王 軍 張志勇 馮俊偉 張寶良 李雪梅 張 林

(唐山市工人醫(yī)院,河北 唐山 063000)

星形膠質(zhì)細(xì)胞上調(diào)基因1(AEG-1)被認(rèn)為與HIV引起的癡呆相關(guān)〔1〕，近年發(fā)現(xiàn)其與腫瘤具有相關(guān)性〔2，3〕?；|(zhì)金屬蛋白酶-7(MMP-7)具有廣泛的底物特異性和強(qiáng)大的基質(zhì)降解功能〔4〕。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)結(jié)直腸癌組織中AEG-1和MMP-7的表達(dá)情況，分析其與臨床病理特征的關(guān)系，旨在為結(jié)直腸癌的機(jī)制研究提供理論支持。

1 材料和方法

1.1臨床材料 收集唐山市工人醫(yī)院2004年1月至2005年12月行結(jié)直腸癌根治術(shù)后的蠟塊組織共124例作為觀察組，男69例，女55例，年齡56～69〔平均(61.4±8.4)〕歲；其中無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移57例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移67例?；颊咝g(shù)前均未進(jìn)行放療和化療。選取對(duì)應(yīng)的切緣結(jié)腸黏膜組織70例作為對(duì)照組，男36例，女34例，年齡58～68〔平均(60.5±6.5)〕歲。兩組一般臨床資料比較無(wú)明顯差別。

1.2AEG-1和MMP-7蛋白表達(dá)的檢測(cè) AEG-1抗體購(gòu)自美國(guó)Proteintech公司，MMP-7抗體購(gòu)自武漢博士德生物技術(shù)有限公司。免疫組化采用SP法。

1.3結(jié)果判定方法 AEG-1和MMP-7蛋白陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞質(zhì)，出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，以陽(yáng)性率≥10%為陽(yáng)性(+)，<10%為陰性(-)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件，定性資料應(yīng)用χ2檢驗(yàn)，生存分析采用Logrand檢驗(yàn)，采用線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1AEG-1和MMP-7在兩組中陽(yáng)性率比較 觀察組中AEG-1和MMP-7表達(dá)的陽(yáng)性率〔90例(72.58%)、74例(59.68%)〕明顯高于對(duì)照組〔10例(14.29%)、21例(30.00%)〕(χ2=60.877 3、15.769 4，均P<0.000 1)。

2.2AEG-1和MMP-7的表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系 觀察組中AEG-1和MMP-7的表達(dá)與腫瘤體積、Dukes分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤(rùn)深度密切相關(guān)。AEG-1的表達(dá)與Ki67表達(dá)密切相關(guān)，見(jiàn)表1。

表1 AEG-1和MMP-7的表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

2.3結(jié)直腸癌中AEG-1和MMP-7表達(dá)的相關(guān)性分析 經(jīng)相關(guān)性分析，結(jié)直腸癌中AEG-1和MMP-7的表達(dá)呈正相關(guān)性(r=0.45，P=0.031 4)。

2.4觀察組中AEG-1和MMP-7的表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系 隨訪時(shí)間為8～60個(gè)月，平均36.2個(gè)月。結(jié)直腸癌中AEG-1和MMP-7的表達(dá)與患者預(yù)后相關(guān)(P<0.05)，即AEG-1和MMP-7高表達(dá)患者的預(yù)后差。 見(jiàn)圖1。

圖1 AEG-1、MMP-7蛋白表達(dá)與結(jié)直腸癌預(yù)后的關(guān)系

3 討 論

AEG-1為促進(jìn)HIV相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)癡呆病變的重要蛋白〔5〕，當(dāng)HIV感染和病毒增殖后，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中AEG-1表達(dá)上調(diào)，能加速感染的進(jìn)展〔6〕；AEG-1可促進(jìn)腫瘤血管生成、細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞遷移〔7〕。近年發(fā)現(xiàn)AEG-1在腫瘤侵襲性生長(zhǎng)中可使上皮-間質(zhì)發(fā)生轉(zhuǎn)化，即在腫瘤邊緣出現(xiàn)腫瘤上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞的同質(zhì)化〔8〕。轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤患者死亡的重要因素，而MMP-7可使細(xì)胞外基質(zhì)降解，為腫瘤轉(zhuǎn)移提供有效的通道。并且MMP-7還引起腫瘤脈管新生，為腫瘤生長(zhǎng)和血道轉(zhuǎn)移提供了重要的支持。目前，AEG-1和MMP-7在結(jié)直腸癌中表達(dá)的研究尚未見(jiàn)到報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示腫瘤發(fā)生過(guò)程中AEG-1和MMP-7活化對(duì)腫瘤起促進(jìn)作用。AEG-1既可以誘導(dǎo)NF-κB通路發(fā)揮促癌作用，也可以激活PI3K/AKT和Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路引起腫瘤生物學(xué)行為變化〔3，9〕。因此，AEG1高表達(dá)可引起腫瘤進(jìn)展和惡性轉(zhuǎn)化。而通過(guò)microRNA抑制AEG1表達(dá)可有效抑制腫瘤進(jìn)展也證實(shí)了此結(jié)論〔10〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果還提示AEG-1和MMP-7參與腫瘤的生長(zhǎng)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)過(guò)程，而且二者具有協(xié)同作用。AEG-1的多元性作用機(jī)制使其在促進(jìn)腫瘤進(jìn)展過(guò)程中可能使MMP-7大量分泌，引起細(xì)胞外基質(zhì)降解，使腫瘤細(xì)胞易于穿過(guò)基底膜向周?chē)ド⒑娃D(zhuǎn)移。而生存分析也直接證實(shí)了聯(lián)合檢測(cè)AEG-1和MMP-7的表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌預(yù)后的判斷作用，即術(shù)后聯(lián)合檢測(cè)AEG-1和MMP-7高表達(dá)時(shí)提示腫瘤預(yù)后不良。由于以上因素也與患者術(shù)后生存、身心素質(zhì)、免疫狀態(tài)、術(shù)式的選擇及并發(fā)癥相關(guān)，因此檢測(cè)AEG-1和MMP-7的表達(dá)也可以為臨床治療提供重要指導(dǎo)。本實(shí)驗(yàn)觀察到AEG-1對(duì)Ki-67標(biāo)記的增殖指數(shù)有明顯影響，提示AEG-1促癌作用可通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞增殖實(shí)現(xiàn)。但是本實(shí)驗(yàn)并未觀察到MMP-7對(duì)細(xì)胞增殖的影響。因此，AEG-1和MMP-7雖然具有協(xié)同性，但是作用方式和調(diào)節(jié)過(guò)程可能并不完全相同。

4 參考文獻(xiàn)

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