邵偉然，李春茹

(佳木斯大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院，黑龍江佳木斯154003)

醫(yī)用鈦及鈦合金指的是用于制造植入人體內(nèi)的醫(yī)療器件、假體或人工器官和輔助治療設(shè)備的鈦合金［1，2］。主要有鈦6鋁4釩、鈦5鋁2.5錫、ELI鈦6鋁4釩等合金。它們具有強(qiáng)度高、力學(xué)性質(zhì)接近人骨，強(qiáng)度遠(yuǎn)優(yōu)于純鈦，還具有耐疲勞、耐腐蝕及生物相容性優(yōu)良等特點(diǎn)。目前在醫(yī)學(xué)上也將其用于口腔的材料，但用于人體時(shí)需要進(jìn)行科學(xué)的口腔刺激試驗(yàn)，本實(shí)驗(yàn)對(duì)TLE，TLM 2種新型鈦合金在試驗(yàn)條件下，對(duì)口腔黏膜的刺激性進(jìn)行的總結(jié)評(píng)價(jià)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取同一品系、鼠齡在60～80d初成年的雄性小白鼠40只，40只小動(dòng)物生命情況基本一致，健康方面，無(wú)顯著性差異，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。將40只小白鼠分為 A、B、C、D四組，即TLE組、TLM組、陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組。

此外，對(duì)于TLE，TLM鈦合金的選擇上，選擇的標(biāo)準(zhǔn)為：圓片，直徑4 mm，厚1 mm；且在圓片中央應(yīng)該打出直徑為1 mm的等距離兩個(gè)小孔；圓片的表面光滑，且邊緣圓鈍。在C組的陽(yáng)性對(duì)照組中選擇的為工業(yè)用聚氯乙烯(含有機(jī)錫)材料；在D組的陰性對(duì)照組中使用的材料為牙膠，且在數(shù)量、規(guī)格和TLE，TLM鈦合金一致。

1.2 方法

1.2.1 縫合固定試樣

在對(duì)40只小白鼠進(jìn)行一周的適應(yīng)之后，對(duì)所有的小白鼠以20 mg/kg體重的標(biāo)準(zhǔn)，使用戊巴比妥鈉將小白鼠進(jìn)行輕度麻醉。在對(duì)所有小白鼠進(jìn)行麻醉處理之后，采用75%酒精對(duì)小白鼠的口腔內(nèi)外進(jìn)行科學(xué)的消毒。在消毒完成后，再對(duì)A組的小白鼠使用無(wú)損傷縫合針線，針線將TLE鈦合金材料縫合到小白鼠的一側(cè)頰囊黏膜，貫通黏膜皮膚全層縫合，使其能夠與黏膜進(jìn)行密切的接觸，小白鼠的另一側(cè)頰囊則為空白的對(duì)照。以此方法對(duì)B、C、D三組縫合相應(yīng)的材料。

1.2.2 術(shù)后觀察

在對(duì)小白鼠進(jìn)行縫合固定試樣手術(shù)后的2周內(nèi)，觀察小白鼠每天的生命狀況以及小白鼠的口腔內(nèi)黏膜的各種變化情況，重點(diǎn)觀察小白鼠口腔內(nèi)與試樣片密切接觸的黏膜周?chē)欠裼谐溲⒚訝€、水腫、滲出等情況產(chǎn)生。

在對(duì)小白鼠進(jìn)行縫合固定試樣手術(shù)的2周后，對(duì)小白鼠進(jìn)行拆線，取出小白鼠口腔內(nèi)的試樣，同時(shí)觀察小白鼠的頰囊是否有紅斑、焦痂等其它異常情況產(chǎn)生。此外還應(yīng)該詳細(xì)的記錄小白鼠的頰囊的一般狀況，按目前醫(yī)學(xué)上的口腔反應(yīng)分類(lèi)系統(tǒng)給分，如表1。

1.2.3 標(biāo)本制備

所有參與試驗(yàn)的小白鼠在取出試樣24h后，以腹腔麻醉的方式，無(wú)痛的處死小白鼠，同時(shí)切取與試樣密切接觸的部位包括頰囊黏膜與皮膚全層組織，將此作為標(biāo)本浸泡在福爾馬林溶液中，之后進(jìn)行切片染色，并根據(jù)組織學(xué)觀察結(jié)果，按口腔組織反應(yīng)顯微鏡評(píng)價(jià)分類(lèi)系統(tǒng)給分，見(jiàn)表2。

表1 口腔反應(yīng)分類(lèi)系統(tǒng)

表2 口腔組織反應(yīng)顯微鏡評(píng)價(jià)分類(lèi)系統(tǒng)

2 結(jié)果

對(duì)于本次試驗(yàn)的結(jié)果，主要可以以小白鼠的觀察階段為基礎(chǔ)進(jìn)行分類(lèi)，進(jìn)而分成兩部分進(jìn)行闡述：

大體觀察評(píng)價(jià)。在對(duì)小白鼠進(jìn)行縫合固定試樣后的2周觀察后，可以發(fā)現(xiàn)參與試驗(yàn)的所有小白鼠的生命活動(dòng)正常，沒(méi)有全身的不良反應(yīng)發(fā)生。在A組、B組的小白鼠試樣的接觸部位口腔黏膜處，無(wú)充血、出血、糜爛、潰瘍等異常反應(yīng)發(fā)生，與小白鼠的對(duì)側(cè)空白對(duì)照的頰囊黏膜無(wú)顯著性差異，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)與D組小白鼠的頰囊黏膜比較無(wú)顯著差異。在C組的小白鼠中，小白鼠的試樣的接觸部位口腔黏膜局部明顯有充血，水腫的情況發(fā)生。但無(wú)潰瘍以及重度紅斑等情況。

標(biāo)本觀察評(píng)價(jià)。通過(guò)相關(guān)人員對(duì)小白鼠的頰囊的組織切片進(jìn)行觀察后，可得出以下結(jié)果，A組、B組及D組的小白鼠的組織切片的上皮均連續(xù)性完好，且均無(wú)細(xì)胞變形的情況產(chǎn)生，同時(shí)未有潰瘍、糜爛等情況，不僅如此，這三組的細(xì)胞層次排列均勻，無(wú)血管充血、組織水腫的情況產(chǎn)生。在C組中，上皮組織變形，血管有充血擴(kuò)張，水腫等情況產(chǎn)生。

根據(jù)上述的觀察情況，并綜合口腔反應(yīng)分類(lèi)系統(tǒng)、口腔組織反應(yīng)顯微鏡評(píng)價(jià)分類(lèi)系統(tǒng)，可以得出以下結(jié)論：TLE，TLM這兩種新型鈦合金材料對(duì)小白鼠的口腔黏膜的刺激性，與陰性對(duì)照組相比較無(wú)明顯差異，刺激指數(shù)為0，反應(yīng)程度為無(wú)刺激。

3 討論

由于人體的特殊性，任何的生物材料在對(duì)人體進(jìn)行應(yīng)用前，都應(yīng)該進(jìn)行科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臋z驗(yàn)，就目前來(lái)看，鈦合金由于其具有適中強(qiáng)韌性匹配、低彈性模量的機(jī)械物理性能，耐腐蝕、無(wú)毒性等化學(xué)性能以及成本低等優(yōu)點(diǎn)，開(kāi)始受到了醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注，但對(duì)于鈦合金應(yīng)用于人體來(lái)說(shuō)，其不僅僅需要上述的這些性能，更需要的是良好的生物相容性。因此，對(duì)于鈦合金應(yīng)用于口腔，必須進(jìn)行口腔刺激試驗(yàn)，從而評(píng)價(jià)醫(yī)用的鈦合金材料在試驗(yàn)條件下產(chǎn)生口腔組織反應(yīng)的潛在性。本文的研究主要是基于ISO10993-10：1995之上，同時(shí)以ISO/TR7406的要求作為參考進(jìn)行TLE，TLM新型鈦合金口腔黏膜刺激試驗(yàn)，就試驗(yàn)的結(jié)果來(lái)看，在此要求及試驗(yàn)條件下的TLE，TLM新型鈦合金對(duì)口腔黏膜的刺激指數(shù)均為0，反應(yīng)程度是無(wú)刺激，但是這只是TLE，TLM新型鈦合金材料的生物學(xué)評(píng)價(jià)之一，還應(yīng)該結(jié)合其它試驗(yàn)對(duì)其生物相容性進(jìn)行全面評(píng)價(jià)。因此，在醫(yī)學(xué)臨床上應(yīng)該根據(jù)實(shí)際情況選擇性的使用。

［1］于振濤，周廉，王克光.一種外科植入件用β型鈦合金［P］.2003，CN 03153139.3

［2］張玉梅.牙科用TIZr合金的研制及應(yīng)用基礎(chǔ)研究［D］.第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文，2008