趙 翀 劉元元 竇裁鳳

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院二部消化內(nèi)科，吉林 長春 130031)

目前，我國乙肝病毒(HBV)攜帶率約為7.18%，據(jù)此推算，全國仍約有9 000多萬例HBsAg陽性者，其中約2 000 萬為慢性乙型肝炎(CHB)患者〔1〕，而慢性HBV感染與肝功能衰竭、肝硬化及原發(fā)性肝癌(HCC)高度相關(guān)〔2〕。前S1(PreS1)蛋白是一種HBV病毒的衣殼蛋白，在病毒感染、裝配、復(fù)制和刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)等方面有十分重要意義。近年來隨著HBV PreS1抗原(Pre-S1Ag)檢測試劑盒的推廣應(yīng)用，對其在CHB臨床診斷中的意義進(jìn)行了很多探討，但結(jié)論不一〔3〕。本文對220份CHB相關(guān)疾病的患者血清標(biāo)本進(jìn)行了Pre-S1Ag、e抗原(HBeAs)、HBV-DNA的檢測，旨在探討Pre-S1Ag抗原在HBV復(fù)制中的臨床診斷意義。

1 材料與方法

1.1研究對象 選擇2009年4月至2013年10月在本院就診的CHB患者220例，其中男179例，女41例，年齡25～76歲，平均50歲。包括CHB患者123例，肝硬化患者93例，肝癌患者4例，其中Pre-S1Ag陽性184例，陰性36例。所有患者均符合《2010年版慢性乙型肝炎防治指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)〔4〕。抽取患者清晨空腹靜脈血5 ml，待血液自然凝固后及時分離血清待檢。

1.2檢測方法及試劑 HBV Pre-S1Ag檢測試劑由上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法檢測，HBeAg濃度檢測采用上海科華生物工程股份有限公司生產(chǎn)的診斷試劑盒。HBV-DNA檢測試劑采用凱杰生物工程有限公司(深圳)提供的定量檢測試劑盒。

1.3儀器 美國雅培I 1000SR型全自動免疫分析儀，上海Loche LC 480熒光擴(kuò)增儀。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS11.0軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié) 果

2.1乙肝患者中Pre-S1Ag陽性率與HBV-DNA檢測情況 Pre-S1Ag陽性184例，陰性36例；Pre-S1Ag、HBV-DNA均陽性133例，均陰性30例，Pre-S1Ag陽性、HBV-DNA陰性35例，Pre-S1Ag陰性、HBV-DNA陽性22例。

2.2四組Pre-S1Ag對比 Pre-S1Ag陽性率與HBV-DNA檢測有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.000 1)，HBeAg檢測與HBV-DNA檢測有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.000 1)，但Pre-S1Ag陽性率與HBeAg檢測無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.508 1)。Pre-S1Ag陽性率在HBV-DNA陽性、HBeAg陽性組與HBV-DNA陰性、HBeAg陽性組有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.000 1)；在HBV-DNA陽性、HBeAg陽性組與HBV-DNA陰性、HBeAg陰性組有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.000 5)；在HBV-DNA陰性、HBeAg陽性組與HBV-DNA陽性、HBeAg陰性組有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.000 5)；在HBV-DNA陽性、HBeAg陰性組與HBV-DNA陰性、HBeAg陰性組無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.108 2)。見圖1。

圖1 Pre-S1Ag在四組中的對比

3 討 論

乙型肝炎是危害人類健康的嚴(yán)重傳染性疾病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，全球約20億人曾感染過HBV，其中3.5億人為慢性HBV感染者，每年約100萬人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和HCC〔5〕。正確判斷HBV在人體內(nèi)復(fù)制的情況，是有效診斷和治療乙型肝炎的前提和依據(jù)。

本研究顯示，Pre-S1Ag與HBV-DNA有較高的一致性，Pre-S1Ag且不受HBeAg定量的影響，也就是說Pre-S1Ag可能會成為新型HBV檢測的標(biāo)志物之一，這與以往一致〔6～9〕。過去臨床上普遍認(rèn)為，HBeAg陰性的患者體內(nèi)不存在高載量HBV復(fù)制，但通過本文的研究結(jié)果顯示并非如此，在HBeAg陰性組的患者中，前S1抗原仍有一定的陽性檢出率，筆者考慮這可能與病毒的基因表達(dá)及變異、試劑的干擾都存在一定的相關(guān)性，由此看來，單獨(dú)檢測HBeAg是有一定缺陷的〔10〕。本文中提到的HBeAg定量檢測采用的是國內(nèi)試劑，目前國內(nèi)試劑一般均為半定量，而不是與HBsAg一樣是全定量，可能檢驗(yàn)結(jié)果有一定誤差，故Pre-S1Ag的檢測應(yīng)得到廣大同行的重視和認(rèn)可。

本研究表明在HBV-DNA陽性組中Pre-S1Ag的陽性率明顯高于HBV-DNA陰性組，Pre-S1Ag抗原與HBV-DNA有較高的符合率，這與以往報道相似〔11,12〕。中國約50%的CHB患者發(fā)生C 區(qū)基因突變導(dǎo)致HBeAg不能合成或者合成減少，這不能表明HBV復(fù)制終止或病毒消失，而是因?yàn)镠BV逃避了宿主的免疫反應(yīng)，最終導(dǎo)致HBeAg 陰性，從而影響HBV 復(fù)制終止的誤判。因前S1抗原的第21～47位氨基酸是肝細(xì)胞膜受體，HBV可通過這一受體黏附在肝細(xì)胞膜上進(jìn)入肝細(xì)胞內(nèi)，即使是病毒變異，只要這一區(qū)完好，就有一定傳染性〔13〕，可有效避免由于HBeAg 基因變異而導(dǎo)致臨床上的誤判。Pre-S1Ag作為判斷HBV復(fù)制的指標(biāo)，其持續(xù)存在表明有病毒復(fù)制和病毒顆粒的存在〔14～17〕，故即使是HBeAg陰性、HBV-DNA均陰性，如Pre-S1Ag持續(xù)表達(dá),提示病情向慢性發(fā)展或有肝功能損害，應(yīng)密切監(jiān)測HBV-DNA的變化。

綜上，Pre-S1Ag和HBV-DNA均能很好地反映病毒在體內(nèi)的感染和復(fù)制情況，但因HBV-DNA定量檢測已很成熟，Pre-S1Ag檢測目前在臨床應(yīng)用只停留在簡單的定性上，且兩者的檢測成分表達(dá)的意義不完全一致，因此Pre-S1Ag不能等同或替代HBV-DNA的檢測，在臨床工作中應(yīng)充分聯(lián)系兩者的獨(dú)立性和互補(bǔ)性來做出診斷。

本文研究顯示，Pre-S1Ag、HBeAg分別與HBV-DNA檢測有較好的符合率，且提示如三者同時檢測可對HBV復(fù)制和傳染性等情況進(jìn)行綜合分析，從而指導(dǎo)臨床治療方案和療效的觀察。因HBV-DNA檢測成本高，過程繁瑣，故可行乙肝標(biāo)志物聯(lián)合Pre-S1Ag檢測進(jìn)行篩查，這對于醫(yī)療條件未完善的基層醫(yī)院有較高的臨床指導(dǎo)意義。目前Pre-S1Ag的檢測的意義仍沒有受到更多人群的重視，望有更多的同仁加入到臨床Pre-S1Ag檢測意義的觀察和研究工作當(dāng)中。

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