云亞歌

(青海大學附屬醫(yī)院眼科，青海 西寧 810001)

眼瞼基底細胞癌在老年人發(fā)病率高，多種蛋白的異常表達促進腫瘤的發(fā)生和進展?？张菽さ鞍?VMP)1是近年發(fā)現(xiàn)的一種蛋白質(zhì)，編碼406個氨基酸，含6個跨膜單環(huán)結(jié)構(gòu)，在激發(fā)細胞自噬、參與細胞間黏附和緊密連接、調(diào)控細胞周期等方面發(fā)揮重要作用〔1〕。研究顯示VMP1正常表達可能對抑制腫瘤的發(fā)生和進展有一定作用〔2〕。磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)是人類發(fā)現(xiàn)的第一個具有磷酸酯酶活性的抑癌基因，在正常組織中高表達，并能通過脫磷酸化作用調(diào)節(jié)細胞內(nèi)信號傳導的通路，從而有效調(diào)節(jié)細胞的生長、發(fā)育及抑制腫瘤細胞增殖、黏附和轉(zhuǎn)移〔3,4〕?？罐D(zhuǎn)移蛋白(NM)23為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白，其低表達或表達丟失后可以促進腫瘤進展和轉(zhuǎn)移〔5〕。本實驗檢測老年眼瞼基底細胞癌患者術(shù)后癌組織VMP1、PTEN和NM23蛋白的表達，關(guān)注其臨床意義。

1 資料和方法

1.1臨床資料 2012年3月至2013年6月我院眼科行眼瞼基底細胞癌手術(shù)的老年患者97例作為觀察組，均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標準，并經(jīng)病理學主治醫(yī)師確診。其中男50例，女47例，年齡60～84歲，中位年齡67歲。腫瘤最大徑0.5～7.3(平均4.5)cm。選擇上述腫瘤周邊切緣正常(經(jīng)病理學證實)的鱗狀上皮組織60例作為對照組，年齡60～83歲，其中男30例，女30例，中位年齡66歲。兩組一般臨床資料無明顯差別，具有可比性。

1.2VMP1、PTEN和NM23的檢測 VMP1、PTEN和NM23蛋白的試劑盒均購自武漢博士德生物技術(shù)公司，均為濃縮液，依不同配比濃度稀釋后進行預實驗，選擇最理想的染色濃度進行正式實驗。正式實驗應用免疫組織化學染色二步法，采用DAB染色，均由病理科技師操作完成，嚴格按說明書進行，嚴格質(zhì)量控制，努力減少誤差。

1.3VMP1、PTEN和NM23陽性的判斷標準 VMP1、PTEN和NM23顯色部位是細胞質(zhì)，以出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細胞，選擇5個高倍視野，計數(shù)陽性細胞的百分數(shù)，取平均值，陽性率≥25%為陽性，<25%為陰性。

1.4統(tǒng)計學分析 應用SPSS13.0軟件進行χ2檢驗和線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組VMP1、PTEN和NM23陽性表達率比較 觀察組VMP1、PTEN和NM23陽性表達率明顯低于對照組(P<0.05)，見表1。

2.2觀察組VMP1、PTEN和NM23表達與臨床病理特征的關(guān)系 觀察組VMP1、PTEN和NM23表達陽性率與腫瘤最大徑、是否侵犯皮膚外結(jié)構(gòu)、有無轉(zhuǎn)移及Ki67表達密切相關(guān)。見表2。

表1 兩組VMP1、PTEN和NM23陽性表達率比較〔n(%)〕

表2 觀察組VMP1、PTEN和NM23陽性表達與臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

2.3觀察組VMP1、PTEN和NM23表達的相關(guān)性 觀察組VMP1和PTEN(r=0.46，P=0.048 0)、VMP1和NM23(r=0.49，P=0.037 7)、PTEN和NM23(r=0.44，P=0.025 0)的表達均具有正相關(guān)性。

3 討 論

眼瞼好發(fā)基底細胞癌，尤其在老年人，病變發(fā)展中基底細胞異型增生，分化障礙，使腫瘤細胞不僅向表面生長，同時向下生長、浸潤，破壞周圍組織。在此過程中，可以出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。目前認為基底細胞癌發(fā)展過程中多種蛋白表達失調(diào)，可以有效地調(diào)節(jié)并促進腫瘤進展〔6,7〕。本實驗結(jié)果提示腫瘤中VMP1、PTEN和NM23表達失調(diào)或丟失是引起腫瘤惡變和進展的重要蛋白。VMP1作為一類跨膜蛋白，在腫瘤進展中可以對細胞增殖起明顯的抑制作用〔8,9〕。有觀點認為VMP1低表達時可以抑制由腫瘤壞死因子(TNF)-α誘導的細胞凋亡作用，加速細胞增殖〔10,11〕。PTEN在正常鱗狀上皮和正常基底細胞中均表達，但是在多種癌組織中表達下降。當PTEN在正常組織中強表達時，不僅可以抑制細胞增生，還可以抑制細胞凋亡〔12〕。NM23在作用過程中可以通過其產(chǎn)物核苷二磷酸激酶影響細胞內(nèi)信號傳導系統(tǒng)，同時影響微管、微絲等細胞骨架系統(tǒng)的運動，NM23也參與細胞周期的有效調(diào)控，有效抑制腫瘤細胞的生長和播散〔13〕。本實驗結(jié)果提示VMP1、PTEN和NM23三者可能具有協(xié)同作用。研究認為VMP1可能通過轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)、Wnt和糖原合酶激酶(GSK)信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)發(fā)揮作用參與腫瘤的生物學進展〔14,15〕，而PTEN和NM23也可以通過上述調(diào)節(jié)過程實現(xiàn)的，因此三者的協(xié)同作用可能與其他相關(guān)蛋白作為中介作用有關(guān)，但是具體機制尚有待更多實驗來證實。

本實驗結(jié)果提示VMP1、PTEN和NM23 三種蛋白異常表達參與腫瘤的生長、腫瘤的侵犯、轉(zhuǎn)移及增殖過程。腫瘤生長的速度快，尤其是惡性程度越高的腫瘤，在此過程，VMP1、PTEN和NM23的抑癌作用完全消失，而促癌基因表達明顯升高，使腫瘤的失控性增生明顯增強，腫瘤體積增大。同時腫瘤以其獨特的蟹足樣生長向周圍組織中生長，使腫瘤對周圍組織的破壞能力增強。VMP1、PTEN和NM23蛋白對腫瘤的正常抑制作用可能是通過抑制癌細胞的增殖實現(xiàn)的，Ki67增殖的通路也可能是VMP1、PTEN和NM233種蛋白協(xié)同作用的關(guān)鍵中介因子。也有觀點認為NM23和PTEN異常表達時通過癌相關(guān)的細胞因子、生長因子和連接蛋白，進而對生長因子的生物利用度進行持續(xù)而高效調(diào)控，誘導細胞生長，同時腫瘤細胞的增殖活性提高，腫瘤細胞更具有侵襲性，腫瘤癌化加速，惡性程度和惡性潛能均增強〔16〕。王秀麗等〔17〕認為PTEN基因可以抑制腫瘤細胞浸潤轉(zhuǎn)移，加速細胞凋亡，阻止細胞增殖；而當PTEN表達減弱或缺乏時，可以使上皮細胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化，有效促進腫瘤的進展。

4 參考文獻

1Gilabert M, Vaccaro MI, Fernandez-Zapico ME,etal. Novel role of VMP1 as modifier of the pancreatic tumor cell response to chemotherapeutic drugs〔J〕. J Cell Physiol, 2013;228(9): 1834-43.

2Guo L, Yang LY, Fan C,etal. Novel roles of Vmp1: inhibition metastasis and proliferation of hepatocellular carcinoma〔J〕. Cancer Sci, 2012, 103(12): 2110-9.

3Vaish V, Sanyal SN. Role of Sulindac and Celecoxib in the regulation of angiogenesis during the early neoplasm of colon: exploring PI3-K/PTEN/Akt pathway to the canonical Wnt/β-catenin signaling〔J〕. Biomed Pharmacother, 2012;66(5): 354-67.

4Zhiyong C, Wentong L, Xiaoyang Y,etal. PTEN's regulation of VEGF and VEGFR1 expression and its clinical significance in myeloid leukemia〔J〕. Med Oncol, 2012;29(2): 1084-92.

5白 云, 張紅梅, 徐小平, 等. MNN2和nm23在不同卵巢組織中的表達〔J〕. 中國婦幼保健, 2012;27(30): 4783-4.

6周世權(quán), 周吉航, 鄧 濤, 等. 泡膜蛋白1在非小細胞肺癌組織中的表達及其預后價值〔J〕. 中華醫(yī)學雜志, 2011;91(40): 2828-31.

7朱凌冬, 蔡景龍, 遠里美. 抑癌基因PTEN的研究進展〔J〕. 基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床, 2005;25(8): 707-11.

8Ribas J, Ni X, Castanares M,etal. A novel source for miR-21 expression through the alternative polyadenylation of VMP1 gene transcripts〔J〕. Nucleic Acids Res, 2012;40(14): 6821-33.

9Murolo S, Marcone C, Prota V,etal. Genetic variability of the stolbur phytoplasma vmp1 gene in grapevines, bindweeds and vegetables〔J〕. J Appl Microbiol, 2010;109(6): 2049-59.

10Pardo R, Lo Re A, Archange C,etal. Gemcitabine induces the VMP1-mediated autophagy pathway to promote apoptotic death in human pancreatic cancer cells〔J〕. Pancreatology, 2010;10(1): 19-26.

11Cimerman A, Pacifico D, Salar P,etal. Striking diversity of vmp1, a variable gene encoding a putative membrane protein of the stolbur phytoplasma〔J〕. Appl Environ Microbiol, 2009;75(9): 2951-7.

12Tarnawski AS, Pai R, Tanigawa T,etal. PTEN silencing reverses aging-related impairment of angiogenesis in microvascular endothelial cells〔J〕. Biochem Biophys Res Commun, 2010;394(2): 291-6.

13黃秀英, 李鳳玲, 唐福興, 等. P-選擇素、CD44v6和nm23蛋白在乳腺癌中的表達及其臨床意義〔J〕. 診斷病理學雜志, 2013;20(1): 42-4.

14Jiang PH, Motoo Y, Vaccaro MI,etal. Expression of vacuole membrane protein 1 (VMP1) in spontaneous chronic pancreatitis in the WBN/Kob rat〔J〕. Pancreas, 2004;29(3): 225-30.

15劉 芬,牛 昀,劉 寧, 等. 空泡膜蛋白1在乳腺浸潤性導管癌中表達及與預后的關(guān)系〔J〕. 中華病理學雜志, 2013;42(2): 86-8.

16董華承, 范麗昕, 樸正愛, 等. PTEN、nm23-H1和Syk在大腸癌中的表達及意義〔J〕. 臨床腫瘤學雜志, 2013;18(5): 403-5.

17王秀麗, 劉惠敏. CDX-2、PTEN、E-cadherin、NM23在胃癌中的表達及臨床意義〔J〕. 第二軍醫(yī)大學學報, 2010;31(4): 404-6.