李 麗 羅澤萍 楊秀芬 周煥第

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室，廣西 南寧 530001)

地菍為野牡丹科植物地菍的全草, 主要分布于長江以南的廣西、廣東、福建等省區(qū)〔1〕。在廣西桂北瑤族地區(qū)，地菍被稱為“莫翁樣”，民間主要用來治療“消渴”、“虛勞”、“腸炎”、“腹瀉”等病證，是瑤醫(yī)藥的常用藥材之一〔2〕。地菍藥材中含有豐富的多糖類、黃酮類、酚類、氨基酸、鞣質(zhì)等多種成分〔3〕。目前有關(guān)其藥理作用的研究報道較少。筆者前期研究發(fā)現(xiàn)，地菍水提物對高血糖模型小鼠有降糖作用〔4,5〕，還具有良好的鎮(zhèn)痛抗炎作用〔6〕。本實驗建立3種實驗性糖尿病小鼠模型，進一步研究地菍乙醇提取物對血糖的影響。

1 材料與方法

1.1藥品與試劑 地菍藥材購自南寧市小瑤王藥店，由本校中藥鑒定教研室鑒定為野牡丹科植物地菍(MelastomadodecandrumLour.)的干燥全草。藥材加95%乙醇浸泡過夜，加熱回流提取3次，每次1 h，過濾，合并濾液，減壓回收至無醇味，濃縮得黑綠色浸膏備用。鹽酸腎上腺素注射液，天津藥業(yè)集團新鄭股份有限公司，批號：1009221。四氧嘧啶(Alloxan),美國Sigma公司產(chǎn)品。鏈脲佐菌素(STZ), 美國Sigma公司產(chǎn)品(STZ溶液配制：取STZ溶于0.1 mol/L的檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液，pH4.5，現(xiàn)配現(xiàn)用)。鹽酸二甲雙胍片,北京四環(huán)制藥有限公司生產(chǎn)，批號：20100414。格列苯脲, 山西云鵬制藥有限公司，批號：A110404。葡萄糖氧化酶法測定試劑盒,四川省邁克科技有限責(zé)任公司生產(chǎn),批號：1203021。

1.2儀器 TU-1901雙光束紫外可見光分光光度計：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；臺式離心機：16 K，珠海黑馬醫(yī)學(xué)儀器有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海亞榮生化儀器廠。

1.3實驗動物 昆明種小白鼠，清潔級，雌雄各半,體重(20±2)g,由廣西中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，實驗動物使用許可證號：SYXK桂2010-0001。

1.4方法

1.4.1地菍醇提物對腎上腺素致高血糖小鼠的影響 將72只小鼠隨機分成正常組、模型組、陽性對照組(鹽酸二甲雙胍0.75 g/kg)、地菍醇提物高、中、低(60、40、20 g/kg)劑量組，每組12只。各給藥組每日灌胃1次，空白組和模型組給予等體積蒸餾水(20 ml/kg)，連續(xù)10 d。末次給藥前小鼠禁食不禁水8 h，末次給藥后1 h，除正常組外,其余各組小鼠均腹腔注射腎上腺素(0.5 mg/kg), 分別測定注射腎上腺素前(0 h血糖)和注射0.5 h 后血糖值。

1.4.2地菍醇提物對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響 取小鼠100只，隨機抽取12只作為正常組,其余小鼠禁食不禁水24 h后,尾靜脈注射新鮮配制的四氧嘧啶溶液(60 mg/kg),72 h后對再次禁食不禁水8 h的小鼠眼眶后靜脈叢采血,取血清按葡萄糖氧化酶法試劑盒說明測血糖值,選取空腹血糖高于8.0 mmol/L的小鼠為糖尿病模型小鼠,納入實驗。糖尿病小鼠隨機分為5 組，每組12只，即模型組、陽性對照組(鹽酸二甲雙胍0.75 mg/kg)、地菍醇提物高、中、低(60、40、20 g/kg)劑量組。各組小鼠均灌胃給予相應(yīng)藥物，正常對照組和模型組給予蒸餾水(20 ml/kg)，每日灌胃1次，連續(xù)給藥10 d。末次給藥前小鼠禁食不禁水12 h，末次給藥1 h后從小鼠眼眶后靜脈叢取血，按葡萄糖氧化酶法試劑盒說明測定血糖值。

1.4.3地菍醇提物對STZ致糖尿病小鼠血糖的影響 取小鼠100只，隨機抽取12只作為正常組,其余小鼠腹腔注射新鮮配制的STZ溶液(150 mg/kg)，72 h 后 ,對禁食不禁水8 h后的小鼠眼眶后靜脈叢取血，測血糖值，選取空腹血糖高于8.0 mmol/L的小鼠為糖尿病模型小鼠,納入實驗。糖尿病小鼠隨機分為5 組，每組12只，即模型組、陽性對照組(格列苯脲0.4 g/kg)、地菍醇提物高、中、低(60、40、20 g/kg)劑量組。各組小鼠均灌胃給予相應(yīng)藥物，正常組和模型組給予蒸餾水(20 ml/kg)，每日灌胃2次，連續(xù)給藥10 d。末次給藥前小鼠禁食不禁水12 h，于末次給藥1 h后從小鼠眼眶后靜脈叢取血，按葡萄糖氧化酶法試劑盒說明測定血糖值。

2 結(jié) 果

2.1地菍醇提物對腎上腺素致高血糖小鼠血糖的影響 注射腎上腺素0.5 h 后模型組小鼠血糖顯著升高(P<0.01)，說明腎上腺素致小鼠急性高血糖模型成功，鹽酸二甲雙胍、地菍醇提物高、中劑量對腎上腺素造成的小鼠急性高血糖均有顯著拮抗作用(P<0.05)。見表1。

表1 地菍醇提物對腎上腺素致高血糖小鼠血糖的影響

2.2地菍醇提物對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響 陽性藥鹽酸二甲雙胍和地菍醇提物高劑量對四氧嘧啶造成的糖尿病小鼠高血糖有非常顯著的降糖作用(P<0.01)，中劑量有顯著降糖作用(P<0.05)。見表2。

表2 地菍醇提物對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響

2.3地菍醇提物對STZ致糖尿病小鼠血糖的影響 陽性藥格列苯脲和地菍醇提物高劑量對STZ造成的糖尿病小鼠高血糖有非常顯著的降糖作用(P<0.01)，中劑量有顯著降糖作用(P<0.05)。

表3 地菍醇提物對STZ致糖尿病小鼠血糖的影響

3 討 論

腎上腺素具有α和β受體激動作用，能促進肝臟及肌肉糖原分解，肌肉中糖酵解生成的乳酸增多，經(jīng)三羧酸循環(huán)糖異生增快。腎上腺素還激活丙酮酸羧化酶，使丙酮酸向磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)化促進糖異生。這些改變均可導(dǎo)致血糖升高〔7〕。本實驗結(jié)果提示地菍醇提物對急性高血糖小鼠的糖代謝有調(diào)節(jié)作用。四氧嘧啶在體內(nèi)可選擇性地迅速被胰腺β細胞吸收,產(chǎn)生的超氧陰離子等自由基能直接破壞β細胞的膜結(jié)構(gòu),損傷β細胞的DNA,大量的β細胞損傷與壞死導(dǎo)致胰島素原合成障礙,引起糖尿病〔8〕。四氧嘧啶小鼠模型經(jīng)地菍醇提物治療后空腹血糖明顯下降，表明地菍醇提物對四氧嘧啶致糖尿病小鼠有一定的降血糖作用。STZ是一種含亞硝基化合物，為胰島β細胞毒劑〔9〕，通過一氧化氮(NO)和自由基2種途徑損傷胰島β細胞DNA，并進一步誘導(dǎo)多聚ADP核糖基化作用,導(dǎo)致胰島β細胞大量壞死，從而使動物產(chǎn)生胰島素依賴型糖尿病〔10〕。本實驗提示地菍醇提物可能對胰島β細胞有一定的修復(fù)作用,使胰島素分泌增多,從而改善糖代謝。本研究結(jié)果表明地菍醇提物對3種糖尿病小鼠模型均有顯著的降血糖作用，有關(guān)其降血糖的有效部位及作用機制尚待進一步研究。

4 參考文獻

1國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草(5)〔M〕.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，1999：628-9.

2覃迅云，羅金裕，高志剛.中國瑤藥學(xué)〔M〕.南寧：廣西民族出版社，2002：712.

3李 麗，周 芳，黃瓊珍.地菍的化學(xué)成分和藥理作用研究進展〔J〕.廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011；14(1)：73-5.

4李 麗，周 芳，羅文禮.地菍水提物對四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降糖作用〔J〕.海峽藥學(xué)，2008；20(12)：22-3.

5李 麗，周 芳.地菍提取物對高血糖模型小鼠血糖的影響〔J〕.中國實驗方劑學(xué)雜志，2011；17(20)：187-9.

6周 芳，張興燊，張旖簫，等.地稔水煎液鎮(zhèn)痛抗炎藥效學(xué)的實驗研究〔J〕.時珍國醫(yī)國藥，2007；18(10)：2370-1.

7陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)〔M〕.第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：818-9.

8金在久，姜艷玲，張善玉.月見草油合劑對糖尿病小鼠糖脂代謝及抗氧化作用的影響〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2011；31(1)：111-3.

9黃桂紅，賀 敏，林 興，等.楊桃根醇提物對糖尿病模型小鼠的降血糖作用〔J〕.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2009；29(15)：1256-8.

10金 勇，朱 勇，吳南翔.實驗性鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的大、小鼠糖尿病動物模型研究進展〔J〕.中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2009；19(3)：80-2.