程 鵬

(南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河南 南陽 473000)

胃癌死亡率居高不下的主要原因之一為局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移〔1,2〕。早期胃癌一旦確診并進(jìn)行根治術(shù)，5年內(nèi)的生存率可達(dá)90%,而進(jìn)展期胃癌5年的生存率僅為30%～40%〔3〕。目前，在針對(duì)胃癌的治療方面，仍然是以手術(shù)治療為主，輔以化學(xué)治療以及放射治療，而缺乏對(duì)胃癌早期的發(fā)現(xiàn)和預(yù)測(cè)指標(biāo)是導(dǎo)致治療失敗的主要原因。目前普遍認(rèn)為CEA、CA19-9、CA125在介導(dǎo)胃癌細(xì)胞從原發(fā)病灶脫落并黏附到鄰近組織中發(fā)揮重要的作用，并且與腫瘤轉(zhuǎn)移侵襲的過程密切相關(guān)。本研究旨在評(píng)價(jià)聯(lián)合應(yīng)用CEA、CA19-9、CA125在胃癌診斷中的作用以及臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2011年2月至2013年2月于本院診治的胃癌患者100例，所有患者均經(jīng)胃鏡檢查以及病理切片檢查證實(shí)，并且無心、肝、腎等重要臟器的功能障礙。男66例，女34例，年齡42～78〔平均(63.6)〕歲，其中早期胃癌7例，進(jìn)展期胃癌93例；術(shù)前腫瘤分期Ⅱ期20例，Ⅲa期38例，Ⅲb期19例，Ⅳ期23例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移67例，無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移33例；淋巴轉(zhuǎn)移程度N0 32例，N1 20例，N2 27例，N3 21例；浸潤(rùn)深度T1 12例，T2 16例，T3 42例，T4 30例；同時(shí)選取80例胃部良性病變患者以及80例正常健康人作為對(duì)照組。胃部良性病變患者中男45例，女35例，年齡35～49(平均42.6)歲，其中結(jié)腸息肉29例，慢性萎縮性胃炎21例，潰瘍性結(jié)腸炎30例。正常健康人中男40例，女40例，年齡31～56(平均41.4)歲。

1.2樣本采集 患者入院后第二天清晨采空腹靜脈血3 ml，放置20 min，3 000 r/min離心5 min，取上層血清，-70℃保存。

1.3血清中CEA、CA19-9、CA125的測(cè)定以及陽性標(biāo)準(zhǔn) CEA的測(cè)定采用RIA法；CA19-9、CA125的測(cè)定用ELISA法。嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。陽性標(biāo)準(zhǔn)為CEA≥15 ng/ml，CA19-9≥37 U/ml，CA125≥35 U/ml。

1.4免疫組化法檢測(cè)CEA、CA19-9、CA125以及陽性標(biāo)準(zhǔn) 取胃癌組織或者正常胃組織，于10%的多聚甲醛中固定、脫水、透明后用石蠟包埋。連續(xù)切片后脫蠟，放在二甲苯Ⅰ中浸泡10 min，二甲苯Ⅱ中繼續(xù)浸泡10 min，無水乙醇中5 min，95%的乙醇中浸泡5 min，75%的乙醇中浸泡5 min后抗原修復(fù)，封閉后加一抗和二抗，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色后脫水、透明并封片。細(xì)胞中出現(xiàn)棕黃色顆粒或者棕褐色顆粒視為陽性，每個(gè)組5張切片，每張切片記錄10個(gè)高倍視野，記錄陽性細(xì)胞比例。

1.5敏感度以及特異度的計(jì)算 a表示病理診斷以及標(biāo)志物檢測(cè)均為陽性的患者；b為病理診斷顯示陰性而標(biāo)志物檢測(cè)為陽性的患者；c表示病理診斷顯示陽性而標(biāo)志物檢測(cè)為陰性的患者；d表示病理診斷以及標(biāo)志物檢測(cè)均為陰性的患者。敏感度=a/a+c，特異度=d/b+d。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS11.5軟件，計(jì)量資料用t檢驗(yàn)，相關(guān)性研究采用Spearman相關(guān)分析，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)。對(duì)胃癌轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值用ROC曲線評(píng)價(jià)。

2 結(jié) 果

2.1三組患者血清中CEA、CA19-9、CA125的含量 三項(xiàng)指標(biāo)在胃癌組患者血清中的含量顯著高于良性病變組以及正常組(P<0.05)。見表1。

表1 三組患者血清中CEA、CA19-9、CA125的含量±s)

2.2三組患者胃組織CEA、CA19-9、CA125的免疫組化切片 CEA主要存在于細(xì)胞的胞膜上和胞質(zhì)中，陽性呈棕黃色或棕褐色樣顆粒，見圖1。免疫組化分析，三者在胃癌組表達(dá)最高，顯著高于胃部良性病變組以及正常組(P<0.05)。見表2。

2.3聯(lián)合檢測(cè)三者對(duì)胃癌診斷的敏感性和特異度 CEA、CA19-9、CA125的敏感度和特異度存在著差異，敏感度分別為80%、77%、79%，特異度分別為87.42%、86.31%、87.65%；三者聯(lián)合檢測(cè)，敏感度則可提高至83%，特異度為82.42%(P<0.05)。

圖1 各組胃組織CEA、CA19-9、CA125蛋白表達(dá)

2.4胃癌患者血清中CEA、CA19-9、CA125的含量與各臨床參數(shù)的關(guān)系 血清中CEA、CA19-9以及CA125的濃度與胃癌的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)。見表3。

2.5胃癌患者血清中CEA、CA19-9、CA125的含量對(duì)胃癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值 以正常人CEA、CA19-9、CA125的值作為對(duì)照組進(jìn)行ROC曲線分析，發(fā)現(xiàn)血清CEA濃度對(duì)胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率較高較CA19-9、CA125更高(P<0.05)。

表2 三組患者CEA、CA19-9、CA125的陽性率(n)

表3 胃癌患者血清中CEA、CA19-9、CA125的含量與各臨床參數(shù)的關(guān)系〔n(%)〕

3 討 論

隨著免疫學(xué)和分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，腫瘤標(biāo)志物逐漸在腫瘤的普查、早期診斷、判斷疾病的預(yù)后和轉(zhuǎn)歸等方面越來越重要〔4〕。癌胚抗原(CEA)，較早被應(yīng)用于臨床〔5〕，不僅在結(jié)腸癌中表達(dá)較高，在多種消化系統(tǒng)腫瘤中均有較高的表達(dá)水平。CA19-9是一種腫瘤細(xì)胞分泌的抗原，對(duì)多種腫瘤有特異性，有研究發(fā)現(xiàn)CA19-9在消化道的惡性腫瘤如胃腸癌、胰腺癌等患者的血清中含量顯著增高，是消化道腫瘤檢測(cè)的良好指標(biāo)〔6〕。CA125在卵巢癌以及其他的生殖系統(tǒng)腫瘤的診斷中應(yīng)用比較廣泛，但是越來越多的研究表明，其并不是卵巢癌以及其他生殖系統(tǒng)腫瘤的特異性指標(biāo)〔7〕。

胃癌是一種在我國(guó)常見的腫瘤，其在惡性腫瘤中死亡率最高，胃癌的發(fā)生機(jī)制比較復(fù)雜。本文研究發(fā)現(xiàn)，CEA、CA19-9、CA125在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中可能發(fā)生了重要的變化。但是血清中這三者的升高只能說明機(jī)體的某個(gè)部位可能發(fā)生了癌變，并無法明確到具體的臟器和部位。進(jìn)一步對(duì)胃組織中這三者的含量進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)結(jié)果和血清中的結(jié)果一致，提示這三者可能成為胃癌的有效腫瘤標(biāo)志之一。而理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)該具備敏感性和特異性均較強(qiáng)的特征，檢測(cè)了CEA、CA19-9、CA125三項(xiàng)指標(biāo)的單獨(dú)檢測(cè)以及聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和特異性，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)三項(xiàng)指標(biāo)可以有效地提高敏感性，有利于提高胃癌的檢出率。為了進(jìn)一步的了解這三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)預(yù)測(cè)以及診斷胃癌的作用，對(duì)三項(xiàng)指標(biāo)與胃癌的相關(guān)臨床參數(shù)做了相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)這三項(xiàng)指標(biāo)的升高與胃癌的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，可能可以作為預(yù)測(cè)預(yù)后的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。最后通過ROC曲線分析三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確性，發(fā)現(xiàn)在這三者當(dāng)中，CEA的準(zhǔn)確率最高，與文獻(xiàn)報(bào)道一致〔8，9〕，提示在判斷胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，可以選用CEA作為預(yù)測(cè)指標(biāo)，而如果要檢測(cè)胃癌，采用CEA、CA19-9、CA125三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)檢出率更高。

綜上所述，在胃癌患者的血清以及癌組織當(dāng)中檢測(cè)CEA、CA19-9、CA125對(duì)診斷胃癌以及判斷胃癌的轉(zhuǎn)移和預(yù)后有著重要的意義，聯(lián)合檢測(cè)CEA、CA19-9、CA125對(duì)胃癌的早期診斷具有很高的應(yīng)用價(jià)值。

4 參考文獻(xiàn)

1熊元?jiǎng)?劉金彥.36例青年人胃癌治療體會(huì)〔J〕.遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2013;34(1):70-1.

2Song IC,Liang ZL,Lee JC,etal.Expression of stromal cell-derived factor-1alpha is an independent risk factor for lymph node metastasis in early gastric cancer〔J〕.Oncol Lett,2011;2(6):1197-202.

3Chen C,Yang JM,Hu TT,etal.Prognostic role of human epidermal growth factor receptor in gastric cancer:a systematic review and meta-analysis〔J〕.Arch Med Res,2013;44(5):380-9.

4Shitrit D,Zingerman B,Shitrit AB,etal.Diagnostic value of CYFRA 21-1, CEA, CA 19-9, CA 15-3,and CA 125 assays in pleural effusions: analysis of 116 cases and review of the literature〔J〕.Oncologist,2005;10(7):501-7.

5Buraggi GL,Gasparini M,Seregni E.Immunoscintigraphy of colorectal carcinoma with an anti-CEA monoclonal antibody:a critical review〔J〕.Int J Rad Appl Instrum B,1991;18(1):45-50.

6Zhou G,Niu L,Chiu D,etal.Changes in the expression of serum markers CA242, CA199, CA125,CEA,TNF-alpha and TSGF after cryosurgery in pancreatic cancer patients〔J〕.Biotechnol Lett,2012;34(7):1235-41.

7Colloca G,Venturino A, Addamo G,etal.CA125-related measures of tumor kinetics and outcome of patients with recurrent ovarian cancer receiving chemotherapy:a retrospective evaluation〔J〕.Jpn J Clin Oncol,2013;43(12):1203-9.

8王思萌,高柳村,帖 君,等.Cetuximab抑制胃癌SGC7901/ADR細(xì)胞的增殖并增加其化療敏感性〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2013;13(12):2253-2256,2264.

9Satelli A,Mitra A,Cutrera JJ,etal.Universal marker and detection tool for human sarcoma circulating tumor cells〔J〕.Cancer Res,2014;74(6):1645-50.