周偉紅 顧亞紅

(復旦大學附屬中山醫(yī)院青浦分院普外科，上海 201700)

胃低分化腺癌患者常伴有多年的潰瘍性病變。當細胞惡變后，進展快，患者預后差。由于腫瘤的分化程度低，異型性明顯，基因的變化類型多，調(diào)節(jié)機制復雜〔1〕。Bmi-1是多梳基因家族的成員，可以調(diào)控細胞增殖和凋亡〔2，3〕。激活蛋白(AP)-2γ是一種轉(zhuǎn)錄因子，可以調(diào)節(jié)相關細胞的增殖、黏附和侵襲過程〔4，5〕。白細胞分化抗原(CD)147是免疫球蛋白家族的成員之一，在細胞表面發(fā)揮作用時具有多項生物學功能〔6，7〕。本文關注胃低分化腺癌患者術后組織中Bmi-1、AP-2γ和CD147的表達及其相關性。

1 材料和方法

1.1臨床資料 2011年1月至2013年12月我院行胃癌根治手術、同時經(jīng)病理醫(yī)師確診為低分化腺癌患者123例作為研究組。納入均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中診斷標準。其中男70例，女53例，年齡53～81〔平均(64.5±5.7)〕歲。術前均未進行放、化療。同時選取距腫瘤邊緣大于5 cm的胃切緣，并經(jīng)病理醫(yī)師證實為正常的胃黏膜組織87例作為對照組，其中男50例，女37例，年齡54～79〔平均(63.2±4.1)〕歲。兩組常規(guī)資料無顯著差別。

1.2免疫組化檢測Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白的表達 Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白的濃縮液均購自Santa Cruz Biotechnology，SP試劑盒、DAB顯色劑等均購自武漢博士德生物工程有限公司。濃縮液均依不同比例進行稀釋，采用免疫組化SP法進行預實驗，選擇最佳配比濃度進行正式實驗。Bmi-1、AP-2γ和CD147的檢測應用免疫組化SP法，均由同一病理技師操作，嚴格按說明書操作，嚴格質(zhì)量控制，減少人為誤差。

1.3Bmi-1、AP-2γ和CD147結(jié)果判定 Bmi-1以細胞質(zhì)和(或)細胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應，AP-2γ以細胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應細胞，CD147以細胞膜和(或)細胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應細胞。每張切片中選擇染色較集中的上皮細胞區(qū)域，計數(shù)5個400倍的視野，取其平均值，以陽性細胞≥5%為陽性，陽性細胞的25%定為陰性。

1.4統(tǒng)計學方法 應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白表達陽性率比較 兩組Bmi-1、AP-2γ和CD147表達陽性率差別均顯著(P<0.000 1)。見表1。

表1 Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白在二組中表達陽性率的比較〔n(%)〕

2.2研究組不同臨床特征患者Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白表達陽性率的比較 研究組Bmi-1、AP-2γ和CD147表達陽性率與腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤、增殖指數(shù)均密切相關。見表2。

表2 研究組不同臨床特征患者Bmi-1、AP-2γ和CD147蛋白表達陽性率的比較〔n(%)〕

2.3研究組Bmi-1、AP-2γ和CD147表達相關性 研究組Bmi-1和AP-2γ(r=0.45，P=0.023 5)的表達呈正相關，其他指標間未見相關性。

3 討 論

胃低分化腺癌發(fā)生的機制目前尚不清楚。多種蛋白異常表達對病變起促進作用〔8〕。Bmi-1作為一種位于表面的核蛋白，可以引起細胞的惡性轉(zhuǎn)變〔9，10〕。研究顯示Bmi-1可以直接與在P16基因啟動子中的Bmi-1反應元件結(jié)合，調(diào)控P16表達，進而促進腫瘤進展〔11〕。研究顯示Bmi-1可以調(diào)節(jié)同源盒基因及包含氧化酶的WW域基因的表達，進而對上皮和間質(zhì)轉(zhuǎn)化起重要作用〔12，13〕。Song等〔14〕研究顯示Bmi-1可以下調(diào)磷酸酯酶與張力蛋白同源物(PTEN)的表達，進而誘導上皮和間質(zhì)的轉(zhuǎn)化，增加鼻咽上皮細胞的遷移能力和侵襲性，加速腫瘤細胞的進展。AP-2γ的作用是控制基因的轉(zhuǎn)錄作用，對腫瘤的生物學進展有促進作用〔15，16〕。研究顯示AP-2γ在乳腺癌中表達升高，不僅可以促進腫瘤細胞增殖，還可調(diào)節(jié)CDKN1A基因表達，同時可能對乳腺癌的激素治療有一定指導價值〔17，18〕。CD147最初是作為腫瘤細胞激活鄰近的成纖維細胞產(chǎn)生的一種膠原酶而發(fā)現(xiàn)的，其基因定位于人染色體19p13.3，編碼269個氨基酸，其在N端存在著一個信號肽〔19〕。學者〔20〕發(fā)現(xiàn)CD147的跨膜區(qū)域具有亮氨酸拉鏈的結(jié)構(gòu)特點，在正常情況下，CD147不表達或低表達，也有學者〔21〕發(fā)現(xiàn)CD147不僅在腫瘤中表達，在腫瘤周邊組織中也有少量表達，認為其對腫瘤上皮和間質(zhì)轉(zhuǎn)化、侵襲性生長及轉(zhuǎn)移有重要作用。

本文結(jié)果提示Bmi-1、AP-2γ和CD147可以促進腫瘤的發(fā)生，由于胃低分化腺癌是上皮惡性轉(zhuǎn)化過程中的發(fā)生，其具有分化的特征(區(qū)別于未分化癌)，但是分化程度極低，也提示三者可以促進腫瘤的分化過程，但是促進分化的能力差。Bmi-1、AP-2γ和CD147可以促進腫瘤的生長及周邊組織的浸潤，這與相關學者在腫瘤細胞周邊組織中看到少數(shù)間質(zhì)表達AP-2γ和CD147的結(jié)論相似〔15，22〕。Bmi-1、AP-2γ和CD147可以有效促進腫瘤的脈管播散過程，由于脈管生長和轉(zhuǎn)移過程中受多種血管生成因子和淋巴管生成因子的影響，因此三者可能是激活脈管生成的因子，可以促進腫瘤的生長和繁殖，促進腫瘤的作用可能與對腫瘤細胞增殖的調(diào)節(jié)相關〔23〕。失控性增生和異常增殖是低分化癌的顯著特征，三種蛋白高表達，提示腫瘤處于增殖期，此時對機體蛋白的消耗增多，細胞分化差，惡性潛能高，預后差。Bmi-1、AP-2γ和CD147高表達可能提示不良預后，此結(jié)論有待后續(xù)實驗中關注患者的生存情況加以確認。Bmi-1和AP-2γ可能具有協(xié)同正向作用，由于Bmi-1和AP-2γ均為不同調(diào)節(jié)的通路，而二者均可以促進腫瘤細胞的增殖，可能是通過對Ki67表達的增殖調(diào)節(jié)實現(xiàn)的。但是其具體調(diào)節(jié)通路需要更多實驗證實。

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