吳愛軍 王 倩 高海梅 盧澤原 高海成
(吉林省職業(yè)病防治院,吉林 長春 130061)
糖尿病(DM)可誘發(fā)多種臟器的病變發(fā)生,如腦血管、心血管、下肢血管、眼、腎臟及神經(jīng)病變等〔1〕。其治療主要通過胰島素、基因治療等。中藥復方制劑與單純對抗和補充的藥物干預不同,以中醫(yī)理論為指導的,針對患者的證和病達到整體的調節(jié)作用〔2〕。本實驗探究巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎等中藥復方制劑對鏈脲佐菌素(STZ)誘導糖尿病大鼠各臟器的保護作用。
1.1實驗動物、主要試劑和儀器 Wistar大鼠,雄性,體質量180~200 g,購自吉林大學白求恩醫(yī)學院實驗動物中心(動物合格證號:2007-003)。STZ為Sigma公司產(chǎn)品。血糖試劑盒購自北京康化公司。巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎(長沙博健生物科技有限公司)。
1.2中藥復方制劑制備 將巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎粉碎成粗粉(20~40目),用10 倍量、5 倍量的水分別煎煮60、30 min,保持微沸,冷卻后,離心分離,合并上清液,濃縮至1倍量體積。加入選定倍量的不同濃度乙醇,攪拌,靜置,待沉降完全后,離心,取上清液。濃縮液與白醋按4∶1混合和白醋的混合液與水按1∶20配比混合制中藥復方制劑。
1.3糖尿病模型復制及實驗分組與給藥 Wistar雄性大鼠15只,隨機分為正常組、模型組和中藥復方制劑組(干預)組各5只。模型組和干預組,高脂飼料喂養(yǎng)4 w后,腹腔注射小劑量STZ(30 mg/kg)1次,3 d后檢測空腹血糖≥7.8 mmol/L作為判斷模型成功的標準。干預組每天灌胃復方中藥5 ml,正常組和模型組每天給予9%生理鹽水灌胃4 w。每周測大鼠空腹血糖,測量體質量。
1.4組織取材和HE染色 大鼠乙醚吸入麻醉,頸部脫臼處死,迅速取出心臟、肝臟和腎臟,固定于4%的甲醛中,待HE染色使用。切片烤片1 h,二甲苯脫蠟10 min×3次,100%、95%的乙醇中分別5 min×2次,流水中2 min,蘇木素染色5 min,使用1%的鹽酸乙醇溶液分化5~10 s,自來水中返藍25 min,0.5%的伊紅(水溶性)染色2 min,95%、100%的乙醇脫水5 min×2次,自然晾干,二甲苯透明5 min×2次,吸水紙吸干液體,中性樹膠封片,顯微鏡下觀察染色情況。
1.5統(tǒng)計方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗。
2.1各組體重變化 注射STZ 1 w后,模型組體重較正常組明顯減輕(P<0.05),干預組體重較模型組顯著增高(P<0.05),見表1。
表1 各組體重比較±s,n=5,g)
2.2各組血糖檢測結果 正常組血糖值為4.9~6.1 mmol/L,模型組血糖較正常組升高明顯(P<0.05);干預組血糖較模型組有所降低(P<0.05),見表2。
表2 各組血糖比較±s,n=5,mmol/L)
2.3各組心臟組織形態(tài)學變化 正常組心肌組織橫紋較清晰,細胞排列較整齊,細胞核染色明顯且大小均勻;模型組心肌細胞排列紊亂,細胞間隙增大,有少量細胞腫脹;干預組心肌組織損傷程度較模型組逐漸減輕,見圖1。
2.4各組肝臟組織形態(tài)學變化 正常組肝臟細胞形態(tài)正常,細胞排列較整齊;模型組肝臟組織可見少量炎性細胞浸潤,肝臟出現(xiàn)一定程度的損傷;干預組肝臟較模型組損傷程度逐漸減輕,見圖1。
2.5各組腎臟組織形態(tài)學變化 正常組腎臟細胞排列較整齊;模型組腎臟組織,腎小球體積增大,且腎小管有一定程度的擴張,腎臟出現(xiàn)損傷;干預組腎臟的損傷程度較模型組逐漸減輕,見圖1。
圖1 各組心臟、肝臟、腎臟的病理學改變
中藥治療糖尿病的機制主要包括:①改善胰島素抵抗;②保護和修復胰島β細胞;③調劑糖代謝等〔3~5〕。研究表明:巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎等中藥復方制劑中,巴天酸模的根提取物具有抗氧化和清除自由基的能力,并且隨著濃度和時間的變化而增加,可一定程度降低2型糖尿病大鼠的血糖和糖化血紅蛋白水平,保護胰島細胞〔6〕。藥理研究顯示,三七具有多種藥理活性,對血液、心血管、神經(jīng)、免疫、物質代謝系統(tǒng)均具有較好的調節(jié)作用〔7〕,三七皂苷能夠提高KK-Ay鼠對胰島素的敏感性和降低瘦素的抵抗〔8〕。紅花的藥理作用廣泛且毒副作用小,對心臟、肝臟、免疫系統(tǒng)等均具有保護作用〔9〕。生姜具有多種藥理活性,對1和2型糖尿病均具有治療作用,給予糖尿病大鼠生姜汁可以明顯降低空腹血糖和升高胰島素水平從而達到抗糖尿病的作用〔10〕。同時生姜還具有其他藥理作用,如抗氧化、降低膽固醇、抗炎、抗腫瘤等〔11〕。冰片是一味常用的佐藥,其主要藥理活性是調節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng),保護心腦等器官,抗炎抗病毒等〔12〕。菊花的主要藥理活性是抗炎、免疫調節(jié)、抗腫瘤、保肝和保護心血管等〔13〕。而川芎的藥理活性是保護心血管心痛、抗血栓形成、解痙、鎮(zhèn)痛等,用于治療糖尿病時,其可一定程度控制糖尿病大鼠的血糖,保護糖尿病大鼠的腎臟〔14〕。本實驗結果顯示,巴天酸模、三七、紅花、生姜、冰片、菊花、川芎所組成的中藥復方制劑具有抗炎抗氧化、提高胰腺的功能以及調節(jié)免疫的作用。
4 參考文獻
1Blake R,Trounce IA.Mitochondrial dysfunction and complications associated with diabetes 〔J〕.Fron Mitoch Res,2014;1840(4):1404-12.
2Ziegler D, Reljanovic M, Mehnert H,etal.Alpha-lipoic acid in the treatment of diabetic polyneuropathy in Germany: current evidence from clinical trials〔J〕. Exp Clin Endocrinol Diabetes,1999;107(7):421-30.
3方 飛,吳新榮,鄭鵬成.中藥復方制劑降血糖機制的研究進展〔J〕.中藥材,2011;34(6):996-9.
4Deng YX,Zhang XJ,Shi QZ,etal.Anti-hyperglycemic effects and mechanism of traditional Chinese medicine Huanglian Wan in streptozocin-induced diabetic rats〔J〕.Ethnopharmacology,2012;144(2):425-32.
5Liu SZ,Deng YX,Chen B,etal.Antihyperglycemic effect of the traditional Chinese scutellaria-coptis herb couple and its main components in streptozotocin-induced diabetic rats〔J〕.Ethnopharmacology,2013;145(2):490-8.
6Degirmenci I,Ustuner MC,Kalender Y,etal.The effects of acarbose and Rumex patientia L.on ultrastructural and biochemical changes of pancreatic B cells in streptozotocin-induced diabetic rats〔J〕.Ethnopharmacology,2005;97(3):555-9.
7唐 嬌,黃俊明,張印紅,等.三七的藥理活性及毒理學研究進展〔J〕.毒理學雜志,2012;26(3):228-31.
8鐘振東,王春梅,汪 為,等.三七總皂苷的抗糖尿病機理及其降血糖成分研究〔J〕.四川大學學報,2014;45(2):235-9.
9Zhou X,Tang L,Xu Y,etal.Towards a better understanding of medicinal uses of Carthamus tinctorius L.in traditional Chinese medicine:A phytochemical and pharmacological review 〔J〕.Ethnopharmacology,2014;151(1):27-43.
10Darvishzadeh-Mahani F, Esmaeili-Mahani S, Komeili G,etal. Ginger (Zingiber officinale Roscoe) prevents the development of morphine analgesic tolerance and physical dependence in rats〔J〕. J Ethnopharmacol, 2012;141(3):901-7.
11韓燕全,洪 燕,姜 蕾,等.姜的炮制、質控和藥理研究進展〔J〕.中國現(xiàn)代中藥,2011;13(4):48-51.
12劉磊剛.冰片的藥理研究及與臨床應用〔J〕.中國藥物經(jīng)濟學,2014;26(2):26-7.
13陸 華.淺析不同菊花的藥理作用及臨床應用〔J〕.中國現(xiàn)代藥物應用,2013;7(5):129-30.
14Yang QH,Liang Y,Xu Q,etal.Protective effect of tetramethylpyrazine isolated from Ligusticum chuanxiong on nephropathy in rats with streptozotocin-induced diabetes 〔J〕.Phytomedicine,2011;18(18):1148-52.