佘瑞芳 劉建華 周 彥 伏 兵 錢明月 張照婷 陳皆春

(蚌埠醫(yī)學(xué)院附屬連云港醫(yī)院，江蘇 連云港 222000)

同型半胱氨酸(Hcy)是心腦血管病的獨立危險因素。近年來有研究提出非對稱性二甲基精氨酸(ADMA)也可能是一個心腦血管疾病危險因子，并可預(yù)示心腦血管病的患病風(fēng)險和病死率〔1〕。然而，血漿ADMA與急性腦梗死患者血清Hcy有無關(guān)聯(lián)及其相互作用的病理生理機制如何，目前相關(guān)文獻較少。本研究擬探索急性腦梗死患者血漿ADMA與血清Hcy水平的相關(guān)性，以期為臨床提供一種急性腦梗死病情判斷的指標(biāo)，并為缺血性腦卒中探尋新的治療靶點。

1 對象與方法

1.1對象 選取2012年12月至2013年7月蚌埠醫(yī)學(xué)院附屬連云港醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性腦梗死患者及體檢中心同期健康體檢者共186例，急性腦梗死組126例，男73例，女53例，平均(63.44±9.92)歲；健康體檢者60例為對照組，其中男34例，女26例，平均(63.85±8.57)歲。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。急性腦梗死組納入標(biāo)準(zhǔn)：首次發(fā)??；年齡40～80歲；病程72 h內(nèi)；梗死位于前循環(huán)供血區(qū)；符合全國第四屆腦血管病會議修訂的腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)〔2〕，并經(jīng)頭顱CT/MRI/DWI等影像學(xué)證實；知情同意，依從性好。排除標(biāo)準(zhǔn)：有嚴(yán)重感染或自身免疫性疾??；有腦腫瘤、腦出血、出血性腦梗死；近3個月有心肌梗死病史；心房顫動、甲狀腺疾病、嚴(yán)重心肝腎功能不全。對照組納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡、性別與急性腦梗死組相匹配既往無腦血管病史。

1.2方法 急性腦梗死組依據(jù)美國國立衛(wèi)生研究所卒中量表評分(NIHSS)進行神經(jīng)功能缺損程度評估，根據(jù)分值分為輕型梗死組(<4分)、中型梗死組(4～15分)、重型梗死組(>15分)〔3〕。標(biāo)本采集：所有患者于入院后第二天清晨空腹時，用肝素鋰抗凝管及普通生化管收集新鮮靜脈血各3 ml，離心(3 000 r/min,10 min)，吸取血漿-80℃保存；普通生化管中的血清用于檢測Hcy濃度。血漿ADMA采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進行檢測，試劑盒及質(zhì)控品購自北京九強生物技術(shù)股份有限公司，操作完全按照說明書進行。血清Hcy采用ADVIA Centaur CP全自動化學(xué)發(fā)光分析儀及其配套試劑，由檢驗科進行檢測。

2 結(jié) 果

2.1ADMA及Hcy水平與急性腦梗死的關(guān)系 輕型、中型、重型梗死組的血漿ADMA水平均高于對照組(均P<0.01)。不同神經(jīng)功能損傷程度組間多重比較，輕型梗死組與中型梗死組、重型梗死組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.017,P=0.000)；中型梗死組與重型梗死組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.010)。血清Hcy輕型梗死組與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；中、重型梗死組與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)血漿ADMA及血清Hcy水平均與神經(jīng)功能缺損程度呈正相關(guān)(r=0.392,0.406;P<0.01)。

表1 不同神經(jīng)功能缺損程度與對照組血漿ADMA及血清Hcy比較±s)

2.2血漿ADMA與一般生化指標(biāo)的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，血漿ADMA濃度與TG、LDL、Hcy水平均呈正相關(guān)(r=0.812、0.806、0.885，均P<0.01)；與HDL、葉酸呈負(fù)相關(guān)(r=-0.801、-0.728，均P<0.01)。多因素線性逐步回歸分析，血漿ADMA濃度隨Hcy水平的升高而增加，呈線性趨勢(回歸系數(shù)B=2.404，P<0.01)。

3 討 論

ADMA作為一種主要的內(nèi)源性一氧化氮合酶抑制劑，非選擇性抑制一氧化氮合酶的各種亞型，進而使一氧化氮對血管的保護作用受損〔4,5〕；此外，ADMA本身作為直接的損傷因子可誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)，加速內(nèi)皮細(xì)胞衰老，介導(dǎo)多種炎癥因子生成,誘發(fā)炎癥反應(yīng)，促進血管平滑肌細(xì)胞增殖、內(nèi)膜增生，影響內(nèi)皮細(xì)胞的黏附性，促使單核細(xì)胞、白細(xì)胞黏附于血管內(nèi)皮；抑制血管新生，促進巨噬細(xì)胞向泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)化等，從而導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能紊亂、動脈粥樣硬化、腦組織缺血缺氧等。Jia等〔6〕研究發(fā)現(xiàn)血漿ADMA水平與腦梗死病灶大小呈正相關(guān)，提示通過測定血漿ADMA水平能反映中樞神經(jīng)細(xì)胞的損傷和死亡程度，對血漿ADMA濃度的監(jiān)測，能提供判斷腦梗死病灶大小的定量信息及病情嚴(yán)重程度情況。本研究提示血漿ADMA水平能反映急性腦梗死患者病情的嚴(yán)重程度，與金艷等〔7〕結(jié)果基本相同。

目前認(rèn)為Hcy誘發(fā)腦梗死的可能機制有〔8,9〕：促進超氧化物及過氧化物的產(chǎn)生，損傷血管內(nèi)皮，誘發(fā)小動脈血管栓塞；刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖，參與動脈粥樣硬化過程；促使巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞，引起血管壁脂肪堆積，進一步加重動脈粥樣硬化形成；增加血小板聚集，激活V因子等，并可抑制抗凝，增加血栓形成；促使LDL氧化，導(dǎo)致脂質(zhì)沉積，加重血管壁硬化；還可干擾谷胱甘肽的生物學(xué)活性及影響機體的轉(zhuǎn)甲基化反應(yīng)。本研究發(fā)現(xiàn)，急性腦梗死各亞組血清Hcy水平高于對照組，并與神經(jīng)功能缺損程度呈正相關(guān)。

ADMA與Hcy在轉(zhuǎn)甲基代謝過程中存在著密切聯(lián)系，PRMT-1以S-腺苷甲硫氨酸為甲基供體發(fā)生轉(zhuǎn)甲基反應(yīng)，使蛋白質(zhì)甲基化的同時產(chǎn)生S-腺苷高半胱氨酸；S-腺苷高半胱氨酸在體內(nèi)可逆性轉(zhuǎn)化為Hcy，而含甲基精氨酸殘基的蛋白質(zhì)在蛋白水解酶作用下分解產(chǎn)生ADMA。分析兩者的代謝聯(lián)系可推測，Hcy可直接或通過氧化應(yīng)激反應(yīng)增加活性氧族物質(zhì)產(chǎn)生間接抑制DDHA活性，使ADMA分解減少；通過上調(diào)PRMT基因表達(dá)，增加ADMA生成；另外，Hcy還可誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，誘發(fā)細(xì)胞凋亡，使含甲基精氨酸殘基的蛋白質(zhì)分解增加，使ADMA釋放增多〔10〕。兩者不僅在合成及代謝途徑中存在密切聯(lián)系，而且在病理生理過程中亦存在關(guān)聯(lián)。ADMA水平升高是Hcy導(dǎo)致動脈粥樣硬化及心腦血管疾病病理過程的重要中間環(huán)節(jié)，在Hcy致病機制中起著關(guān)鍵性作用。Bǒger等〔11〕首先在動物實驗中發(fā)現(xiàn)Hcy與ADMA存在相關(guān)性。后漸有研究表明，Hcy與ADMA在腦血管病〔12〕、急性心肌梗死〔13〕等疾病中存在著密切聯(lián)系。

綜上所述，血漿ADMA及血清Hcy可作為腦梗死后腦損傷的敏感標(biāo)記物。此外，Hcy可使ADMA合成增多、降解減少，兩者水平存在正相關(guān)性；并且ADMA是Hcy導(dǎo)致動脈粥樣硬化及心腦血管疾病病理過程的關(guān)鍵中間環(huán)節(jié)。從而推測，給予服用降低Hcy濃度的維生素(如葉酸、維生素B12、維生素B6等)，有可能在降低Hcy的同時使ADMA水平降低、致病性減弱，進而為缺血性腦卒中探尋新的治療切入點。

4 參考文獻

1Sibal L,Agarwal SC,Home PD,etal.The role of asymmetric dimethylarginine(ADMA)in endothelial dysfunction and cardiovascular disease〔J〕.Curr Cardiol Rev,2010；6(2):82-90.

2中華神經(jīng)科學(xué)會中華神經(jīng)外科學(xué)會.各類腦血管疾病診斷要點〔J〕.中華神經(jīng)科雜志，1996；29(6)：379-80.

3饒明俐.中國腦血管病防治指南〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：140-1.

4Leiper J,Nandi M.The therapeutic potential of targeting endogenous inhibitors of nitric oxide synthesis〔J〕.Nat Rev Drug Discov,2011;10(4):277-91.

5Blackwell S.The biochemistry,measurement and current clinical significance of asymmetrical dimethylarginine〔J〕.Ann Clin Biochem,2010;47:17-28.

6Jia SJ,Zhou Z,Zhang BK,etal.Asymmetric dimethylarginine damages connexin43-mediated endothelial gap junction intercellular communication〔J〕.Biochem Cell Biol,2009；87(6):867-74.

7金 艷，張春和，王艷玲.脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2和非對稱二甲基精氨酸與急性缺血性腦卒中的相關(guān)性研究〔J〕.中國醫(yī)學(xué)雜志，2012；7(11)：1366-8.

8Aronow WS,Alan C,Gutstein H.Increased plasma homocysteine is an independent predictor of new atherothrombotic brain infarction in older persons〔J〕.Am Cardiol,2006；86(5):585-6.

9劉 敏，周盛年，郇 英，等.同型半胱氨酸與腦梗死及動脈狹窄支數(shù)的相關(guān)性研究〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2008；28(11)：1097-8.

10Gomez J,Sanchez-roman I,Gomez A,etal.Methionine and homocysteine modulate the rate of ROS generation of isolated mitochondria in vitro〔J〕.J Bioenerg Biomembr,2011;43(4):377-86.

11Bǒger RH,Bode-bǒger SM,Sydow K,etal.Plasma concentration of asymmetric dimethylargi-nine,an endogenous inhibitor of nitric oxide synthase,is elevated in monkeys with hyperhomocy-steinemia or hyperolesterolemia〔J〕.Arterioscler Thromb Vasc Biol,2000;20(6):1557-64.

12Mamatha SN,Nagaraja D,Philip M,et al.Asymmetric dimethylarginine as a risk marker for early-onset ischemic stroke in indian population〔J〕.Clin Chim Acta,2011;412(1-2):139-42.

13Zabczyk M,Glowacki R,Machnik A,etal.Elevated concentrations of N-homocysteinyl-lysine isopeptide in acute myocardial infarction:links with ADMA formation〔J〕.Clin Chem Lab Med,2011;49(4):729-35.