邴晏如，莫和國，黃健云，歐水連，黎泳儀，蔡錦梅，陸小琴（南方醫(yī)科大學附屬小欖醫(yī)院檢驗科，廣東中山 528415）

隨著社會的發(fā)展，不育癥的發(fā)病率呈明顯上升趨勢，育齡夫婦不育癥的發(fā)病率己從20世紀60年代的7%～8%上升到近年來的15%～20%［1］。不育原因中20%是單獨由男性因素引起，其余還有30%～40%與男性因素有關(guān)［2－3］。因此，有關(guān)精子質(zhì)量與男性不育原因的研究越來越引起臨床的重視。在影響男性生育功能的眾多因素中。有研究認為男性生殖道感染是導致男性不育的主要原因之一［4－5］。本文研究男性不育患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度及動力的關(guān)系，為進一步探討精漿彈性硬蛋白酶對于男性生育力的評估價值，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年5月至2013年11月在本院男科門診就診的不育男性患者230例，且精液檢查至少有1項參數(shù)結(jié)果異常，年齡23～50歲，平均32.5歲，分別根據(jù)年齡段（21～25、＞25～30、＞30～35、＞35～40、＞40～50歲）和精漿彈性硬蛋白酶濃度（大于1 000 ng／mL、290～1 000 ng／mL、小于290ng／mL）進行檢測。納入標準：同居1年及以上；性生活正常，無其他系統(tǒng)疾??；未采用任何避孕措施；女方各項檢查均正常。

1.2 研究方法

1.2.1 標本采集與保存 檢查前禁欲3～7d，手淫法取精液于干燥無菌廣口杯內(nèi)，37℃液化，液化后進行精液常規(guī)檢測。精漿彈性硬蛋白酶濃度測定：新鮮標本液化后立即取部分標本3 000 r／min離心10min，留取精漿測精漿彈性硬蛋白酶濃度。標本離心后，用Eppendorf管分裝數(shù)支后，－20℃保存。

1.2.2 主要儀器試劑及檢測方法 精液常規(guī)采用北京偉力WLJY－9000型彩色精子分析儀檢測；精漿彈性硬蛋白酶采用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定，定量試劑盒均購自深圳華康公司；全自動酶標儀為美國Bio－Tek ELx800。

1.2.3 精液常規(guī)指標和精漿彈性硬蛋白酶的正常參考值 精液常規(guī)按《世界衛(wèi)生組織人類精液及精子－宮頸粘液相互作用實驗室檢測手冊》（第4版）進行分析，精液量大于或等于1.5 mL，pH≥7.2，精子活動率大于或等于40%，精子前向運動百分比大于或等于32%，精子密度大于或等于15×106／mL，總精子數(shù)大于或等于39×106。精漿彈性硬蛋白酶正常參考值為小于290ng／mL。

1.2.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析處理，計量資料以表示，組間比較采用方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同年齡段患者精漿彈性硬蛋白酶濃度、精子密度和精子動力檢測結(jié)果 各年齡段患者的精漿彈性硬蛋白酶濃度、精子密度和精子活動率比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 不同年齡段患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度和精子活力檢測結(jié)果（）

表1 不同年齡段患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度和精子活力檢測結(jié)果（）

年齡（歲） n 彈性硬蛋白酶（ng／mL）精子密度（106／mL）精子活動率（%）21～25 40 1594 .3±658.6 57 .44±20.34 56 .50±21.19＞25～30 52 1653 .2±715.6 61 .36±23.36 61 .35±25.39＞30～35 49 1640 .7±710.6 57 .88±22.67 58 .45±24.35＞35～40 48 1704 .7±753.2 58 .35±23.18 56 .59±23.49＞40～50 41 1604 .4±698.5 57 .58±22.56 55 .23±22.59

2.2 患者精漿水平彈性蛋白酶與精子密度關(guān)系分析 在不同精漿彈性硬蛋白酶濃度的患者中，前向運動精子密度、非前向運動精子密度和不動精子密度比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），且前向運動精子密度均值均大于30.0×106／mL。見表2。

2.3 患者精漿彈性硬蛋白酶濃度與精子動力關(guān)系分析 在不同精漿彈性硬蛋白酶濃度的患者中，前向運動精子百分比、非前向運動精子百分比、精子曲線速度和直線速度比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），且前向運動精子百分比均值均大于42.0%。見表3。

表2 患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度的關(guān)系分析（，×106／mL）

表2 患者精漿彈性硬蛋白酶與精子密度的關(guān)系分析（，×106／mL）

（ng／mL） n 前向運動精子密度彈性硬蛋白酶不動1 000 102 33 .15±12.35 13 .42±5.12 24 .46±8.92 290～1 000 78 30 .51±11.26 12 .18±4.56 22 .29±8.69＜精子密度＞非前向運動精子密度290 50 31 .26±12.06 14 .21±5.13 24 .23±9.05

表3 患者精漿彈性硬蛋白酶與精子動力的關(guān)系分析（）

表3 患者精漿彈性硬蛋白酶與精子動力的關(guān)系分析（）

（ng／mL） n 前向運動精子（%）彈性硬蛋白酶 非前向運動精子（%）曲線速度（μm／s）直線速度（μm／s）＞1 000 102 43 .8±15.3 15 .24±5.2 43 .6±9.2 28 .3±9.2 290～1 000 78 42 .64±14.9 13 .91±4.8 42 .5±8.9 26 .9±8.1＜290 50 42 .69±14.7 15 .86±4.9 42 .8±8.8 27 .8±7.9

3 討 論

男性不育癥是許多疾病或多種因素造成，而不是一種獨立的疾病。對于男性不育的病因并不十分明確。對于精漿彈性硬蛋白酶是否與精液中各項指標具有相關(guān)性存在廣泛爭議。王賀等［6］通過對患者精漿彈性硬蛋白酶的檢測發(fā)現(xiàn)，精漿彈性硬蛋白酶濃度升高可導致精子活率和活力降低，但不影響精子密度。Moretti等［7］通過對患者精漿彈性硬蛋白酶的檢測發(fā)現(xiàn)，精漿彈性硬蛋白酶濃度大于1 000 ng／mL組與精漿彈性硬蛋白酶濃度小于290ng／mL組在精子密度、活率、活力及頭部畸形等方面存在明顯差異。與之相反，Eggert－Kruse等［8］研究發(fā)現(xiàn)，不育患者血清及精漿彈性硬蛋白酶濃度與精液各項指標及精子功能各項指標均無相關(guān)性。Henkel等［9］也得到同樣結(jié)論。本實驗室通過對生殖科門診就診不孕男性患者精漿彈性硬蛋白酶檢測發(fā)現(xiàn)，不同精漿彈性硬蛋白酶含量患者在精子密度、活率和運動速度方面差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），與Eggert－Kruse等［9］和 Henkel等［10］的結(jié)論相同。

綜上所述，本研究結(jié)果顯示精漿彈性硬蛋白酶濃度不影響精子的密度、活率及運動速度。由于本研究未對精液做病原菌培養(yǎng)和白細胞計數(shù)，未能確定精漿彈性硬蛋白酶濃度的升高是否與感染有關(guān)，因此，精漿彈性硬蛋白酶濃度與感染的相關(guān)性有待進一步的研究。

［1］Gomendio M，Malo AF，Garde J，et al.Sperm traits and male fertility in natural populations［J］.Reproduction，2007，134（1）：19－29.

［2］包華瓊，蔡敏，陳可，等.計算機電磁輻射對男性精液質(zhì)量影響［J］.重慶醫(yī)學，2012，41（11）：1108－1110.

［3］房磊臣，茍欣，丘彥，等.禁欲時間對精液質(zhì)量的影響［J］.重慶醫(yī)學，2006，35（22）：2076－2078.

［4］鄧天勤，黃永漢，李穎嫦，等.精漿生化檢測在262例梗阻性無精子癥分析中的意義［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2009，6（12）：929－930.

［5］林艷君，張唯力，胡自力，等.慢性前列腺炎對精液質(zhì)量的影響［J］.重慶醫(yī)學，2007，36（14）：1378－1379.

［6］王賀，鄒德學，李世勤.精漿彈性硬蛋白酶與精液主要參數(shù)及精子功［J］.中國男科學雜志，2009，23（9）：55－57.

［7］Moretti E，Cosci I，Spreafico A，et al.Semen characteristics and inflammatory mediators in infertile men with different clinical diagnoses［J］.Int J Androl，2009，32（6）：637－646.

［8］Eggert－Kruse W，Zimmermann K，Oei flier W，et al.Clinical relevance of polymorphonuclear（PMN－）elastase determination in semen and serum during infertilityinvestigation［J］.Int J Androl，2009，32（4）：317－329.

［9］Henkel R，Maass G，Jung A，et al.Age－related changes in seminal polymorphonuclear elastase in men with asymptomatic inflammation of the genital tract［J］.Asian J Androl，2007，9（3）：299－304.