何敬遠

[摘要] 目的 探討丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33含量的變化及其臨床意義。 方法 ELISA法檢測30例丙型肝炎患者、30例丙型肝炎病毒攜帶者及30例健康對照者血清中IL-6、IL-12及IL-33的表達水平。 結(jié)果 相比丙型肝炎病毒攜帶者及健康對照者，丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的表達水平顯著升高（P<0.01），且丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量顯著高于丙型肝炎病毒攜帶者（P<0.01）；經(jīng)治療后丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量顯著降低（P<0.01）。 結(jié)論 IL-6、IL-12及IL-33介導(dǎo)的免疫應(yīng)答參與了丙型肝炎的發(fā)病，在丙型肝炎病毒感染的致病機制中有一定的臨床價值。

[關(guān)鍵詞] 白細胞介素-6；白細胞介素-12；白細胞介素-33；丙型肝炎

[中圖分類號] R512.63 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2014）12-123-03

丙型病毒性肝炎是一種由丙型肝炎病毒（HCV）感染引起的病毒性肝炎，其傳播途徑和特征與乙型肝炎病毒相似[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全球HCV的感染率約為3%，每年新發(fā)丙型肝炎病例約3.5萬例[2]。細胞因子在病毒性肝炎的免疫病理過程中的作用，已受到國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注[3]。然而，關(guān)于IL-6、IL-12及IL-33這三種細胞因子在丙型肝炎發(fā)病中的作用研究還很少，據(jù)此，我們對30例慢性丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量進行了檢測，期望從細胞因子角度探討HCV導(dǎo)致丙型肝炎發(fā)生及肝臟損害的機制，結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2013年2～12月深圳市南山醫(yī)院門診及住院的30例慢性丙型肝炎患者，年齡26～45歲，平均（35.5±7.8）歲，30例丙型肝炎病毒攜帶者，年齡25～47歲，平均（36.7±8.1歲），同時收集體檢中心檢驗合格的30例健康人，年齡25～45歲，平均（35.4±7.5歲）作為對照。

1.2 標本收集

清晨抽取各組研究人員的空腹靜脈血2mL，3000rpm離心15min，留取外周血上清。

1.3 方法

1.3.1 血清樣本采集 所有對象均在治療前及治療6個月后采用肝素抗凝管空腹采血5mL，靜止30min后，3000rpm離心10min，取上層血清凍存于-80℃冰箱中備用。

1.3.2 ELISA法測定IL-6、IL-12及IL-33含量 試劑盒購自R&D;公司，嚴格按照說明書要求操作如下：將血清樣品和標準品100μL加入孔中，另留出空白對照孔，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃孵育90min；每孔加入250μL洗滌液，震蕩1min/次洗板，共4次；加入配制好的生物素化抗體工作液100μL孔，37℃孵育60min；洗板4次；加入酶結(jié)合物工作液100μL孔，37℃孵育30min；洗板4次；加入顯色劑100μL/well，避光，37℃孵育10～20min；加入終止液100μL/well，短暫震蕩混勻后立即測量OD450值。

1.3.3 治療方法 常規(guī)肝治療基礎(chǔ)上加用重組干擾素治療。具體治療方法為300萬U重組干擾素肌肉注射，1次/d，治療2周后改為隔日1次，療程為6個月。治療過程中密切監(jiān)視患者肝功能和血、尿常規(guī)等。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS16.0 軟件，以方差分析和t檢驗的方法對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清IL-6、IL-12及IL-33含量比較

與丙型肝炎病毒攜帶者及健康對照者相比，丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的表達水平顯著升高（P<0.01），且丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量顯著高于丙型肝炎病毒攜帶者（P<0.01）。2.2 治療前后丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12及IL-33含量比較

經(jīng)治療后丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量顯著降低（P<0.01）。見表2。

3 討論

丙型肝炎呈全球性流行，丙型肝炎病毒（HCV）侵入機體后可造成干細胞變形壞死[4-6]，導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝細胞癌（HCC）[7]。HCV是如何導(dǎo)致丙型肝

炎發(fā)生及其是通過何種方式導(dǎo)致肝臟損害的目前尚不完全清楚[8]。IL-6、IL-12及IL-33均為體內(nèi)細胞免疫的重要參與分子[9-11]。IL-6是一種Th2型的細胞因子，可抑制Th1細胞分泌IL-2和IFN-γ等參與細胞免疫的重要細胞因子，從而降低機體清除病毒的能力[12]。IL-12作用與IL-6相反，IL-12可促進Th1型細胞免疫應(yīng)答，增強機體抗感染免疫的能力。我們的研究發(fā)現(xiàn)，丙型肝炎患者血清中IL-6和IL-12的含量顯著高于丙型肝炎病毒攜帶者及健康對照者（P<0.01）；據(jù)此我們猜測雖然升高的IL-12水平可增強機體抗感染免疫的能力，但由于同時受到升高的IL-6的抑制作用，因此最終導(dǎo)致了丙肝的發(fā)生。同時我們還發(fā)現(xiàn)，治療后，IL-12含量下降水平顯著低于IL-2含量的下降水平，提示IL-12在此時可發(fā)揮機體保護作用，增強機體對HCV的清除能力。IL-33作為白介素家族中的一員，在免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)中具有重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)，肝細胞損傷后可分泌大量的IL-33。本文通過研究發(fā)現(xiàn)丙型肝炎患者血清中IL-33的含量顯著高于丙型肝炎病毒攜帶者及健康對照者（P<0.01）。同時，經(jīng)治療后丙型肝炎患者血清中上述3種細胞因子的含量顯著降低（P<0.01）。據(jù)此，我們的結(jié)果提示 IL-6、IL-12及IL-33介導(dǎo)的免疫應(yīng)答參與了丙型肝炎的發(fā)病，在丙型肝炎病毒感染的致病機制中有一定的臨床價值。

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（收稿日期：2014-04-16）