仕 麗 李曉紅 王 檀 于秀華 張麗秀

(長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 長春 130021)

支氣管哮喘(簡稱哮喘)的發(fā)病機(jī)制較復(fù)雜，細(xì)胞因子與免疫反應(yīng)和炎性細(xì)胞浸潤等在哮喘的發(fā)生和進(jìn)展中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。目前已發(fā)現(xiàn)多種可能的途徑抑制這些特殊的細(xì)胞因子,如抗白細(xì)胞介素(IL)-4、抗IL-13、抗IL-5等〔1〕。新近的臨床研究表明,對(duì)嚴(yán)重哮喘,非肽類的IL-5受體拮抗劑將成為治療哮喘的一個(gè)新的策略〔2〕。本研究觀察定喘止哮顆粒對(duì)哮喘大鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-5含量的影響，研究其對(duì)氣道炎癥的作用。

1 材料

1.1主要試劑 卵清蛋白，批號(hào)：A5503-25G，Sigma公司產(chǎn)品。IL-4 ELISA試劑盒,規(guī)格：96T/盒，批號(hào)：201003026；IL-5 ELISA試劑盒,規(guī)格：96T/盒，批號(hào)：201002055；γ-干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒,規(guī)格：96T/盒，批號(hào)：201003058，均為美國RB公司產(chǎn)品。

1.2動(dòng)物 科研試驗(yàn)用豚鼠，雌雄各半，體重250～350 g。動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(吉)-2012-0002，購于長春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司。

1.3藥品 定喘止哮顆粒，批號(hào)：20121008，長春中醫(yī)藥大學(xué)提供；氨茶堿片，規(guī)格：0.1 g/片，批號(hào)：B120703，山西云鵬制藥有限公司產(chǎn)品；甲醛溶液，規(guī)格：分析純，500 ml/瓶，批號(hào)：20090419，沈陽經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)試劑廠產(chǎn)品。

1.4儀器 生理信號(hào)采集系統(tǒng)，型號(hào)：Powerlab/8sp，澳大利亞埃德公司產(chǎn)品；賀利氏(Heraeus)臺(tái)式離心機(jī)Stratos，型號(hào)：Biofuge Stratos，德國賀利氏公司產(chǎn)品；電子天平，型號(hào)：BSA224S，北京賽多利斯公司產(chǎn)品；酶標(biāo)儀，型號(hào)：BIO680，美國伯樂公司產(chǎn)品；醫(yī)用超聲霧化吸入器，上海醫(yī)療器械廠。

1.5方法 豚鼠60只，雌雄兼用，隨機(jī)分為6組，每組10只。除對(duì)照組動(dòng)物外，其他組動(dòng)物用10%卵蛋白肌肉注射致敏，4 w后，將豚鼠置于密閉有機(jī)玻璃箱中，用1%卵蛋白超聲霧化吸入2 min進(jìn)行攻擊。陽性對(duì)照藥組予氨茶堿0.025 g/kg；定喘止哮顆粒組：4、2、1 g/kg三個(gè)劑量。均于致敏同時(shí)灌胃給藥，空白對(duì)照組給予同體積的蒸餾水。各組分別于給藥4 w，哮喘激發(fā)后，股動(dòng)脈取血，處死，檢測(cè)血清IFN-γ、IL-4、IL-5含量。

2 結(jié) 果

哮喘模型組豚鼠血清中IL-4、IL-5濃度明顯增高，而IFN-γ濃度明顯降低。定喘止哮顆粒4、2 g/kg兩個(gè)劑量組均能明顯抑制豚鼠血清中增高的IL-4、IL-5含量；定喘止哮顆粒4 g/kg劑量組能明顯升高豚鼠血清中減低的INF-γ含量。見表1。

表1 定喘止哮顆粒對(duì)豚鼠血清IFN-γ、IL-4和IL-5含量的影響±s，n=10，pg/ml)

3 討 論

支氣管哮喘屬于中醫(yī)學(xué)“哮證”、“喘證”范疇。哮喘發(fā)病率增高，患者中老年居多。中、老年患者其哮病發(fā)作時(shí)外源性誘因已淡化，但肝陽偏亢、內(nèi)風(fēng)上逆沖肺貫穿哮病發(fā)作期的始終〔3〕。發(fā)作時(shí)常見癥狀：喘息，喉中哮鳴有聲，伴咳嗽，咯痰，胸膈滿悶，情緒不寧，心煩易怒，腰膝酸軟，面色潮紅，舌紅苔黃膩，脈弦〔4〕。故認(rèn)為本病中老年患者發(fā)病基礎(chǔ)為：腎精不足，水不涵木，肝陽偏亢。針對(duì)此類患者急性發(fā)作期治療以熄風(fēng)定喘止哮為法，制定喘止哮顆粒臨床應(yīng)用效果較好，且不易復(fù)發(fā)。

哮喘的發(fā)病基礎(chǔ)是Th1/Th2失衡,Th2細(xì)胞活化亢進(jìn)〔5,6〕。Th1細(xì)胞主要分泌白細(xì)胞IL-2、IFN-γ，致腹腔巨噬細(xì)胞活化和遲發(fā)超敏反應(yīng)。Th2細(xì)胞主要分泌IL-4、IL-5等，誘發(fā)肥大細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)生長分化以及包括IgE在內(nèi)的免疫球蛋白生成。其中IFN-γ、IL-4分別是Th1和Th2細(xì)胞的特征性細(xì)胞因子，Th1和Th2細(xì)胞因子可促進(jìn)本亞群和抑制另一亞群的生長分化。哮喘患者體內(nèi)IL-4過度產(chǎn)生，IFN-γ產(chǎn)生不足，使IFN-γ/IL-4失衡，是哮喘發(fā)病的關(guān)鍵因素之一。IFN-γ、IL-4在體內(nèi)對(duì)哮喘的發(fā)病發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，定喘止哮顆粒可以使INF-γ水平明顯升高，IL-4、IL-5水平明顯降低。定喘止哮顆?？赡芡ㄟ^調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞之間功能平衡，減輕EOS對(duì)氣道的浸潤，降低氣道炎癥，從而達(dá)到治療哮喘的作用。

4 參考文獻(xiàn)

1Donohue JF.Safety and efficacy of Beta agonists〔J〕.Respir Care,2008；53(5):618-62.

2Humbert M,Garcia G,Chanez P.Targeted immunologic therapies for severe asthma〔J〕.Press Med,2008；37(1 Pt2): 173.

3章曉初，姚婉貞，何其華.哮喘豚鼠氣道重塑與氣道反應(yīng)性的圖像分析〔J〕.中華結(jié)核與呼吸雜志，2001；24(2)：87-9.

4柳 春，李 智，呂國軍，等.濱篙內(nèi)醋對(duì)哮喘豚鼠IL-4和IFN-γ含量的影響〔J〕.中國藥理學(xué)通報(bào)，2003；19(6)：653-5.

5Wild JS,Sigounas A,Sur N.IFN-gamma-inducing factor(IL-8)increases allergic sensitization,serum IgE,Th2 cytokines,and airwayeosinophilia in a mouse model of allergic asthma〔J〕.J Immunol,2000；164(5)：2701-10.

6Cohn L,Homer RJ,Niu N,etal.T Helper I cells and interferon gamma regulate allergic airway inflammation and mucus production〔J〕.J Exp Med,1999；190(9)：1309-18.