樣品提取液按照以下步驟處理：

1g均值樣品中加入10mL含有2%甲酸的乙腈；

充分混合，超聲10分鐘；離心10分鐘；

轉(zhuǎn)移50μL提取物至進(jìn)樣瓶，并加入950μL稀釋 200倍。

針對(duì)嚴(yán)重污染的食品，可能會(huì)進(jìn)行進(jìn)一步的提取和稀釋。

使用親水作用色譜柱（HILIC）和一般色譜條件對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行分離。液相分離使用Eksigent ekspertTM ultraLC 100系統(tǒng)，和Phenomenex LUNA HILIC 3μ（100×2mm）色譜柱。流動(dòng)相含0.1%的甲酸和10mM甲酸銨，流速為0.2mL/min（見表1）。進(jìn)樣體積10μL。

AB SCIEX帶有Turbo VTM離子源的QTRAP？ 5500質(zhì)譜。質(zhì)譜使用快速正負(fù)切換的多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式。選擇兩對(duì)離子，利用定性定量離子比率進(jìn)行確證（見表2）。使用13C315N3-三聚氰胺為內(nèi)標(biāo)。液質(zhì)質(zhì)數(shù)據(jù)采用MultiQuantTM2.1軟件進(jìn)行處理。

結(jié)果及討論

首先，通過雙氰胺標(biāo)準(zhǔn)及基質(zhì)添加，驗(yàn)證最低檢出限（LOD）和重現(xiàn)性。圖1展示了牛奶中2μg/kg的雙氰胺色譜圖，定量離子流信噪比（S/N）為54，定性離子為13。圖2展示了牛奶中雙氰胺添加的回收曲線（經(jīng)過200倍稀釋）。建議使用更高的稀釋倍數(shù)，以減少單一內(nèi)標(biāo)難以校正的基質(zhì)效應(yīng)。

兩對(duì)離子的回歸系數(shù)均可達(dá)到或超過0.997。MRM離子豐度全部都在0.392的25%的范圍之內(nèi)。離子比率可以直接使用MultiQuantTM軟件的自動(dòng)計(jì)算并報(bào)告。

其次，本方法同樣可以擴(kuò)展到其他潛在污染物，如圖3所示。雙氰胺（保留時(shí)間，RT=2.0min），三聚氰胺（RT=4.6min），氰尿二酰胺（RT=4.7min），氰尿酰胺（RT=4.8min）使用正離子模式和三聚氰酸（RT=2.1min）使用負(fù)離子模式。使用QTRAP？ 5500快速正負(fù)切換可以實(shí)現(xiàn)一針進(jìn)樣同時(shí)檢測(cè)雙氰胺和三聚氰酸。

圖4展示了三聚氰胺（正離子）和三聚氰酸（負(fù)離子）的標(biāo)曲。所有的標(biāo)曲的回歸系數(shù)R均大于0.998。

值得注意的是，三聚氰酸的的添加曲線（<10μg/kg）并未過原點(diǎn)。

使用已開發(fā)的方法和正離子模式，檢測(cè)牛奶樣品的雙氰胺。使用批處理軟件，自動(dòng)定量并進(jìn)行離子比率確認(rèn)。

總結(jié)

本文的數(shù)據(jù)展示了一種使用液質(zhì)質(zhì)，快速、簡(jiǎn)便和精準(zhǔn)的檢測(cè)牛奶和其他高蛋白食品中，雙氰胺和其他高氮量化合物的方法。AB SCIEX QTRAP？ 5500系統(tǒng)提供了一個(gè)非常靈敏和高選擇性的方法，而且僅需少量的樣品前處理，節(jié)省時(shí)間從而最大化通量。

雙氰胺等化合物的檢測(cè)，可以使用MultiQuantTM軟件進(jìn)行自動(dòng)計(jì)算、鑒定并報(bào)告。endprint

近來(lái)?yè)诫s高含氮組份偽造高蛋白含量假象的事件，促使食品制造商和監(jiān)管部門使用快速而準(zhǔn)確的分析方法提前確定產(chǎn)品安全性。早在2007年，面筋粉中的三聚氰胺和三聚氰酸就導(dǎo)致了腎衰竭等病癥的發(fā)生，引起大量貓狗死亡。2008年，中國(guó)檢測(cè)部門在數(shù)種牛奶和嬰兒配方奶粉中發(fā)現(xiàn)了三聚氰胺。這導(dǎo)致了成百上千的受害者及6例死亡案例，同時(shí)相關(guān)產(chǎn)品也在很多國(guó)家進(jìn)行了召回。

為了應(yīng)對(duì)三聚氰胺的污染，大量針對(duì)三聚氰胺及其同系物的檢測(cè)方法被開發(fā)出來(lái)，其中包括美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）開發(fā)的針對(duì)三聚氰酸的一些方法。

無(wú)論如何，凱氏定氮法，這種通過測(cè)定食品中氮元素含量，間接衡量蛋白質(zhì)含量的傳統(tǒng)方法，依然是最為常用的。只要食品中蛋白質(zhì)的含量仍然不是直接進(jìn)行測(cè)量的，唯利是圖的使用含氮量高的化合物進(jìn)行摻假就依舊是一個(gè)嚴(yán)重的問題。

檢測(cè)潛在摻假物（非蛋白氮源），包括脒基脲，氰尿二氰尿酰胺、三聚氰酸、縮二脲、環(huán)丙三氨三嗪、滅蠅胺、雙氰胺、三聚氰胺、三脲、尿素的方法已經(jīng)被開發(fā)并驗(yàn)證，用以檢測(cè)奶制品和蛋白樣品。

我們發(fā)布一種快速、簡(jiǎn)單、靈敏的液質(zhì)質(zhì)方法，用以檢測(cè)牛奶和其他高蛋白食品中，μg/kg級(jí)的雙氰胺以及其他的高氮量化合物。

樣品提取液按照以下步驟處理：

1g均值樣品中加入10mL含有2%甲酸的乙腈；

充分混合，超聲10分鐘；離心10分鐘；

轉(zhuǎn)移50μL提取物至進(jìn)樣瓶，并加入950μL稀釋 200倍。

針對(duì)嚴(yán)重污染的食品，可能會(huì)進(jìn)行進(jìn)一步的提取和稀釋。

使用親水作用色譜柱（HILIC）和一般色譜條件對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行分離。液相分離使用Eksigent ekspertTM ultraLC 100系統(tǒng)，和Phenomenex LUNA HILIC 3μ（100×2mm）色譜柱。流動(dòng)相含0.1%的甲酸和10mM甲酸銨，流速為0.2mL/min（見表1）。進(jìn)樣體積10μL。

AB SCIEX帶有Turbo VTM離子源的QTRAP？ 5500質(zhì)譜。質(zhì)譜使用快速正負(fù)切換的多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式。選擇兩對(duì)離子，利用定性定量離子比率進(jìn)行確證（見表2）。使用13C315N3-三聚氰胺為內(nèi)標(biāo)。液質(zhì)質(zhì)數(shù)據(jù)采用MultiQuantTM2.1軟件進(jìn)行處理。

結(jié)果及討論

首先，通過雙氰胺標(biāo)準(zhǔn)及基質(zhì)添加，驗(yàn)證最低檢出限（LOD）和重現(xiàn)性。圖1展示了牛奶中2μg/kg的雙氰胺色譜圖，定量離子流信噪比（S/N）為54，定性離子為13。圖2展示了牛奶中雙氰胺添加的回收曲線（經(jīng)過200倍稀釋）。建議使用更高的稀釋倍數(shù)，以減少單一內(nèi)標(biāo)難以校正的基質(zhì)效應(yīng)。

兩對(duì)離子的回歸系數(shù)均可達(dá)到或超過0.997。MRM離子豐度全部都在0.392的25%的范圍之內(nèi)。離子比率可以直接使用MultiQuantTM軟件的自動(dòng)計(jì)算并報(bào)告。

其次，本方法同樣可以擴(kuò)展到其他潛在污染物，如圖3所示。雙氰胺（保留時(shí)間，RT=2.0min），三聚氰胺（RT=4.6min），氰尿二酰胺（RT=4.7min），氰尿酰胺（RT=4.8min）使用正離子模式和三聚氰酸（RT=2.1min）使用負(fù)離子模式。使用QTRAP？ 5500快速正負(fù)切換可以實(shí)現(xiàn)一針進(jìn)樣同時(shí)檢測(cè)雙氰胺和三聚氰酸。

圖4展示了三聚氰胺（正離子）和三聚氰酸（負(fù)離子）的標(biāo)曲。所有的標(biāo)曲的回歸系數(shù)R均大于0.998。

值得注意的是，三聚氰酸的的添加曲線（<10μg/kg）并未過原點(diǎn)。

使用已開發(fā)的方法和正離子模式，檢測(cè)牛奶樣品的雙氰胺。使用批處理軟件，自動(dòng)定量并進(jìn)行離子比率確認(rèn)。

總結(jié)

本文的數(shù)據(jù)展示了一種使用液質(zhì)質(zhì)，快速、簡(jiǎn)便和精準(zhǔn)的檢測(cè)牛奶和其他高蛋白食品中，雙氰胺和其他高氮量化合物的方法。AB SCIEX QTRAP？ 5500系統(tǒng)提供了一個(gè)非常靈敏和高選擇性的方法，而且僅需少量的樣品前處理，節(jié)省時(shí)間從而最大化通量。

雙氰胺等化合物的檢測(cè)，可以使用MultiQuantTM軟件進(jìn)行自動(dòng)計(jì)算、鑒定并報(bào)告。endprint

近來(lái)?yè)诫s高含氮組份偽造高蛋白含量假象的事件，促使食品制造商和監(jiān)管部門使用快速而準(zhǔn)確的分析方法提前確定產(chǎn)品安全性。早在2007年，面筋粉中的三聚氰胺和三聚氰酸就導(dǎo)致了腎衰竭等病癥的發(fā)生，引起大量貓狗死亡。2008年，中國(guó)檢測(cè)部門在數(shù)種牛奶和嬰兒配方奶粉中發(fā)現(xiàn)了三聚氰胺。這導(dǎo)致了成百上千的受害者及6例死亡案例，同時(shí)相關(guān)產(chǎn)品也在很多國(guó)家進(jìn)行了召回。

為了應(yīng)對(duì)三聚氰胺的污染，大量針對(duì)三聚氰胺及其同系物的檢測(cè)方法被開發(fā)出來(lái)，其中包括美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）開發(fā)的針對(duì)三聚氰酸的一些方法。

無(wú)論如何，凱氏定氮法，這種通過測(cè)定食品中氮元素含量，間接衡量蛋白質(zhì)含量的傳統(tǒng)方法，依然是最為常用的。只要食品中蛋白質(zhì)的含量仍然不是直接進(jìn)行測(cè)量的，唯利是圖的使用含氮量高的化合物進(jìn)行摻假就依舊是一個(gè)嚴(yán)重的問題。

檢測(cè)潛在摻假物（非蛋白氮源），包括脒基脲，氰尿二氰尿酰胺、三聚氰酸、縮二脲、環(huán)丙三氨三嗪、滅蠅胺、雙氰胺、三聚氰胺、三脲、尿素的方法已經(jīng)被開發(fā)并驗(yàn)證，用以檢測(cè)奶制品和蛋白樣品。

我們發(fā)布一種快速、簡(jiǎn)單、靈敏的液質(zhì)質(zhì)方法，用以檢測(cè)牛奶和其他高蛋白食品中，μg/kg級(jí)的雙氰胺以及其他的高氮量化合物。

樣品提取液按照以下步驟處理：

1g均值樣品中加入10mL含有2%甲酸的乙腈；

充分混合，超聲10分鐘；離心10分鐘；

轉(zhuǎn)移50μL提取物至進(jìn)樣瓶，并加入950μL稀釋 200倍。

針對(duì)嚴(yán)重污染的食品，可能會(huì)進(jìn)行進(jìn)一步的提取和稀釋。

使用親水作用色譜柱（HILIC）和一般色譜條件對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行分離。液相分離使用Eksigent ekspertTM ultraLC 100系統(tǒng)，和Phenomenex LUNA HILIC 3μ（100×2mm）色譜柱。流動(dòng)相含0.1%的甲酸和10mM甲酸銨，流速為0.2mL/min（見表1）。進(jìn)樣體積10μL。

AB SCIEX帶有Turbo VTM離子源的QTRAP？ 5500質(zhì)譜。質(zhì)譜使用快速正負(fù)切換的多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式。選擇兩對(duì)離子，利用定性定量離子比率進(jìn)行確證（見表2）。使用13C315N3-三聚氰胺為內(nèi)標(biāo)。液質(zhì)質(zhì)數(shù)據(jù)采用MultiQuantTM2.1軟件進(jìn)行處理。

結(jié)果及討論

首先，通過雙氰胺標(biāo)準(zhǔn)及基質(zhì)添加，驗(yàn)證最低檢出限（LOD）和重現(xiàn)性。圖1展示了牛奶中2μg/kg的雙氰胺色譜圖，定量離子流信噪比（S/N）為54，定性離子為13。圖2展示了牛奶中雙氰胺添加的回收曲線（經(jīng)過200倍稀釋）。建議使用更高的稀釋倍數(shù)，以減少單一內(nèi)標(biāo)難以校正的基質(zhì)效應(yīng)。

兩對(duì)離子的回歸系數(shù)均可達(dá)到或超過0.997。MRM離子豐度全部都在0.392的25%的范圍之內(nèi)。離子比率可以直接使用MultiQuantTM軟件的自動(dòng)計(jì)算并報(bào)告。

其次，本方法同樣可以擴(kuò)展到其他潛在污染物，如圖3所示。雙氰胺（保留時(shí)間，RT=2.0min），三聚氰胺（RT=4.6min），氰尿二酰胺（RT=4.7min），氰尿酰胺（RT=4.8min）使用正離子模式和三聚氰酸（RT=2.1min）使用負(fù)離子模式。使用QTRAP？ 5500快速正負(fù)切換可以實(shí)現(xiàn)一針進(jìn)樣同時(shí)檢測(cè)雙氰胺和三聚氰酸。

圖4展示了三聚氰胺（正離子）和三聚氰酸（負(fù)離子）的標(biāo)曲。所有的標(biāo)曲的回歸系數(shù)R均大于0.998。

值得注意的是，三聚氰酸的的添加曲線（<10μg/kg）并未過原點(diǎn)。

使用已開發(fā)的方法和正離子模式，檢測(cè)牛奶樣品的雙氰胺。使用批處理軟件，自動(dòng)定量并進(jìn)行離子比率確認(rèn)。

總結(jié)

本文的數(shù)據(jù)展示了一種使用液質(zhì)質(zhì)，快速、簡(jiǎn)便和精準(zhǔn)的檢測(cè)牛奶和其他高蛋白食品中，雙氰胺和其他高氮量化合物的方法。AB SCIEX QTRAP？ 5500系統(tǒng)提供了一個(gè)非常靈敏和高選擇性的方法，而且僅需少量的樣品前處理，節(jié)省時(shí)間從而最大化通量。

雙氰胺等化合物的檢測(cè)，可以使用MultiQuantTM軟件進(jìn)行自動(dòng)計(jì)算、鑒定并報(bào)告。endprint