王 佳 周文勝 洪秀琴

(湖南省老年醫(yī)院 湖南省老年醫(yī)學(xué)研究所神經(jīng)疾病研究室，湖南 長(zhǎng)沙 410016)

高爾基體(GA)應(yīng)激是GA對(duì)氧化應(yīng)激所做出的應(yīng)答，而氧化應(yīng)激是導(dǎo)致缺血性腦損傷的主要機(jī)制之一，GA常常涉及到氧化應(yīng)激所介導(dǎo)的神經(jīng)疾病的發(fā)病機(jī)制之中，抗氧化系統(tǒng)對(duì)缺血性腦損傷具有神經(jīng)保護(hù)作用。本文就GA應(yīng)激與過(guò)氧化物歧化酶、谷氧還蛋白系統(tǒng)和硫氧還蛋白系統(tǒng)等主要抗氧化系統(tǒng)在缺血性腦損傷的作用作一綜述。

1 GA在細(xì)胞活動(dòng)中起重要作用

GA作為一個(gè)細(xì)胞器，因其在生物合成、脂類(lèi)及蛋白質(zhì)的分類(lèi)和轉(zhuǎn)運(yùn)上起了十分重要的作用，引起了許多科學(xué)家的關(guān)注。值得關(guān)注的是，GA是神經(jīng)鞘脂類(lèi)生物合成的主要場(chǎng)所〔1〕，也作為蛋白和脂類(lèi)翻譯后修飾的“工廠(chǎng)”(多數(shù)情況是經(jīng)過(guò)糖基化修飾)。許多因素包括在病理?xiàng)l件下，在藥物制劑的影響下，以及一些高爾基相關(guān)蛋白的過(guò)表達(dá)，都可以導(dǎo)致GA的形態(tài)發(fā)生改變，從而影響GA的功能。因此，一旦神經(jīng)元的GA功能受損，會(huì)導(dǎo)致蛋白結(jié)構(gòu)異常，蛋白及脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)異常，神經(jīng)元生理功能紊亂而引起疾病的發(fā)生。

2 氧化應(yīng)激是導(dǎo)致缺血性腦損傷的主要機(jī)制之一

研究發(fā)現(xiàn)腦缺血再灌注后，各種損傷機(jī)制可引起包括線(xiàn)粒體和GA等多個(gè)亞細(xì)胞器超微結(jié)構(gòu)的形態(tài)及功能發(fā)生變化，并且出現(xiàn)一系列的亞細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)〔2〕，這可作為判斷神經(jīng)細(xì)胞受損與否以及損傷程度的重要標(biāo)志。許多研究表明，氧化應(yīng)激是導(dǎo)致缺血性腦損傷的主要機(jī)制之一。活性氧(ROS)在一些神經(jīng)系統(tǒng)疾病〔如腦缺血、腦卒中和阿爾茨海默病(AD)〕的病理生理過(guò)程中起了十分重要的作用〔3～5〕。由缺血導(dǎo)致神經(jīng)元損傷的一個(gè)主要機(jī)制是細(xì)胞內(nèi)不斷增加的ROS介導(dǎo)DNA、蛋白質(zhì)和其他大分子的氧化損傷，從而導(dǎo)致神經(jīng)元的凋亡，最終誘發(fā)神經(jīng)退行性疾病〔6〕。就組織病理變化而言，可表現(xiàn)為 DNA 分子中單股或雙股的核苷酸鏈斷裂、DNA蛋白質(zhì)交聯(lián)、堿基結(jié)構(gòu)改變等，從而導(dǎo)致基因變異或突變；對(duì)脂質(zhì)中主要分布于細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的多不飽和脂肪酸的損傷則可生成過(guò)多的過(guò)氧化脂質(zhì)及降解產(chǎn)物，從而導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的逐步形成和心腦血管疾病的發(fā)生；對(duì)蛋白質(zhì)中的一些重要氨基酸中的肽鍵和二硫鍵的損傷則為肽鍵的斷裂或二硫鍵結(jié)構(gòu)改變而致蛋白酶及抗氧化物酶活力減弱甚至喪失其功能等。

3 缺血性腦損傷與GA應(yīng)激

當(dāng)氧化應(yīng)激發(fā)生時(shí)，細(xì)胞積極抵抗氧化損傷和恢復(fù)氧化還原平衡。所有的器官都在對(duì)氧化應(yīng)激做出適應(yīng)性的應(yīng)答，例如激活核內(nèi)編碼防御酶、轉(zhuǎn)錄因子以及結(jié)構(gòu)蛋白相關(guān)的基因〔7〕?？上攵?，在氧化應(yīng)激的情況下，本來(lái)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定且有著正常生理功能的GA也會(huì)由此受到影響〔8〕。GA的這些改變可能觸發(fā)和傳遞下游應(yīng)激信號(hào)導(dǎo)致細(xì)胞的適應(yīng)，或者，如果氧化應(yīng)激太嚴(yán)重，GA碎裂甚至出現(xiàn)細(xì)胞凋亡。越來(lái)越多的證據(jù)也表明，GA涉及氧化應(yīng)激所介導(dǎo)的神經(jīng)疾病的發(fā)病機(jī)理之中，如在肌萎縮側(cè)索硬化(ALS)、帕金森病(PD)、腦缺血和AD等疾病中就發(fā)現(xiàn)了GA碎裂的現(xiàn)象，并且可隨時(shí)間延長(zhǎng)而加重〔9～12〕。在新生的缺血再灌注動(dòng)物模型中〔13〕，GA在缺血再灌注的早期就發(fā)現(xiàn)在紋狀體神經(jīng)元發(fā)生碎裂的現(xiàn)象。在全腦缺血再灌注大鼠中〔14〕，GA碎裂成池狀小泡和不規(guī)則的膜螺紋。GA的碎裂可能對(duì)其分泌活性產(chǎn)生不利影響，并且由此改變神經(jīng)元的活性。GA碎裂其中的一個(gè)關(guān)鍵機(jī)制是與氧化應(yīng)激密切相關(guān)。氧化應(yīng)激主要是通過(guò)以下三個(gè)途徑介導(dǎo)GA的碎裂〔15〕：①氧化應(yīng)激導(dǎo)致GA微管蛋白的損傷；②氧化應(yīng)激激活清除GA結(jié)構(gòu)蛋白的凋亡蛋白酶；③氧化應(yīng)激誘導(dǎo)Ca2+的異常從而導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的應(yīng)激，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激導(dǎo)致GA的碎裂。

Jiang等〔15〕把GA對(duì)氧化應(yīng)激所做出的應(yīng)答稱(chēng)之為GA應(yīng)激。GA應(yīng)激代表了GA容易對(duì)細(xì)胞內(nèi)的生理失衡產(chǎn)生相應(yīng)應(yīng)答的能力，如GA出現(xiàn)形態(tài)的改變或最終的碎裂。高爾基的Ca2+/Mn2+ATP酶和其他定位在高爾基中的活性蛋白可能積極參與GA應(yīng)激過(guò)程，最終出現(xiàn)GA的碎裂與神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。

4 GA應(yīng)激與抗氧化系統(tǒng)在缺血性腦損傷中的研究進(jìn)展

4.1GA與線(xiàn)粒體 即往研究發(fā)現(xiàn)，線(xiàn)粒體的功能紊亂在一些神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)理中起了十分關(guān)鍵作用。事實(shí)上，在一些凋亡過(guò)程中，研究人員發(fā)現(xiàn)線(xiàn)粒體也承受著碎裂的情況〔20〕。線(xiàn)粒體蛋白Mfn1是維護(hù)線(xiàn)粒體融合所必需的蛋白，在氧化應(yīng)激下過(guò)表達(dá)Mfn1能有效地阻止線(xiàn)粒體的碎裂和神經(jīng)細(xì)胞的死亡〔21〕。Nakagomi等〔22〕在經(jīng)氧化應(yīng)激處理的皮質(zhì)神經(jīng)元中過(guò)表達(dá)Mfn1，發(fā)現(xiàn)不僅能明顯抑制線(xiàn)粒的碎裂，而且能一定程度減少GA碎裂的情況。說(shuō)明線(xiàn)粒體處于GA碎裂信號(hào)通路的上游，也對(duì)GA的碎裂起到了重要的作用。

4.2GA與SODs SODs是細(xì)胞內(nèi)抗氧化所必需的一種酶，許多研究表明SODs在腦缺血后有明顯的神經(jīng)保護(hù)作用〔23，24〕。Fujimura等〔23〕報(bào)道稱(chēng)，小鼠在腦缺血后，SOD1可以避免DNA損傷修復(fù)酶過(guò)早的減少。另外，Kim等〔24〕也稱(chēng)在由血栓造成的SOD1轉(zhuǎn)基因小鼠缺血后，表達(dá)增加的SOD1能減少DNA的氧化損傷和細(xì)胞死亡中DNA的碎裂。同樣，在正常的生理情況下，SOD2缺陷型的突變小鼠會(huì)出現(xiàn)過(guò)氧化物離子顯著的增加，而這種情況一般只在野生型小鼠腦缺血時(shí)才會(huì)發(fā)生〔25〕。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體通過(guò)對(duì)SOD2活性的調(diào)節(jié)產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用，以減少腦缺血所帶來(lái)的損傷〔26～28〕。

另有研究表明，SOD1的突變形式在神經(jīng)系統(tǒng)疾病如肌萎縮側(cè)索硬化癥(fALS)和類(lèi)似fALS的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病的發(fā)病機(jī)制中起了重要的作用〔29，30〕。在fALS中，氧化應(yīng)激在突變的SOD1的毒性方面起了十分重要的作用。fALS的一個(gè)主要是特征是在其早期會(huì)出現(xiàn)GA碎裂的現(xiàn)象〔31，32〕。除了其超氧化物歧化活性，SOD1也有自由基生成活性，產(chǎn)生的自由基主要是通過(guò)利用H2O2和其他小分子陰離子作為底物。研究表明〔33，34〕，在SOD1G93A 突變的fALS轉(zhuǎn)基因小鼠中自由基生成活性相比野生型的要高出許多。因此，在fALS中，有可能突變的SOD1蛋白，以及隨后發(fā)生的較低的ROS清除率和較高的ROS生成率都會(huì)導(dǎo)致GA的碎裂，然而，這些結(jié)果與fALS中超氧物介導(dǎo)的氧化損傷的病理機(jī)制不一致。

4.3GA與谷氧還蛋白系統(tǒng)(GRX) 谷氧還蛋白(Grx)是細(xì)胞內(nèi)一種重要的巰基-二硫鍵氧化還原酶，具有多種生物學(xué)功能，在細(xì)胞內(nèi)氧化還原平衡狀態(tài)的調(diào)控及抵抗氧化應(yīng)激損傷過(guò)程中發(fā)揮重要作用。正常生理情況下，Grx可與胞質(zhì)內(nèi)谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽還原酶(GR)、NADPH共同構(gòu)成一個(gè)氧化還原調(diào)節(jié)系統(tǒng)，還原體內(nèi)被氧化了的蛋白質(zhì)，且對(duì)蛋白谷胱甘肽混合型二硫化物的還原具有高選擇性。Grx利用谷胱甘肽的兩個(gè)或一個(gè)半胱氨酸殘基既可以催化蛋白質(zhì)之間形成的二硫鍵還原，也可以催化蛋白質(zhì)巰基與小分子巰基化合物之間形成的混合二硫鍵的還原，最常見(jiàn)的就是蛋白質(zhì)與GSH 之間形成的混合二硫鍵(Pr-S-S-G)。Fernandes等〔35〕研究發(fā)現(xiàn)，在各種氧化應(yīng)激損傷過(guò)程中，谷胱甘肽化蛋白質(zhì)(Pr-S-S-G)結(jié)構(gòu)最先形成，而Grx的作用主要是對(duì)巰基-蛋白質(zhì)(SH-protein)早期氧化損傷形成的Pr-S-S-G進(jìn)行修復(fù)。因此，在體內(nèi)的抗氧化防御體系中，Grx發(fā)揮著關(guān)鍵作用。Takagi等〔36〕研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)鼠腦中動(dòng)脈缺血4 h后，腦組織中Grx mRNA 和蛋白的表達(dá)均下降，而這種下降和神經(jīng)元損傷呈平行關(guān)系。因此，腦組織中Grx含量的維持，對(duì)于神經(jīng)元抵御氧化應(yīng)激或GA應(yīng)激作用非常重要。如果在腦缺血再灌注損傷后的腦組織中迅速給予Grx，可能減弱GA應(yīng)激或減輕腦組織的損傷。

到目前為止，在哺乳類(lèi)動(dòng)物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)4個(gè)Grx亞類(lèi)〔37〕。定位于細(xì)胞質(zhì)的Grx1；主要定位于線(xiàn)粒體的Grx2(Grx2a，睪丸細(xì)胞與一些癌細(xì)胞表達(dá)該蛋白兩個(gè)額外的細(xì)胞質(zhì)/細(xì)胞核亞型，Grx2b和Grx2c來(lái)源于可供選擇的轉(zhuǎn)錄起始和剪切)；定位于細(xì)胞質(zhì)的多區(qū)域單硫基Grx3；以及線(xiàn)粒體單硫基。

而據(jù)Mesecke等〔38〕報(bào)道，Grx家族(Grxs)逐漸擴(kuò)大，新的Grxs成員不斷被發(fā)現(xiàn)，諸如：Grx6、Grx7和Grx8。Grx6和Grx7能阻止底物蛋白特定硫基的氧化，并且在細(xì)胞抵抗氧化應(yīng)激方面起著關(guān)鍵性的作用。Grx6和Grx7都定位于順面GA，并且是目前發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)位于分泌途徑中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)下游的氧化還原組分。Grx6和Grx7定位于GA，可以認(rèn)為它們的合成及其轉(zhuǎn)運(yùn)通過(guò)了GA，并且這對(duì)說(shuō)它們的分泌是必需的。Grx6和Grx7作為抗氧化蛋白，可能對(duì)氧化應(yīng)激下的高爾基體產(chǎn)生保護(hù)作用，但這種保護(hù)作用是直接對(duì)GA的功能產(chǎn)生影響，還是能減少損傷高爾基膜的一些毒性細(xì)胞分子，從而達(dá)到盡可能維持高爾基膜的完整性，具體機(jī)制是值得深入研究的。

4.4GA與硫氧還蛋白系統(tǒng)(TRX) 硫氧還蛋白(Trx)是一類(lèi)分布廣泛的小分子多功能蛋白，它們?cè)谶M(jìn)化上相當(dāng)保守，一般都具有一個(gè)相同的有氧化還原活性的Cys-Gly-Pro-Cys的氨基酸序列。Trx與硫氧還蛋白還原酶(TrxR)、還原型煙酰腺嘌呤二核苷磷酸( NADPH )三者共同組成硫氧還蛋白系統(tǒng)。其主要作用是通過(guò)二硫鍵-巰基的交換反應(yīng)維持細(xì)胞內(nèi)外氧化還原平衡及在氧化應(yīng)激反應(yīng)中抗氧化和清除自由基。目前在硫氧還蛋白家族(Trxs)中，主要有Trx1和Trx2兩型，Trx1位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中，而Trx2 僅位于線(xiàn)粒體中，被認(rèn)為是Trx家族中的一種線(xiàn)粒體特異性蛋白。Trx1和Trx2都不依賴(lài)經(jīng)典的ER-Golgi途徑就能分泌到細(xì)胞外發(fā)揮功能。但Jimenez等〔39〕人報(bào)道了一個(gè)新的Trx蛋白Trx3，該蛋白只在精子細(xì)胞中表達(dá)，并且是迄今發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)特定的定位于GA的硫氧還蛋白。Trx3為生殖細(xì)胞的分化提供了合適的氧化還原環(huán)境，并且在高爾基中它的功能可能與精子細(xì)胞特定功能蛋白的翻譯后修飾有關(guān)。

Trx有強(qiáng)烈的清除體內(nèi)過(guò)氧化物的功能，能保護(hù)細(xì)胞免受諸如腫瘤壞死因子(TNF)以及H2O2等的損傷。在缺血再灌注轉(zhuǎn)基因大鼠中，通過(guò)AKT信號(hào)的介導(dǎo)，Trx的過(guò)表達(dá)可阻止神經(jīng)細(xì)胞的凋亡〔40〕。在體內(nèi)局部的腦缺血再灌注可誘導(dǎo)Trx短暫的表達(dá)〔41〕。這些研究結(jié)果均表明：Trx能生理性地保護(hù)細(xì)胞抵御氧化應(yīng)激及其相關(guān)的外界環(huán)境改變〔42〕。神經(jīng)退行性病變患者腦中Trx 水平普遍下降，特別是在杏仁核和海馬區(qū)域，同時(shí)發(fā)現(xiàn)了高爾基體碎裂的現(xiàn)象〔43〕。范義等〔44〕通過(guò)應(yīng)用Trx對(duì)腦組織缺血再灌注損傷治療，結(jié)果顯示：Trx能減小腦缺血再灌注后腦梗死面積，降低腦組織勻漿中MDA含量及提高SOD活性。但是，Trx發(fā)揮其神經(jīng)保護(hù)作用是否通過(guò)了GA，或者對(duì)GA產(chǎn)生了怎樣的作用，這些都是值得研究和探討的。

5 小 結(jié)

綜上所述，在缺血性腦損傷中，抗氧化系統(tǒng)可能可以通過(guò)減弱氧化應(yīng)激來(lái)推遲或減少GA碎裂的情況，最終達(dá)到推遲和延長(zhǎng)神經(jīng)細(xì)胞死亡的機(jī)制。因此，通過(guò)改變抗氧化系統(tǒng)相關(guān)蛋白表達(dá)水平，降低氧化敏感性，維持GA正常生理功能，可以為由氧化應(yīng)激損傷導(dǎo)致的各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療提供一種新策略。

6 參考文獻(xiàn)

1Holthuis JC，Pomorski T，Raggers RJ,etal.The organizing potential of sphingolipids in intracellular membrane transport〔J〕.Physiol Rev，2001；81(4)：1689-723.

2Truettner JS，Hu K，Liu CL,etal.Subcellular stress response and induction of molecular chaperones and folding proteins after transient global ischemia in rats〔J〕.Brain Res，2009；(11)：1249：9-18.

3Floyd RA.Antioxidants，oxidative stress，and degenerative neurological disorders〔J〕.Proc Soc Exp Biol Med，1999；222(3)：236-45.

4Ren J，F(xiàn)an C，Chen N,etal.Resveratrol pretreatment attenuates cerebral ischemic injury by upregulating expression of transcription factor Nrf2 and HO-1 in rats〔J〕.Neurochem Res，2011；36(12)：2352-62.

5Sugawara T，Chan PH.Reactive oxygen radicals and pathogenesis of neuronal death after cerebral ischemia〔J〕.Antioxid Redox Signal，2003；5(5)：597-607.

6Numagami Y，Sato S，Ohnishi ST.Attenuation of rat ischemic brain damage by aged garlic extracts：a possible protecting mechanism as antioxidants〔J〕.Neurochem Int，1996；29(2)：135-43.

7Mahon KP，Potocky TB，Blair D,etal.Deconvolution of the cellular oxidative stress response with organelle-specific Peptide conjugates〔J〕.Chem Biol，2007；14(8)：923-30.

8Hicks SW，Machamer CE.Golgi structure in stress sensing and apoptosis〔J〕.Biochim Biophys Acta，2005；1744(3)：406-14.

9Stieber A，Chen Y，Wei S,etal.The fragmented neuronal Golgi apparatus in amyotrophic lateral sclerosis includes the trans-Golgi-network：functional implications〔J〕.Acta Neuropathol，1998；95(3)：245-53.

10Fujita Y，Ohama E，Takatama M,etal.Fragmentation of Golgi apparatus of nigral neurons with alpha-synuclein-positive inclusions in patients with Parkinson′s disease〔J〕.Acta Neuropathol，2006；112(3)：261-5.

11Baloyannis SJ，Costa V，Michmizos D.Mitochondrial alterations in Alzheimer′s disease〔J〕.Am J Alzheimers Dis Other Demen，2004；19(2)：89-93.

12Hu Z，Zeng L，Xie L,etal.Morphological alteration of Golgi apparatus and subcellular compartmentalization of TGF-beta1 in Golgi apparatus in gerbils following transient forebrain ischemia〔J〕.Neurochem Res，2007;32(11)：1927-31.

13Martin LJ，Brambrink AM，Price AC,etal.Neuronal death in newborn striatum after hypoxia-ischemia is necrosis and evolves with oxidative stress〔J〕.Neurobiol Dis，2000；7(3)：169-91.

14Rafols JA，Daya AM，O′N(xiāo)eil BJ,etal.Global brain ischemia and reperfusion：Golgi apparatus ultrastructure in neurons selectively vulnerable to death〔J〕.Acta Neuropathol，1995；90(1)：17-30.

15Jiang Z，Hu Z，Zeng L,etal.The role of the Golgi apparatus in oxidative stress：is this organelle less significant than mitochondria〔J〕?Free Radic Biol Med，2011；50(8)：907-17.

16Ahn JH，Choi JH，Song JM,etal.Increase in Trx2/Prx3 redox system immunoreactivity in the spinal cord and hippocampus of aged dogs〔J〕.Exp Gerontol，2011；46(11)：946-52.

17Drechsel DA，Patel M.Respiration-dependent H2O2removal in brain mitochondria via the thioredoxin/peroxiredoxin system〔J〕.J Biol Chem，2010；285(36)：27850-8.

18Zhang H，Go YM，Jones DP.Mitochondrial thioredoxin-2/peroxiredoxin-3 system functions in parallel with mitochondrial GSH system in protection against oxidative stress〔J〕.Arch Biochem Biophys，2007；465(1)：119-26.

19Delanty N，Dichter MA.Antioxidant therapy in neurologic disease〔J〕.Arch Neurol，2000；57(9)：1265-70.

20Youle RJ，Karbowski M.Mitochondrial fission in apoptosis〔J〕.Nat Rev Mol Cell Biol，2005；6(8)：657-63.

21Bossy-Wetzel E，Barsoum MJ，Godzik A,etal.Mitochondrial fission in apoptosis，neurodegeneration and aging〔J〕.Curr Opin Cell Biol，2003；15(6)：706-16.

22Nakagomi S，Barsoum MJ，Bossy-Wetzel E,etal.A Golgi fragmentation pathway in neurodegeneration〔J〕.Neurobiol Dis，2008；29(2)：221-31.

23Fujimura M，Morita-Fujimura Y，Kawase M,etal.Manganese superoxide dismutase mediates the early release of mitochondrial cytochrome C and subsequent DNA fragmentation after permanent focal cerebral ischemia in mice〔J〕.J Neurosci，1999；19(9)：3414-22.

24Kim GW，Lewen A，Copin J,etal.The cytosolic antioxidant，copper/zinc superoxide dismutase，attenuates blood-brain barrier disruption and oxidative cellular injury after photothrombotic cortical ischemia in mice〔J〕.Neuroscience，2001；105(4)：1007-18.

25Murakami K，Kondo T，Kawase M,etal.Mitochondrial susceptibility to oxidative stress exacerbates cerebral infarction that follows permanent focal cerebral ischemia in mutant mice with manganese superoxide dismutase deficiency〔J〕.J Neurosci，1998；18(1)：205-13.

26Nemethova M，Danielisova V，Gottlieb M,etal.Post-conditioning exacerbates the MnSOD immune-reactivity after experimental cerebral global ischemia and reperfusion in the rat brain hippocampus〔J〕.Cell Biol Int，2008；32(1)：128-35.

27Jung JE，Kim GS，Narasimhan P,etal.Regulation of Mn-superoxide dismutase activity and neuroprotection by STAT3 in mice after cerebral ischemia〔J〕.J Neurosci，2009；29(21)：7003-14.

28Yan BC，Choi JH，Yoo KY,etal.Leptin′s neuroprotective action in experimental transient ischemic damage of the gerbil hippocampus is linked to altered leptin receptor immunoreactivity〔J〕.J Neurol Sci，2011；303(1-2)：100-8.

29Rosen DR.Mutations in Cu/Zn superoxide dismutase gene are associated with familial amyotrophic lateral sclerosis〔J〕.Nature，1993；364(6435)：362.

30Gurney ME，Pu H，Chiu AY,etal.Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation〔J〕.Science，1994；264(5166)：1772-5.

31Tu PH，Gurney ME，Julien JP,etal.Oxidative stress，mutant SOD1，and neurofilament pathology in transgenic mouse models of human motor neuron disease〔J〕.Lab Invest，1997；76(4)：441-56.

32Beal MF，F(xiàn)errante RJ，Browne SE,etal.Increased 3-nitrotyrosine in both sporadic and familial amyotrophic lateral sclerosis〔J〕.Ann Neurol，1997；42(4)：644-54.

33Yim MB，Kang JH，Yim HS,etal.A gain-of-function of an amyotrophic lateral sclerosis-associated Cu,Zn-superoxide dismutase mutant：An enhancement of free radical formation due to a decrease in Km for hydrogen peroxide〔J〕.Proc Natl Acad Sci U S A，1996；93(12)：5709-14.

34Yim HS，Kang JH，Chock PB,etal.A familial amyotrophic lateral sclerosis-associated A4V Cu，Zn-superoxide dismutase mutant has a lower Km for hydrogen peroxide.Correlation between clinical severity and the Km value〔J〕.J Biol Chem，1997；272(14)：8861-3.

35Fernandes AP，F(xiàn)ladvad M，Berndt C,etal.A novel monothiol glutaredoxin (Grx4) from Escherichia coli can serve as a substrate for thioredoxin reductase〔J〕.J Biol Chem，2005；280(26)：24544-52.

36Takagi Y，Nakamura T，Nishiyama A,etal.Localization of glutaredoxin (thioltransferase) in the rat brain and possible functional implications during focal ischemia〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，1999；258(2)：390-4.

37Lillig CH，Berndt C，Holmgren A.Glutaredoxin systems〔J〕.Biochim Biophys Acta，2008；1780(11)：1304-17.

38Mesecke N，Spang A，Deponte M,etal.A novel group of glutaredoxins in the cis-Golgi critical for oxidative stress resistance〔J〕.Mol Biol Cell，2008；19(6)：2673-80.

39Jimenez A，Zu W，Rawe VY,etal.Spermatocyte/spermatid-specific thioredoxin-3，a novel Golgi apparatus-associated thioredoxin，is a specific marker of aberrant spermatogenesis〔J〕.J Biol Chem，2004；279(33)：34971-82.

40Zhou F，Gomi M，F(xiàn)ujimoto M,etal.Attenuation of neuronal degeneration in thioredoxin-1 overexpressing mice after mild focal ischemia〔J〕.Brain Res，2009；1272：62-70.

41Yan BC，Park JH，Ahn JH,etal.Comparison of the immunoreactivity of Trx2/Prx3 redox system in the hippocampal CA1 region between the young and adult gerbil induced by transient cerebral ischemia〔J〕.Neurochem Res，2012；37(5)：1019-30.

42Kim YC，Masutani H，Yamaguchi Y,etal.Hemin-induced activation of the thioredoxin gene by Nrf2.A differential regulation of the antioxidant responsive element by a switch of its binding factors〔J〕.J Biol Chem，2001；276(21)：18399-406.

43Lovell MA，Xie C，Gabbita SP,etal.Decreased thioredoxin and increased thioredoxin reductase levels in Alzheimer′s disease brain〔J〕.Free Radic Biol Med，2000；28(3)：418-27.

44范 義,滕 妍,張啟周,等.人硫氧還蛋白對(duì)腦缺血作用的CT灌注與S0D相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2005；5(4)：306-10.