韓 婷，梁 軍，孟 超，楊 珂，李小毅，林巖松

1青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤科，山東青島 266003 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院 2病理科 3基本外科 4核醫(yī)學(xué)科，北京 100730

·論 著·

分化型甲狀腺癌細(xì)胞免疫與侵襲性的相關(guān)性

韓 婷1，梁 軍1，孟 超1，楊 珂2，李小毅3，林巖松4

1青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤科，山東青島 266003 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院2病理科3基本外科4核醫(yī)學(xué)科，北京 100730

目的探討分化型甲狀腺癌 (DTC)免疫狀態(tài)與侵襲性的關(guān)系。方法以2012年9月至12月在北京協(xié)和醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科就診的74例DTC患者為研究對(duì)象，根據(jù)有無(wú)包膜侵犯分為侵犯組 (n=36)和未侵犯組 (n=38)，有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移分為轉(zhuǎn)移組 (n=18例)和未轉(zhuǎn)移組 (n=56)，選擇NK細(xì)胞和T細(xì)胞亞群作為細(xì)胞免疫指標(biāo)，探討細(xì)胞免疫與甲狀腺癌侵襲性的相關(guān)性。結(jié)果單因素分析結(jié)果顯示，包膜侵犯 (χ2=12．175，P=0．000)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 (χ2=8．139，P=0．006)與細(xì)胞免疫指標(biāo)異常相關(guān)，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與是否合并橋本氏病相關(guān) (χ2=7．094，P=0．008);進(jìn)一步分析結(jié)果顯示，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與CD8+T細(xì)胞異常 (χ2=5．429，P=0．020) 相關(guān)，包膜侵犯與NK細(xì)胞異常 (χ2=2．445，P=0．018) 和CD4/CD8異常 (χ2=8．079，P=0．002)相關(guān)。多因素分析結(jié)果顯示，細(xì)胞免疫異常是包膜侵犯 ［OR=5．701，95%CI(2．075～15．666)，P=0．001］ 和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 ［OR=5．063，95%CI(1．571 ～16．320)，P=0．008］ 的危險(xiǎn)因素; 進(jìn)一步分析結(jié)果顯示，CD8+異常是遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)因素 ［OR=2．236，95%CI(1．084～4．613)，P=0．029］，CD4/CD8異常是包膜侵犯的危險(xiǎn)因素 ［OR=2．802，95%CI(1．257～6．244)，P=0．012］。結(jié)論DTC患者免疫狀態(tài)與腫瘤的局部侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，當(dāng)CD8+T細(xì)胞百分比降低和NK細(xì)胞、CD4/CD8異常時(shí)，易出現(xiàn)局部侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。

分化型甲狀腺癌;遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移;局部侵襲;細(xì)胞免疫

Acta Acad Med Sin，2014，36(1)：42-46

甲狀腺癌是最常見(jiàn)的頭頸部惡性腫瘤之一，既可以原位靜止?fàn)顟B(tài)存在，又可以迅速遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的發(fā)生發(fā)展與宿主免疫狀態(tài)密切相關(guān)［1］，但有關(guān)甲狀腺癌患者自身免疫狀態(tài)與局部侵襲及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的關(guān)系尚存在爭(zhēng)議［2-3］。本研究探討了分化型甲狀腺癌 (differentiated thyroid cancer，DTC)患者細(xì)胞免疫與侵襲性的關(guān)系。

對(duì)象和方法

對(duì)象及分組2012年9月至2012年12月在北京協(xié)和醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科就診的DTC患者74例，其中，男28例，女46例;平均年齡 (42．1±11．9) 歲 (11～64歲)，45歲以下50例，45歲及以上24例;所有患者均行甲狀腺全切術(shù)及淋巴結(jié)清掃術(shù)，術(shù)后病理確診為DTC，TNM分期Ⅰ期42例，Ⅱ期7例，Ⅲ期3例，Ⅳ期22例;均未經(jīng)131I治療。根據(jù)有無(wú)包膜侵犯分為侵犯組 (n=36)和未侵犯組 (n=38);根據(jù)有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移分為轉(zhuǎn)移組 (n=18例)和未轉(zhuǎn)移組 (n=56)。確定患者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的方法包括胸部高分辨率電子計(jì)算機(jī)X射線斷層掃描技術(shù) (high resolution computed tomography，HRCT)、131I診斷性全身顯像及手術(shù)病理檢查。18例有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者中，10例由HRCT及131I診斷性全身顯像確定，5例由HRCT及高Tg值確定，2例由HRCT確定，1例由131I診斷性全身顯像及高Tg值確定。3例患者合并2型糖尿病，4例合并高血壓，2例合并婦科疾病，1例合并系統(tǒng)性紅斑狼瘡，以上患者的合并癥均可控制。

方法以自然殺傷 (natural killer，NK)細(xì)胞與T細(xì)胞亞群 (CD4+、CD8+、CD4/CD8)作為反映細(xì)胞免疫的指標(biāo)，采用流式細(xì)胞儀對(duì)T細(xì)胞亞群 (CD3+、CD4+、CD8+)和NK細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，所有患者均在術(shù)后、行放射性核素治療前測(cè)定上述細(xì)胞免疫指標(biāo)1次，后隨診時(shí)定期復(fù)查。正常值的參考范圍： (1)NK細(xì)胞：8% ～26%;(2)CD3+T淋巴細(xì)胞：61% ～85%;(3)CD4+T細(xì)胞：28% ～58%; (4)CD8+T細(xì)胞：19% ～48%;(5)CD4/CD8：0．9 ～2．0。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17．0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)，評(píng)價(jià)免疫指標(biāo)與DTC臨床、病理特征的關(guān)系行單因素分析和多因素Logistic回歸分析，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

包膜侵犯及未侵犯組，有、無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組的CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8和NK水平間水平見(jiàn)表1。根據(jù)TNM分期，包膜侵犯和未侵犯組分別有2例 (5．2%)和20例 (55．6%)處于Ⅳ期，有、無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組分別有11例 (19．6%) 和11例 (61．1%) 處于Ⅳ期。

單因素分析結(jié)果顯示，包膜侵犯 (χ2=12．175，P=0．000) 和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 (χ2=8．139，P=0．006) 與細(xì)胞免疫指標(biāo)異常相關(guān)，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與是否合并橋本氏病相關(guān) (χ2=7．094，P=0．008)。多因素分析結(jié)果顯示，細(xì)胞免疫異常是DTC包膜外侵犯 ［OR=5．701，95%CI(2．075 ～ 15．666)，P=0．001］ 和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移［OR=5．063，95%CI(1．571 ～ 16．320)，P=0．007］的危險(xiǎn)因素 (表2、3)。

表1 淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果Table 1 Lymphocyte subgroups and NK cells

表2 包膜侵犯的相關(guān)因素分析Table 2 Analysis on membrane invasion relevant factors

表3 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素分析Table 3 Analysis on distant metastasis relevant factors

在細(xì)胞免疫中，單因素分析結(jié)果顯示，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)與 CD8+T 細(xì)胞異常 (χ2=5．429，P=0．020)，包膜侵犯與NK細(xì)胞異常 (χ2=2．445，P=0．018) 和CD4/CD8 異常 (χ2=8．079，P=0．002) 相關(guān) (表4)。多因素分析結(jié)果顯示，CD8+異常是遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)因素 ［OR=2．236，95%CI(1．084 ～ 4．613)，P=0．029］，CD4/CD8異常是包膜侵犯的危險(xiǎn)因素［OR=2．802，95%CI(1．257 ～ 6．244)，P=0．012］(表5)。

討 論

DTC主要包括乳頭狀癌 (papillary thyroid cancer，PTC)和濾泡癌 (follicular thyroid cancer，F(xiàn)TC)，占甲狀腺癌的90%以上［4］。近來(lái)研究顯示，甲狀腺癌發(fā)病率逐年增高，主要以PTC增高為主，其誘因與發(fā)病機(jī)制越來(lái)越引人關(guān)注。有研究報(bào)道，甲狀腺癌患者CD4+T淋巴細(xì)胞，CD4/CD8及NK細(xì)胞活性明顯低于正常人，而CD8+T淋巴細(xì)胞活性增高，且該現(xiàn)象隨TNM分期進(jìn)展更趨于明顯［2］。也有報(bào)道提示，CD4+和CD4/CD8持續(xù)下降可能與甲狀腺癌復(fù)發(fā)有關(guān)［5］。這些結(jié)果提示，細(xì)胞免疫在甲狀腺癌患者中可能發(fā)揮主要作用，T細(xì)胞各亞群之間相互作用，特別是CD4和CD8在體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)中可能起重要作用。研究顯示，正常人體內(nèi)CD4/CD8以2～2．5∶1存在于血液中，當(dāng)比值偏離正常值時(shí)，說(shuō)明免疫狀態(tài)處于異常［6］。但上述研究并未針對(duì)甲狀腺癌具體病理類(lèi)型進(jìn)行細(xì)化的研究。因此，本研究選擇甲狀腺癌中發(fā)病率最高且以慢性侵襲性進(jìn)程為特征［7］的DTC為主要研究對(duì)象，對(duì)DTC患者免疫功能異常與侵襲性和轉(zhuǎn)移的進(jìn)行了前瞻性研究。

本研究結(jié)果顯示，當(dāng)DTC患者免疫指標(biāo)出現(xiàn)異常時(shí)，包膜侵犯和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)增高，且其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與是否合并橋本氏并相關(guān)，細(xì)胞免疫在DTC患者的免疫功能異常中占主導(dǎo)地位，與以往研究結(jié)果一致［2，8］。CD4+T細(xì)胞作為輔助性T淋巴細(xì)胞在CD8+T淋巴細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷效應(yīng)中起重要輔助作用，而NK細(xì)胞在腫瘤的免疫防御中既具有防御功能又具有殺傷效應(yīng)。本研究結(jié)果顯示，CD8+T細(xì)胞亞群百分比降低與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，推測(cè)CD8+T細(xì)胞作為細(xì)胞毒性殺傷細(xì)胞，數(shù)量減少使免疫系統(tǒng)的殺傷能力減弱，不能阻止腫瘤細(xì)胞快速生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移。同時(shí)，CD4/CD8比值異常與DTC包膜侵犯相關(guān)，并發(fā)現(xiàn)當(dāng)其比值下降時(shí)包膜侵犯的風(fēng)險(xiǎn)更大，推測(cè)其可能是腫瘤細(xì)胞分泌免疫抑制性因子，刺激產(chǎn)生抑制性T細(xì)胞，降低CD4+T淋巴細(xì)胞的數(shù)量，使其比值下降。此外，本研究結(jié)果還顯示，NK細(xì)胞異常與包膜侵犯相關(guān)，推測(cè)NK細(xì)胞作為非特異性免疫細(xì)胞，可通過(guò)激活免疫球蛋白超家族受體與腫瘤細(xì)胞相互作用［11］，其具體機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。

表4 NK細(xì)胞和T細(xì)胞亞群與臨床病理特征單因素分析結(jié)果Table 4 Univariate analysis on the clinicopathological features of NK cells and T cells subgroup

表5 NK細(xì)胞、CD8+細(xì)胞及CD4/CD8的Logistic回歸分析結(jié)果Table 5 Logistic analysis of NK cell，CD8+ ，and CD4/CD8

綜上，本研究結(jié)果顯示，DTC患者免疫狀態(tài)與腫瘤的局部侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，當(dāng)CD8+T細(xì)胞百分比降低和NK細(xì)胞、CD4/CD8異常時(shí)，易出現(xiàn)局部侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，監(jiān)測(cè)患者外周血NK細(xì)胞和T細(xì)胞亞群，有助于指導(dǎo)臨床從免疫角度進(jìn)行治療干預(yù)。

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Correlations between Cellular Immunity and Invasiveness in Differentiated Thyroid Cancer

HAN Ting1，LIANG Jun1，MENG Chao1，YANG Ke2，LI Xiao-yi3，LIN Yan-song4

1Department of Oncology，the Affiliated Hospital of Qingdao Medical College，Qingdao University，Qingdao，Shandong 266003，China
2Department of Pathology，3Department of General Surgery，4Department of Nuclear Medicine，PUMC Hospital，CAMS and PUMC，Beijing 100730，China

LIN Yan-song Tel：010-69155610，E-mail：linys@pumch．cn

ObjectiveTo investigate the relationship between the immunity and invasiveness in differentiated thyroid cancer(DTC)．MethodsTotally 74 DTC who were treated in Peking Union Medical College Hospital from September 2012 to December 2012 were enrolled in this study．These 74 patients were divided into membrane invasion group(n=36)and without membrane invasion group(n=38);also，they were divided into distant metastasis group(n=18)and without distant metastasis group(n=56)．Natural killer(NK)cells and T-cell subsets were chosen as indicators for cellular immunity to investigate the correlation between cellular immunity and invasiveness in DTC．ResultsUnivariate analysis showed that the membrane invasion( χ2=12．175，P=0．000)and distant metastasis( χ2=8．139，P=0．006)correlated with cell immunity，where-as distant metastasis correlated with lymphocytic thyroiditis( χ2=7．094，P=0．008) ．Further investigation shows that distant metastasis was associated with the percentage of CD8+T cell subgroup( χ2=5．429，P=0．020)，and membrane invasion was significantly associated with NK cells( χ2=2．445，P=0．018)and CD4/CD8 disorder subgroup( χ2=8．079，P=0．002) ．Multivariate analysis showed that cell immunity disorder was a risk factor for membrane invasion ［OR=5．701，95%CI(2．075 ～15．666)，P=0．001］ and distant metastasis ［OR=5．063，95%CI(1．571 ～16．320)，P=0．008］．Further analysis showed that CD8+T cell was a risk factor for metastasis ［OR=2．236，95%CI(1．084 ～4．613)，P=0．029］，and CD4/CD8 disorders were the risk factors for membrane invasion ［OR=2．802，95%CI(1．257 ～6．244)，P=0．012］．ConclusionCell immunity in thyroid cancer has close relationship with membrane invasion and distant metastasis，especially when the percentage of CD8+T cells decreases and when the NK cells and CD4/CD8 are abnormal，which may lead to membrane invasion and distant metastasis．

differentiated thyroid cancer;distant metastasis;regional invasiveness;cellular immune system

林巖松 電話：010-69155610，電子郵件：linys@pumch．cn

R581

A

1000-503X(2014)01-0042-05

10．3881/j．issn．1000-503X．2014．01．008

衛(wèi)生部行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)項(xiàng)目 (201202012)Supported by the Ministry of Health Industry Special Scientific Research Projects(201202012)

2013-06-27)