高慧+李長(zhǎng)坤+李月琪

我國(guó)新頒布的GB/T 2763-2014《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》，將于8月1日起開(kāi)始施行，食品農(nóng)藥最大殘留限量指標(biāo)新增1357項(xiàng)。面對(duì)大量的受管控農(nóng)藥和很低的允許殘留量，開(kāi)發(fā)高靈敏分析方法顯得更為迫切。本文參考美國(guó)AOAC規(guī)定的樣品前處理方法，使用島津超高效液相色譜儀LC-30A和三重四極桿質(zhì)譜LCMS-8050聯(lián)用，建立了蔬菜中37種例行監(jiān)測(cè)農(nóng)藥的超高效液相色譜——三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用的分析方法。

實(shí)驗(yàn)

儀器

本實(shí)驗(yàn)使用島津超高效液相色譜儀LC-30A與三重四極桿質(zhì)譜儀LCMS-8050聯(lián)用系統(tǒng)。具體配置為L(zhǎng)C-30AD×2輸液泵，DGU-20A5在線脫氣機(jī)，SIL-30AC自動(dòng)進(jìn)樣器，CTO-30A柱溫箱，CBM-20A系統(tǒng)控制器，LCMS-8050三重四極桿質(zhì)譜儀。

分析條件

液相色譜條件

分析儀器：LC-30A系統(tǒng)；

色譜柱：Shim-pack XR-ODSIII， 2.0mm I.D.×150mm L，2.2μm；

流動(dòng)相：A：5mM醋酸銨+0.02%甲酸水溶液；B：甲醇；

流速：0.4mL/min；

進(jìn)樣體積：1μL；

柱溫：40℃；

洗脫方式：梯度洗脫，B相初始濃度為10%。質(zhì)譜條件

分析儀器：LCMS-8050；

離子源：ESI，正負(fù)離子同時(shí)掃描；

離子源接口電壓：+ 4 . 5 k V；-3.5kV；

霧化氣：氮?dú)?.0L/min；干燥氣：氮?dú)?0L/min；加熱氣：氮?dú)?0L/min；碰撞氣：氬氣；脫溶劑管溫度：250℃；加熱模塊溫度：400℃；接口溫度：250℃；掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；駐留時(shí)間：10ms；延遲時(shí)間：3ms。

樣品制備

樣品前處理方法：參照美國(guó)AOAC 2007.01QuEChERS樣品前處理方法，使用島津技邇QuEChERS產(chǎn)品進(jìn)行樣品前處理。取15g均質(zhì)樣品加入50mL離心管中，加入15mL乙腈/甲酸（99/1，v/v）提取液，渦混后加入6gMgSO4和1.5gNaOAc，迅速進(jìn)行振蕩，然后離心5min（8000rpm）。取上清液1mL，加入盛有150mgMgSO4，5 0 m g P S A，50mgC18粉末的離心管中，渦混離心，上清液過(guò)濾膜后上機(jī)。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：用甲醇配制500mg/L，37種混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用基質(zhì)提取液逐級(jí)稀釋成0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L的不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品。

結(jié)果與討論

線性關(guān)系

將配制的0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述分析條件進(jìn)行測(cè)定，外標(biāo)法制作校準(zhǔn)曲線，線性良好。

精密度實(shí)驗(yàn)

對(duì)0.5μg/L、1.0μg/L和5.0μg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)6次進(jìn)樣，考察儀器的精密度，其保留時(shí)間和峰面積的重復(fù)性結(jié)果如表1所示。3個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之間，儀器精密度良好。

基質(zhì)提取液加標(biāo)精密度實(shí)驗(yàn)

用空白的普通白菜、甘藍(lán)、菜豆三種基質(zhì)提取液加混標(biāo)至濃度為5μg/L，連續(xù)20針進(jìn)樣，考察保留時(shí)間和峰面積穩(wěn)定性，保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在0.02%～0.22%和0.63%～4.93%之間。具體結(jié)果如表2。

回收率實(shí)驗(yàn)

將空白甘藍(lán)樣品進(jìn)行5.0μg/L和50.0μg/L濃度加標(biāo)后，按照上述樣品制備方法處理后上機(jī)，平行3份樣品考察回收率和RSD。具體結(jié)果見(jiàn)表3。5.0μg/ L加標(biāo)回收率在80.5%～105.2%之間，50.0μg/L加標(biāo)回收率在89.6%～104.5%之間。

實(shí)際樣品分析

對(duì)市售普通白菜進(jìn)行分析后，檢出多菌靈、三唑酮、咪鮮胺和噠螨靈，具體結(jié)果及色譜圖見(jiàn)表4、圖1。

結(jié)論

建立了一種使用島津超高效液相色譜儀LC-3 0A和三重四極桿質(zhì)譜儀LCMS-8050聯(lián)用測(cè)定蔬菜樣品中37種農(nóng)藥的方法，在20min內(nèi)完成37種農(nóng)藥的分離。不同濃度的精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在0.02%～0.17%和0.59%～4.89%之間，儀器精密度良好；校準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)均大于0.995；儀器檢出限在0.002～0.143μg/L之間，定量限在0.0072～0.433之間；不同蔬菜基質(zhì)中5μg/L濃度加標(biāo)的保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之間；采用QuEChERS前處理方法的加標(biāo)回收率在80.5%～105.2%之間。該方法分析速度快、重復(fù)性好、靈敏高，適合蔬菜中常用農(nóng)藥的高靈敏度檢測(cè)。endprint