王 虹 王 軍 唐佩佩

奮乃靜（Perphenazine）為吩噻嗪類的哌嗪衍生物，廣泛用于精神分裂癥或其他精神病性障礙、以及嘔吐、嚴重焦慮等癥狀。在急性中毒案件中，常涉及到對奮乃靜的快速檢驗。目前測定奮乃靜的常用方法主要有高效液相色譜法①周建玉、唐素芳：《HPLC法測定奮乃靜及奮乃靜片有關(guān)物質(zhì)方法的建立》，《中國藥物應(yīng)用與監(jiān)測》2010年第7期。、紫外-可見分光光度法②國家藥典委員會：《中華人民共和國藥典(二部)》，化學(xué)工業(yè)出版社2005年版，第328-329頁。、流動注射分光光度法③呂輝雄等：《奮乃靜的流動注射分光光度分析》，《分析實驗室》2003年第3期。、流動注射化學(xué)發(fā)光法④弋景峰等：《奮乃靜藥物的流動注射化學(xué)發(fā)光測定方法的建立》，《西安交通大學(xué)學(xué)報》2006年第5期。、荷移分光光度法⑤于麗麗、盛喆、李華侃：《基于氯冉酸的荷移反應(yīng)分光光度法測定奮乃靜》，《理化檢驗》2011年第47期。、毛細管電泳-安培檢測法⑥張?zhí)m、何聿、倪碧蓮等：《乃靜和氟奮乃靜的毛細管電泳柱端噴壁式安培檢測》，《分析化學(xué)》2005年第3期。、熒光分光光度法⑦李美芳、邱穎、李玉蘭：《熒光分光光度法測定奮乃靜片的含量》，《中國藥業(yè)》2008年第23期。等。本文探討了鹽酸-乙醇溶液作為提取劑的提取工藝、優(yōu)化了熒光光譜法測定奮乃靜的試驗條件，提高了分析靈敏度、降低了檢出限，可用于藥物奮乃靜片劑的痕量檢測。

一、試驗部分

（一）儀器與試劑

Cary Eclipse型熒光分光光度計；JL-120型超聲波清洗器；HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋。

奮乃靜對照品（中國藥品生物制品檢定所）；

奮乃靜片劑：上海朝暉藥業(yè)有限公司（產(chǎn)品批號1206F07）、江蘇黃河藥業(yè)股份有限公司（產(chǎn)品批號 20050818）；

鹽酸為優(yōu)級純，其余試劑均為分析純，試驗用水為去離子水。

鹽酸-乙醇溶液：取95%乙醇500mL，加鹽酸10mL，加去離子水至1000mL，搖勻，即得鹽酸-乙醇溶液。

奮乃靜對照品儲備溶液：稱取奮乃靜對照品0.0084g，置于50mL小燒杯，加10mL鹽酸-乙醇溶液溶解，移入100mL棕色容量瓶中，用鹽酸-乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，配成84mg?L-1對照品儲備液，于4℃冰箱放置，備用。

（二）儀器工作條件

激發(fā)波長（λex）為270nm,發(fā)射波長（λem）為375nm；激發(fā)和發(fā)射狹縫均為10nm；激發(fā)單色器濾光片波長范圍為250-295nm，發(fā)射單色器濾光片波長范圍為250-395nm；PMT為600V，測試溫度為室溫。

（三）試驗方法

取奮乃靜片10粒（標示量2mg／粒），除去糖衣，研細，混勻。準確稱取試樣細粉適量于小燒杯中，加鹽酸-乙醇溶液10mL，超聲溶解，過濾，將濾渣用20mL鹽酸-乙醇溶液分4次提取，所得濾液置水浴鍋上揮至剩余 15mL，冷卻，轉(zhuǎn)移到 50mL的棕色容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。使用時移取2.5mL于50mL的棕色容量瓶中用水定容，搖勻，得到樣品溶液，同時做空白試驗。

二、結(jié)果與討論

（一）波長的選擇

取奮乃靜質(zhì)量濃度為25.2mg?L-1的對照品溶液，分別進行激發(fā)光譜和發(fā)射光譜掃描。試驗結(jié)果表明：最大激發(fā)波長（λex）為270nm，最大發(fā)射波長（λem）為375nm。

為提高檢測靈敏度，優(yōu)化了儀器測試條件，將儀器激發(fā)單色器濾光片波長范圍設(shè)為250-295nm，發(fā)射單色器濾光片波長范圍設(shè)為250-395nm。

（二）溶劑的選擇

奮乃靜在水中幾乎不溶，在乙醇、稀鹽酸中溶解，試驗比較了鹽酸-乙醇溶液、0.1mol/L鹽酸溶液、95%乙醇溶液作為溶劑的提取效果。結(jié)果表明：選擇鹽酸-乙醇溶液作為溶劑提取效果最好，95%乙醇溶液次之，試驗選用鹽酸-乙醇溶液作為溶劑。

（三）提取方式的選擇

試驗考察了采取水浴處理試樣和不采用水浴處理試樣兩種提取方式對測試結(jié)果的影響，分別稱取批號1206F07和20050818奮乃靜試樣適量（相當于2mg奮乃靜），按試驗方法測試，結(jié)果見表1。由表1可見，采用水浴揮發(fā)乙醇所測樣品的測定結(jié)果明顯高于不揮發(fā)乙醇的測定結(jié)果，可能因為在紫外激發(fā)波長下，一定濃度的乙醇對奮乃靜產(chǎn)生熒光猝滅影響①②劉瑩等：《253.7nm光輻照乙醇溶液熒光光譜分析》，《南京理工大學(xué)學(xué)報》2003年第6期。，為減少乙醇溶劑對測試結(jié)果的影響，試驗選擇水浴處理試樣。

（表1兩種提取方式的比較(n=5)）

（四）干擾試驗

按試驗方法，對0.10mg·L-1奮乃靜對照品溶液進行干擾試驗，當相對誤差小于±5.0%時，下列離子和物質(zhì)不干擾測定：100倍的Pb2+、Ni2+、Ca2+、Cd2+、Ba2+，200倍的Al3+、Fe3+、Zn2+、Mg2+、Na+、K+，400倍的蔗糖、可溶性淀粉。

（五）工作曲線和檢出限

分別移取0.00mL，0.05mL，0.10mL，0.25mL，0.50mL，1.00mL，2.00mL奮乃靜對照品貯備液置于50mL容量瓶中，加水定容到刻度，搖勻，得到奮乃靜對照品系列溶液，在選定的儀器工作條件下，對奮乃靜對照品溶液系列進行測定，繪制標準曲線，奮乃靜質(zhì)量濃度在0.084～3.36 mg·L-1范圍內(nèi)與熒光強度呈線性關(guān)系，其線性回歸方程為y=209.69x+11.27，相關(guān)系數(shù)為0.9989。對空白溶液平行測定11次，檢出限3s/k（其中s為11次空白的標準偏差，k為線性回歸方程的斜率）計算為0.6μg·L-1。

（六）穩(wěn)定性試驗

按試驗方法，分別對奮乃靜對照品溶液、奮乃靜試樣溶液進行測定，結(jié)果表明：在室溫下避光放置24小時以上，其熒光強度相對穩(wěn)定，說明該體系具有較好的穩(wěn)定性。

（七）2.7方法的精密度

稱取批號20050818奮乃靜試樣5份，按試驗方法進行測定，測得試樣中奮乃靜含量的平均值為1.40mg?L-1，相對標準偏差為1.9%。

（八）樣品分析

分別稱取批號1206F07和20050818奮乃靜試樣適量（相當于1mg奮乃靜），按試驗方法進行測定，同時進行加標回收試驗，結(jié)果見表2。

（表2樣品分析結(jié)果（n=5））

試驗結(jié)果表明：本方法操作簡便、靈敏度高、檢出限低、分析結(jié)果準確，可用于奮乃靜的藥物檢測。