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        “勿忘我”叢生芽誘導(dǎo)及植株再生

        2014-10-21 12:39:53王淑敏高永闖李曉云
        安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年31期

        王淑敏 高永闖 李曉云

        摘要 [目的] 研究“勿忘我”叢生芽誘導(dǎo)及植株再生。 [方法]以勿忘我為試材,取其莖尖、葉片和下胚軸為外植體,進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)試驗(yàn)。[結(jié)果]用莖尖作外植體產(chǎn)生叢生芽數(shù)量最多;以MS + 6BA 1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L誘導(dǎo)成苗率最高,芽苗健壯;生根階段以1/2MS+IBA0.2mg/L生根效果最好,生根率可達(dá)100%。[結(jié)論] 研究勿忘我叢生芽誘導(dǎo)及植株再生具有一定的實(shí)踐意義和應(yīng)用價(jià)值。

        關(guān)鍵詞 勿忘我; 叢生芽; 再生植株

        中圖分類號(hào) S188 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611(2014)31-10842-03

        Study on Cluster Bud Induction and Plant Regeneration of Myosotis sylvatica

        WANG Shumin ,GAO Yongchuang,LI Xiaoyun

        (College of Life Science, Langfang Teachers University, Langfang, Hebei 065000 )

        Abstract [Objective] The aim was to study cluster bud induction and plant regeneration of Myosotis sylvatica.[Method]Using Myosotis sylvatica as test materials, cluster bud induction was carried out taking its stem tip, leaf and hypocotyl as explant . [Result] Cluster bud induction number was the largest using stem tip as explant. MS + 6BA 1.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L induction rate was highest,and bud seedling was strong; 1/2 ms + IBA0.2 mg/L rooting effect was best in rooting stage, and rooting rate could reach 100%. [Conclusion] Studying cluster bud induction and plant regeneration of Myosotis sylvatica had certain practical.

        Key words Myosotis sylvatica; Cluster bud; Plant regeneration

        勿忘我(Limonium sinuatum(L).Mill)屬藍(lán)雪科(Plumbaginaceae)補(bǔ)血草屬(Limonium)多年生或二年生草本植物,原產(chǎn)地中海沿岸地區(qū),株高可達(dá)1.1 m,花色繁多,具有天然干花的特性,花瓣含水量低,富有蠟質(zhì),在植株體上呈現(xiàn)出干燥的蠟質(zhì)或紙質(zhì)的特色,可以長(zhǎng)期保持美麗的花色和花型,是目前天然干花類中作切花批量生產(chǎn)的花之一[1],也可在野生園林中作露地栽培,或剪下作小插花中主花的配花[2]。藥理研究表明,勿忘我花茶含有豐富的維生素C,可延緩細(xì)胞衰老,提高機(jī)體免疫能力,抗病毒,抗癌防癌并能美白肌膚,具有護(hù)膚養(yǎng)顏、補(bǔ)腎提神、健胃開胃、調(diào)節(jié)血脂減肥、促進(jìn)新陳代謝等功能[3]。

        補(bǔ)血草屬植物具有大量的不孕枝和同型雜交不孕的特性,種子結(jié)實(shí)少,若用種子繁殖,種子來源的可靠性限制了批量生產(chǎn)[2]。因此研究勿忘我叢生芽誘導(dǎo)及植株再生具有一定的實(shí)踐意義和應(yīng)用價(jià)值。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料及處理

        1.1.1 試驗(yàn)材料。

        選取飽滿無蟲害的勿忘我種子。

        1.1.2 消毒方法。

        將勿忘我種子,用無菌水沖洗3次,再用75%乙醇消毒30~40 s,無菌水沖洗5次,分別用0.1%升汞、2%次氯酸鈉消毒處理,具體為:

        ①0.1%升汞5 min;②0.1%升汞7 min;③0.1%升汞9 min;④2%次氯酸鈉8 min;⑤2%次氯酸鈉13 min;⑥2%次氯酸鈉18 min。

        每次處理完用無菌水沖洗8~10次,每次1 min。然后將無菌種子種植在放有濾紙的無菌瓶和MS固體培養(yǎng)基中,置恒溫培養(yǎng)室中23 ℃培養(yǎng),待發(fā)育成無菌苗。15 d后統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率、污染率。

        發(fā)芽率=(發(fā)芽種子數(shù)/接種種子數(shù))×100%

        污染率=(污染種子數(shù)/接種種子數(shù))×100%

        1.2 培養(yǎng)基

        1.2.1 叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基。

        A1:MS+6BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;

        A2:MS+6BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;

        A3:MS+6BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。

        1.2.2 生根培養(yǎng)基。

        B0:1/2 MS;

        B1:1/2 MS + IBA 0.2 mg/L;

        B2:1/2 MS + IBA 0.4 mg/L;

        B3:1/2 MS + IBA 0.6 mg/L。

        1.3 叢生芽誘導(dǎo)

        分別取勿忘我的下胚軸(長(zhǎng)0.5 cm)、莖尖(長(zhǎng)1 cm)、子葉(0.5 cm×0.5 cm)作為外植體,3種外植體均接種到A1 、A2、A3培養(yǎng)基上,在各培養(yǎng)基上接種30個(gè),接種后在24 ℃下培養(yǎng)進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)[4-6]。

        1.4 生根與植株再生

        剪取健壯的單芽(長(zhǎng)1.5~2.0 cm),分別接種到B0 、B1、 B2、B3培養(yǎng)基上進(jìn)行生根。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 種子消毒結(jié)果

        不同材料所用消毒液不同,消毒效果也不同。對(duì)于勿忘我種子而言,消毒效果最好的是升汞,但處理時(shí)間過長(zhǎng)易把種子殺死。首先取空白對(duì)照組,不加處理的勿忘我種子的發(fā)芽率為69%,污染率為71%。由表1可知,0.1%的升汞和2%的次氯酸鈉對(duì)勿忘我種子的消毒效果都很好,沒有污染,并在特定的消毒時(shí)間段內(nèi),對(duì)種子的活性影響也較小。由此可知,使用次氯酸鈉對(duì)忽忘我種子消毒更適宜,尤以消毒8 min為宜,處理后對(duì)種子萌發(fā)率影響不大。勿忘我種子在接種15 d后即可長(zhǎng)成綠色健壯的無菌苗。

        2.2 不同外植體對(duì)不定芽形成的影響

        以莖尖為外植體,在基部膨大形成球狀愈傷組織,隨后產(chǎn)生大量叢生芽,速度最快的接種20 d后即有芽點(diǎn)形成;以莖段為外植體,莖段整體膨大,未產(chǎn)生叢生芽;以子葉為外植體,未形成芽。不同外植體對(duì)不定芽誘導(dǎo)效果影響很大,出芽情況以莖尖出芽率最高,而莖段和子葉則不能誘導(dǎo)出叢生芽。

        2.3 不同濃度的6BA對(duì)莖尖叢生芽誘導(dǎo)的影響

        接種后莖尖在下端邊緣開始膨大增厚,繼而周圍出現(xiàn)淺綠色顆粒狀突起,約25 d后,這些突起繼續(xù)生長(zhǎng)成淡綠色小芽。由表2可知,莖尖叢生芽發(fā)生數(shù)量隨6BA濃度的升高而增多。從生長(zhǎng)狀態(tài)來看,A3培養(yǎng)基所誘導(dǎo)的芽雖然在所有培養(yǎng)基中的芽數(shù)最多,但其芽的質(zhì)量較其他培養(yǎng)基而言不高(圖2),表明雖然6BA打破了其頂端優(yōu)勢(shì),但其各個(gè)叢生芽的生長(zhǎng)點(diǎn)不突出,芽的健壯程度也較低。綜合來看,A2培養(yǎng)基上的芽生長(zhǎng)最好,出芽率適中,芽也健壯(圖1)。故在莖尖叢生芽的誘導(dǎo)中,6BA的濃度以1.0 mg/L為宜。

        2.4 不同濃度的6BA對(duì)子葉叢生芽誘導(dǎo)的影響

        子葉作為外植體接種到培養(yǎng)基上后無變化,隨著時(shí)間的推移子葉出現(xiàn)不同程度的褐化。在A1、A2和A3培養(yǎng)基中,子葉均沒有誘導(dǎo)出叢生芽,最后褐化干枯死亡。

        2.5 不同濃度的6BA對(duì)莖段叢生芽誘導(dǎo)的影響

        莖段作為外植體在叢生芽誘導(dǎo)過程中,膨大,但沒有產(chǎn)生愈傷組織,隨著時(shí)間的推移膨大的莖段褐化而死,最終沒有叢生芽的誘導(dǎo);這可能是因?yàn)楫a(chǎn)生了大量次級(jí)代謝物,這些次級(jí)代謝物最后導(dǎo)致莖段死亡,沒有誘導(dǎo)出叢生芽。莖段叢生芽的誘導(dǎo)率也為0。

        2.6 誘導(dǎo)芽苗生根效果

        生根誘導(dǎo)以1/2MS為基本培養(yǎng)基,附加IBA,設(shè)計(jì)4個(gè)濃度水平。將繼代培養(yǎng)后高度達(dá)1.5~2.0 cm,生長(zhǎng)健壯的芽苗進(jìn)行生根誘導(dǎo)。無根苗在生根培養(yǎng)基中,約9 d后分化形成根。

        3 討論

        3.1 外植體消毒

        從外界取得的外植體進(jìn)行接種時(shí),常含有較多的雜菌,對(duì)其消毒時(shí)間太短不易除去,時(shí)間太長(zhǎng)又會(huì)對(duì)外植體造成較大的傷害。該試驗(yàn)選取種子進(jìn)行消毒較容易,基本解決了上述問題,污染率降低,適合選用。在試驗(yàn)中采用2種方式進(jìn)行消毒,最終結(jié)果都很好,沒有出現(xiàn)污染,而且在種子萌發(fā)率上差別也不大。綜合簡(jiǎn)單易行的原則和環(huán)境友好性原則,推薦使用次氯酸鈉作為消毒劑,處理時(shí)間以8 min為宜。

        3.2 外植體選擇

        該試驗(yàn)選取莖尖、莖段(不帶腋芽)、子葉作外植體,通過誘導(dǎo),3種外植體都可誘導(dǎo)出愈傷。但莖段和子葉不能誘導(dǎo)出叢生芽,莖段膨大出現(xiàn)愈傷后再培養(yǎng)則會(huì)褐化死亡。莖尖作為外植體誘導(dǎo)速度最快,芽苗健壯,增殖率高,是勿忘我進(jìn)行離體快速繁殖的最佳外植體。

        3.3 最佳叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基

        馮曉英在對(duì)6芐氨基嘌呤(6BA)、激動(dòng)素(KT)和苯基噻二唑脲(TDZ)在勿忘我芽增殖上的效果進(jìn)行了比較。苯基噻二唑脲(TDZ)是一種具有高度細(xì)胞分裂素活性的棉花脫葉劑,當(dāng)TDZ濃度為0.01 mg/L時(shí),勿忘我離體培養(yǎng)芽增殖的能力相當(dāng)于6BA 0.4 mg/L時(shí)的增殖能力。當(dāng)TDZ濃度為0.04和0.06 mg/L時(shí),芽的增殖效果與不加任何試劑差異不大。

        3.4 最佳生根培養(yǎng)基

        觀察發(fā)現(xiàn),NAA誘導(dǎo)生根,根基部愈傷組織較少,根粗壯,數(shù)量多,且有一定的長(zhǎng)度;IBA則根少細(xì)長(zhǎng)。結(jié)果表明,試管苗生根以0.4 mg/L NAA效果較好,其次是0.6 mg/L NAA和0.2 mg/L IBA。在植物試管苗微型繁殖誘導(dǎo)生根階段,由于培養(yǎng)環(huán)境的高溫、高濕和弱光等因素的影響,常使得芽苗徒長(zhǎng)和根系纖弱,導(dǎo)致再生小植株的抗逆性差和移栽成活率低。這表明,低濃度的PP333對(duì)根的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,生根率與對(duì)照組只加 0.4 mg/L NAA 差異不大,但可以使根加粗,而高濃度時(shí)所需根長(zhǎng)時(shí)間明顯縮短,生根率降低,根特粗。從苗長(zhǎng)勢(shì)來看,以在生根培養(yǎng)基中附加0.02%PP333的長(zhǎng)勢(shì)為好。

        參考文獻(xiàn)

        [1] 金波.鮮切花栽培技術(shù)手冊(cè) [M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,1998:50-65.

        [2] 周昆華,易栽培.久不凋的花卉勿忘我[J].云南農(nóng)業(yè)科技,1993(6):36.

        [3] 高麗霞,邢柏芝.補(bǔ)血草組織培養(yǎng)試驗(yàn)[J].北方園藝,1999(2):5.

        [4] 陳佳瀛,杜秀達(dá).補(bǔ)血草的組織培養(yǎng)和快速繁殖[J].植物生理學(xué)通訊,2002,12(6):594.

        [5] 王秀麗,楊煜,徐平麗,等.植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用及進(jìn)展[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué),2005(3):78-80.

        [6] 王文靜,袁道強(qiáng),高松潔.植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用現(xiàn)狀[J].河南師范大學(xué)學(xué)報(bào),2000(3):137-139.

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