吳巍巍,姜雪鶯,劉 暴,宋小軍,劉昌偉
1中國醫(yī)學科學院 北京協(xié)和醫(yī)學院 北京協(xié)和醫(yī)院血管外科,北京 100032
2首都醫(yī)科大學附屬北京同仁醫(yī)院麻醉科,北京 100730
·論 著·
補片擴大成型術(shù)構(gòu)建豬腹主動脈瘤腔內(nèi)治療模型
吳巍巍1,姜雪鶯2,劉 暴1,宋小軍1,劉昌偉1
1中國醫(yī)學科學院 北京協(xié)和醫(yī)學院 北京協(xié)和醫(yī)院血管外科,北京 100032
2首都醫(yī)科大學附屬北京同仁醫(yī)院麻醉科,北京 100730
目的探索使用補片擴大成型技術(shù)建立豬腹主動脈瘤模型,驗證其作為動脈瘤腔內(nèi)修復動物模型的可行性。方法實驗豬在全身麻醉下接受腹人工血管補片擴大成型術(shù)構(gòu)建腹主動脈瘤模型,隨即進行動脈造影,并實施覆膜支架動脈瘤腔內(nèi)修復術(shù),術(shù)后隨訪3個月復查造影。結(jié)果完成腹主動脈瘤模型建立及腔內(nèi)修復10例,所有模型建立均獲得成功,術(shù)中測量腎下腹主動脈直徑平均為 (10.5±0.4)mm;動脈瘤模型最大直徑平均為 (26.3±3.1)mm,直徑平均增加(15.7±3.1)mm;動脈瘤模型建立前、后的動脈直徑差異有統(tǒng)計學意義 (P<0.001)。除1例因腔內(nèi)修復時支架遮蓋腎動脈于術(shù)后24 h死亡,其余實驗豬手術(shù)過程平穩(wěn),術(shù)后恢復良好,隨訪3個月未發(fā)生意外死亡,圍手術(shù)期1個月及術(shù)后3個月生存率均為90%。腔內(nèi)修復發(fā)生Ⅱ型內(nèi)漏1例 (10%),隨訪3個月造影均無內(nèi)漏。結(jié)論全身麻醉下開腹人工血管補片擴大成型技術(shù)構(gòu)建豬腹主動脈瘤模型安全有效,該模型可作為腹主動脈瘤腔內(nèi)修復的動物模型。
腹主動脈瘤;模型;豬;腔內(nèi)修復
Acta Acad Med Sin,2014,36(1):92-97
隨著介入治療技術(shù)的進步和醫(yī)用生物材料的發(fā)展,腹主動脈瘤治療除經(jīng)典的開腹切除術(shù)外,腔內(nèi)修復術(shù)近年來有了長足發(fā)展。腔內(nèi)修復需要使用覆膜血管支架,新型覆膜血管支架的有效性和安全性需要通過合適的動脈瘤動物模型進行評估。由于豬的主動脈在形態(tài)、生理、分支血管分布方面與人腹主動脈有相似性[1],因此豬動脈瘤模型是較為理想的腹主動脈瘤研究和評價腔內(nèi)修復效果的模型[2]。本課題組經(jīng)過摸索,采取全身麻醉下開腹人工血管補片擴大成型技術(shù)建立豬腹主動脈瘤模型,隨即經(jīng)股動脈進行腔內(nèi)覆膜支架修復,觀察了實驗豬長期存活情況及介入治療遠期效果,探討了其作為動脈瘤動物模型的可行性。
實驗動物北京郊區(qū)當?shù)仉s種長白豬10只,雌雄不限,體重40~60 kg。本研究經(jīng)中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)院倫理審查委員會審核同意。
麻醉實施與圍術(shù)期管理
術(shù)前準備:術(shù)前3 d嚴密觀察動物的精神狀態(tài)、飲食及活動情況,排除有異常的豬,所有豬術(shù)前禁食12 h,禁水6 h。
麻醉方法:采取氣管插管靜脈復合麻醉。
術(shù)中轉(zhuǎn)運:豬動脈瘤模型建立成功后,帶氣管插管,球囊輔助通氣轉(zhuǎn)運至導管室后重新連接麻醉機控制呼吸,繼續(xù)給予藥物維持麻醉,進行主動脈造影及動脈瘤腔內(nèi)修復術(shù)。
血壓控制:麻醉后解剖顯露右側(cè)頸動脈,穿刺置管進行直接動脈壓監(jiān)測。術(shù)中根據(jù)不同手術(shù)階段,在直接動脈壓監(jiān)測下調(diào)節(jié)血壓。主動脈阻斷后用硝酸甘油適當降低血壓,重新開放阻斷前加快補液并用麻黃素適當提升血壓。在腔內(nèi)修復術(shù)中放置主動脈覆膜支架時用硝酸甘油控制性降壓,維持收縮壓在90~100 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。
預防感染:靜脈輸注氨芐青霉素3 g預防感染。
麻醉蘇醒:在實驗豬自主呼吸恢復良好時,拔除氣管導管后將動物置于側(cè)臥位或俯臥位,適當保溫直至意識完全恢復。
腹主動脈瘤模型的建立劍突至臍下正中切口進腹,將小腸推向右側(cè),在腸系膜根部左側(cè)打開后腹膜,仔細結(jié)扎腹主動脈前方的淋巴管,顯露腎下腹主動脈,套阻斷帶備用;經(jīng)靜脈通路給予肝素鈉200 U/kg,阻斷腹主動脈,縱行切開豬腹主動脈中段左前側(cè)壁長約1.5 cm,將滌綸人工血管 (法國Intervascular公司)修剪成橢圓形,長徑1.2 cm,短徑0.6 cm,長徑作為橫徑與腹主動脈左前側(cè)壁切口連續(xù)外翻縫合,使腹主動脈形成向左前方突起的動脈瘤;解除血管阻斷,測量腹主動脈直徑、瘤體直徑,仔細止血,逐層關(guān)腹。
腹主動脈造影及腔內(nèi)修復轉(zhuǎn)運至導管室,向股動脈置入導管鞘;C臂 (GE LCV+,美國通用公司)透視下送入親水導絲至腹主動脈,經(jīng)導絲引入豬尾造影導管,正位及右前斜位行腹主動脈造影,測量瘤體直徑、瘤頸及瘤體長度,按超過瘤頸直徑10%~20%選擇支架直徑,按瘤頸瘤體長度選擇支架長度;撤出導管,保留導絲,拔除導管鞘,尖刀橫行切開股動脈前壁約3 mm,沿導絲輸送已消毒的自膨式覆膜支架血管 (蘇州維科公司)至腹主動脈,支架近端至少超過動脈瘤上緣1.5 cm,遠端至少超過動脈瘤下緣1.5 cm,按預定位置釋放支架;撤出支架輸送系統(tǒng),更換導管鞘,沿導絲進入豬尾造影導管,復查動脈造影,記錄有無內(nèi)漏;撤出導管鞘,血管縫線關(guān)閉股動脈切口,逐層縫合腹股溝切口。
術(shù)后隨訪及病理術(shù)后12 h恢復流食,逐漸過渡為正常飲食,觀察實驗豬復蘇、飲食及下肢血運;隨訪3個月,按上述方法復查腹主動脈造影,記錄腹主動脈直徑、支架內(nèi)徑、有無內(nèi)漏;造影后安樂死,取材進行大體及鏡下病理檢查。
統(tǒng)計學處理采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件,計量資料以均數(shù)±標準差表示,組間比較采用配對樣本t檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
一般情況共完成腹主動脈瘤模型建立及腔內(nèi)修復10例,實驗用豬體重 (51.9±4.5)kg,豬齡 (11.3±0.9)個月,手術(shù)出血 (352±66)ml。1例因腔內(nèi)修復時支架遮蓋腎動脈于術(shù)后24 h死亡,其余實驗豬手術(shù)過程平穩(wěn),麻醉效果滿意,術(shù)后隨訪3個月未發(fā)生意外死亡,圍術(shù)期1個月及術(shù)后3個月生存率均為90%。
動脈瘤模型建立阻斷腹主動脈建立動脈瘤模型時,腹主動脈阻斷時間為 (25.6±4.2)min,所有實驗豬動脈瘤模型建立均獲得成功。術(shù)中測量結(jié)果顯示,正常腎下腹主動脈直徑平均為 (10.5±0.3)mm,動脈瘤模型最大直徑平均為 (26.3±3.1)mm,直徑平均增加(15.8±3.1)mm,動脈瘤模型建立前、后動脈直徑差異有統(tǒng)計學意義 (P<0.001)(圖1)。
動脈瘤造影及腔內(nèi)修復腹主動脈造影 (圖2)測量近端瘤頸 (瘤體上緣至較低腎動脈下緣)距離平均為 (42±12)mm,遠端瘤頸 (瘤體下緣至主動脈分叉)距離平均為 (40±15)mm,選取支架規(guī)格統(tǒng)一為直徑12 mm,長度60 mm。腔內(nèi)修復釋放覆膜支架時使用硝酸甘油降壓,收縮壓控制在 (94.6±3.0)mmHg。未發(fā)生Ⅰ型內(nèi)漏,發(fā)生Ⅱ型內(nèi)漏1例 (10%),隨診觀察。1例實驗豬釋放時因技術(shù)失誤支架遮蓋腎動脈,于術(shù)后24 h內(nèi)死亡 (圖3)。完成手術(shù)后縫合切口(圖4)。
圖1 豬腹主動脈瘤模型,黑箭頭所示為滌綸補片瘤體,白箭頭所示為腰動脈Fig 1 An experimental abdominal aortic aneurysm swine model,the black arrow shows a dacron patch and the white arrow shows a lumbar artery
圖2 豬動脈瘤模型數(shù)字減影造影Fig 2 Digital subtraction angiography of an experimental abdominal aortic aneurysm swine model
圖3 覆膜支架誤覆蓋腎動脈,黑箭頭所示為覆膜支架,白箭頭所示為雙側(cè)腎動脈Fig 3 The renal arteries of a swine model were covered by the stent graft carelessly,the black arrow shows the stent graft and the white arrows show bilateral renal arteries
圖4 豬動脈瘤模型手術(shù)切口Fig 4 Surgical incision of a swine model
隨訪復查造影及病理存活實驗豬均在手術(shù)后3個月存活良好,經(jīng)對側(cè)腹股溝切口解剖股動脈,復查造影顯示腹主動脈、腎動脈及髂動脈均通暢,支架位置良好,均無內(nèi)漏。復查造影后安樂死,取材標本,大體病理顯示支架沒有發(fā)生塌陷,全部支架的橫截面形態(tài)基本保持規(guī)則的圓形,支架周圍瘤腔內(nèi)血栓化良好,無內(nèi)漏;鏡下病理顯示支架表面被新生內(nèi)膜覆蓋,新生內(nèi)膜以成纖維細胞為主,動脈壁少量炎性細胞浸潤,動脈中層平滑肌無明顯斷裂。
腹主動脈瘤動物模型的構(gòu)建腹主動脈瘤男性發(fā)病率為4% ~9%,女性發(fā)病率約為1%[3]。腹主動脈瘤危害巨大,一旦破裂,后果嚴重,有調(diào)查顯示,42%的患者甚至都來不及送至醫(yī)院[4],即使送至醫(yī)院進行急診手術(shù),術(shù)后30 d內(nèi)死亡率也高達41%。2003年美國所有死因中死于腹主動脈瘤破裂和主動脈夾層破裂占5.1%[5]。隨著社會進入老齡化,腹主動脈瘤的發(fā)病率還在逐漸升高。動脈瘤動物模型對于研究腹主動脈瘤的發(fā)病機制、治療和預防具有重要的科研價值。
最早的腹主動脈瘤動物模型始于20世紀50年代。研究者通過喂食大鼠甜豌豆造成大鼠山黧豆中毒,發(fā)現(xiàn)可引起大鼠主動脈瘤形成和自發(fā)破裂[6]。此后,還有研究者通過喂食實驗動物β-氨基丙腈和肼苯噠嗪[7]、乙烯雌酚[8]誘導破裂動脈瘤模型。20世紀70年代,醫(yī)學家通過誘導大鼠X染色體上基因變異,制作基因缺陷Blotchy大鼠,基因變異導致銅代謝紊亂,使大鼠主動脈壁彈力蛋白和膠原的連接破壞而產(chǎn)生動脈瘤[9]?;|(zhì)金屬蛋白酶 (matrix metalloproteinases,MMP)[10]、MMP 組織抑制蛋白 (tissue inhibitor of MMP,TIMP)[11]、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶和血管緊張素Ⅱ受體[12]等也被用作干預靶點制作基因缺陷動脈瘤動物模型。上述藥物或基因誘導的動脈瘤動物模型對于研究動脈瘤的發(fā)病機制和影響因素具有重要意義,但實驗動物體型偏小,成瘤周期長,結(jié)果不確切,一般不適于作為動脈瘤外科治療模型。
基于對動脈瘤發(fā)病機制的了解,研究者也嘗試通過化學物質(zhì)直接干預的方法制作腹主動脈瘤動物模型,即采用化學物質(zhì)浸泡動脈主動脈壁誘導炎癥反應(yīng)來制作動脈瘤模型,如用氯化鈣溶液和硫代硫酸浸泡可導致兔主動脈中膜炎癥損傷,3周后會形成動脈瘤[13]。彈力蛋白酶灌注動物主動脈可導致動脈壁彈力蛋白降解,誘導形成大鼠動脈瘤[14]?;瘜W物質(zhì)誘導的動脈瘤動物模型對于研究動脈瘤的發(fā)病機制也具有一定意義。主動脈在化學物質(zhì)作用后至形成動脈瘤需要一定時間,需要通過定期檢查監(jiān)測成瘤效果,形成動脈瘤后也可作為動脈瘤外科治療模型,但具有一定局限性。
直接通過手術(shù)方法制作動脈瘤動物模型具有制作快速、形態(tài)可控、效果確切的優(yōu)點。20世紀50年代,Allen[15]就使用一段下腔靜脈間置在腎下腹主動脈制作動脈瘤模型,由于靜脈壁薄,不能承受動脈壓力,最終移植物破裂導致實驗動物死亡。20世紀90年代,研究者使用囊狀移植物間置于腎下腹主動脈,切除一段自體腹主動脈,將移植物間置端端吻合在動物腹主動脈間,制作了犬、豬和羊動脈瘤模型,使用的移植物包括滌綸[16]、生物可降解彈力聚氨酯膜[17]、自體頸靜脈[18]、胃漿膜[19]和戊二醛處理的異體牛頸靜脈[20]等,但間置移植物模型切除了一段自體動脈,創(chuàng)傷較大,而且破壞了腰動脈分支。還有研究者嘗試將動物腹主動脈前壁縱行切開,使用生物膠黏合[21]或是激光閉合[22],但成瘤率較低,形成動脈瘤直徑也較小。在此基礎(chǔ)上,研究者又繼續(xù)發(fā)展出了補片動脈瘤模型,切開主動脈前壁,使用不同材料的補片制作動脈瘤,各種補片材料包括腹膜[23]、髂靜脈[24]、空腸[25]、滌綸[26]等。補片動脈瘤模型較間置動脈瘤模型手術(shù)創(chuàng)傷小,保留了腰動脈分支,更接近人腹主動脈瘤腔內(nèi)治療時的實際情況。上述通過手術(shù)方法制作的動脈瘤動物模型大多不能模擬動脈瘤自然生長的特點,一般不適于動脈瘤病因?qū)W研究,但由于成瘤確切,可用于大體型實驗動物,尤其適于作為人腹主動脈瘤腔內(nèi)治療的實驗動物模型,特別是用作研究動脈瘤腔內(nèi)治療技術(shù)。不足之處在于手術(shù)具有一定風險,需要麻醉醫(yī)師的密切配合。
用于研究腹主動脈瘤腔內(nèi)治療技術(shù)的實驗動物模型還需具備主動脈直徑、分支分布與人相近的特點。本研究采用的北京郊區(qū)當?shù)仉s種長白豬體重及主動脈直徑與人接近,主要分支分布與人類似,適于用作腹主動脈瘤腔內(nèi)治療動物模型。設(shè)計該模型時使用滌綸補片,將補片長徑垂直于腹主動脈縱行切口作擴大成型,起到了“縱切橫縫”的效果,和文獻中報道方法相比構(gòu)建動脈瘤更大,成瘤直徑更理想,補片成型法也保留了瘤體周圍的腰動脈分支,在后續(xù)的腔內(nèi)治療中較好地模擬了人腹主動脈瘤腔內(nèi)治療。
值得一提的是,本模型構(gòu)建的動脈瘤是偏心性動脈瘤,豬腹主動脈直徑略小于人腹主動脈直徑,不適用于現(xiàn)有的分叉型腹主動脈瘤覆膜支架產(chǎn)品,用于驗證新型支架時需專門設(shè)計較小尺寸的支架;補片材料也可能限制瘤體本身對內(nèi)漏的病理反應(yīng) (如動脈瘤繼續(xù)擴張)等,分析實驗結(jié)果時要充分考慮該模型的局限性。
補片擴大成型法構(gòu)建豬動脈瘤腔內(nèi)治療模型的管理要點豬的循環(huán)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與人體相似,尤其是主動脈解剖結(jié)構(gòu)及直徑均與人主動脈相近,特別適于構(gòu)建用于檢驗新治療方法有效性的動脈瘤模型,但豬的麻醉風險較其他動物大。本研究在靜脈誘導后將成人大號直鏡片從豬喙左側(cè)置入并盡量伸向口咽部,向上提起后以消毒環(huán)鉗順鏡片方向向前深入至會厭根部,向上稍施力,即可將會厭尖端從食道開口內(nèi)挑出,豬的聲門可在其后方窺及,此時給予肌松藥物后插管,成功率較高。
豬在完成腹主動脈瘤模型建立后,需轉(zhuǎn)運至導管室進行腔內(nèi)修復。麻醉醫(yī)師在轉(zhuǎn)運過程中應(yīng)起到指揮作用,協(xié)調(diào)手術(shù)醫(yī)師及其他手術(shù)室人員運送實驗豬。轉(zhuǎn)運前可追加肌松藥物和鎮(zhèn)靜藥物,轉(zhuǎn)運過程中應(yīng)格外注意豬氣道的管理,避免各管路脫出,轉(zhuǎn)運過程中需備好各種麻醉藥物和急救藥品。
開腹人工血管補片擴大成型技術(shù)建立豬腹主動脈瘤模型需要在腎動脈水平下方阻斷豬腹主動脈 (25.6±4.2)min,維持血流動力學穩(wěn)定是腹主動脈瘤手術(shù)麻醉管理的重點[27-29]。腹主動脈阻斷后外周血管阻力增高,近端動脈壓增加,左心負荷急劇增加;當腹主動脈開放,阻斷遠端區(qū)域的組織器官血流恢復,重新得到灌注,左心后負荷降低,外周血管阻力降低,加之手術(shù)失血,血容量不足,共同作用可引起血壓明顯下降。阻斷或開放主動脈鉗夾時速度要慢,需與麻醉醫(yī)師充分協(xié)作,必要時應(yīng)重新阻斷或開放。腹主動脈開放前,應(yīng)停止使用血管擴張藥,開放后為了維持心、腦、腎足夠的灌注壓,必要時使用血管收縮藥。
腔內(nèi)修復過程中為減少支架釋放時受近端血流沖擊而移位,需在麻醉醫(yī)師配合下使用小劑量硝酸甘油控制性降壓,將收縮壓降至90~100 mmHg。支架釋放過程通常為數(shù)秒鐘,小量的硝酸甘油即可滿足控制血壓的要求。
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Open Construction of Experimental Abdominal Aortic Aneurysm Swine Models with Dacron Patch for Evaluating Endovascular Aneurysm Repair Techniques
WU Wei-wei1,JIANG Xue-ying2,LIU Bao1,SONG Xiao-jun1,LIU Chang-wei1
1Department of Vascular Surgery,PUMC Hospital,CAMS and PUMC,Beijing 100032,China
2Department of Anesthesiology,Beijing Tongren Hospitial,Capital Medical University,Beijing 100730,China
LIU Chang-weiTel:010-69158230,E-mail:liucw@vip.sina.com
ObjectiveTo construct an experimental abdominal aortic aneurysm(AAA)swine model with Dacron patch for evaluating endovascular aneurysm repair(EVAR)technique.MethodsThe experimental pigs were generally anesthetized for the open procedure of an aneurysm model creation with Dacron and subsequent arteriography and EVAR with stent graft.Repeat arteriography was performed after 3-month followup.ResultsAAA models were successfully constructed in all 10 experimental pigs.The average aneurysm diameter was(26.3 ±3.1)mm,increasing by(15.7 ±3.1)mm comparing to the primary aorta diameter(10.5 ±0.4)mm.The aorta diameter before and after the experiment showed significant difference(P <0.001).All the animals were survived after the procedure.One swine died 24 hours after the subsequent EVAR because the covering of both renal arteries by the stent graft.The rest 9 animals survived well after the whole operation and 3-month follow-up.The surviving rates at 1 month and 3 months after the operation were both 90%.One typeⅡ endoleak(10%)was observed after the EVAR,which disappeared at 3-month follow-up.Conclusions Open construction of experimental AAA swine models with Dacron patch is safe and feasible.The model can be used in the developing new EVAR techniques and implant training.
abdominal aortic aneurysm;model;swine;endovascular aneurysm repair
劉昌偉 電話:010-69158230,電子郵件:liucw@vip.sina.com
R654.4
A
1000-503X(2014)01-0092-06
10.3881/j.issn.1000-503X.2014.01.017
2013-06-17)