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1.新疆喀什地區(qū)藥品檢驗(yàn)所，新疆 喀什 844000；2.新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院北院藥劑科，新疆 烏魯木齊 830000

HPLC法測(cè)定維吾爾藥散寒藥茶中桂皮醛的含量

司馬義江·阿布都熱西提1阿迪力江·熱加甫2買買斯迪克·臺(tái)外庫(kù)力1

1.新疆喀什地區(qū)藥品檢驗(yàn)所，新疆 喀什 844000；2.新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院北院藥劑科，新疆 烏魯木齊 830000

目的建立散寒藥茶中桂皮醛的含量測(cè)定方法。方法采用高效液相色譜法，流動(dòng)相為甲醇-5%甲醇溶液(50∶50)；流速1 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)290 nm；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10 μL；分析方法：外標(biāo)法。結(jié)果桂皮醛在10.0～250.9 μg·mL-1范圍內(nèi)線性良好(r=0.999 5)，精密度RSD為0.72%(n=5)，平均回收率為97.34%，RSD為1.84%(n=8)。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、測(cè)得結(jié)果穩(wěn)定重現(xiàn)性好，可作為該制劑的質(zhì)量控制方法。

散寒藥茶；桂皮醛；HPLC；含量測(cè)定

散寒藥茶是由新疆維吾爾族名藥之一，具有調(diào)解寒性氣質(zhì)，養(yǎng)胃，助食，爽神等功效。用于濕寒所致的消化不良，關(guān)節(jié)骨痛，腰腿痛，頭痛神疲。藥茶由小豆蔻、纈草、茴芹果、肉桂、草果、肉桂子、高良姜、蓽苃、小茴香、丁香、桅子、芹菜籽等十二味藥材混合，粉碎，過(guò)篩，混勻制成。屬部頒標(biāo)準(zhǔn)—維吾爾藥分冊(cè)收錄品種[1]。這十二味藥材中丁香具有溫中降逆，補(bǔ)腎助養(yǎng)功能、用于脾胃虛寒，呃逆嘔吐，食少吐瀉，心腹冷痛，腎虛陽(yáng)痿[2]。部頒標(biāo)準(zhǔn)僅采用定性鑒別試驗(yàn)來(lái)控制該制劑的質(zhì)量，研究該藥物的含量測(cè)定方法可以更好的反映和控制該制劑的內(nèi)在質(zhì)量。

1 儀器和試藥

日本島津公司LC 20AT高效液相色譜系統(tǒng)；島津uv-2450紫外可見分光光度計(jì)； 德國(guó)賽多利斯BP211D型分析天平；上海必能超聲波有限公司CQX25-12型超聲波清洗器。桂皮醛對(duì)照品(批號(hào)：110710-201217，中國(guó)藥品生物制品鑒定所)；散寒藥茶(批號(hào)：130728、130933、131245，新疆維吾爾藥業(yè)有限責(zé)任公司)；甲醇為色譜純(美國(guó)TEDIA試劑公司)；水為重蒸餾水；其它試劑均為分析純。所有色譜用試劑均用0.45gm微孔濾膜過(guò)濾。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱Inertsil ODS-SP(250×4.6mm 5μm)；流動(dòng)相：甲醇-5%甲醇溶液(50∶50)；流速1mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：290 nm；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：l0μL；分析方法：外標(biāo)法[2]。

2.2 溶液的制備 精密稱取桂皮醛對(duì)照品0.100 39g，置100mL容量瓶中，加流動(dòng)相解制成每1mL中含1.003 9mg的溶液，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液，精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液10mL置100mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，制成每1mL中含0.100 39mg的溶液作為對(duì)照品溶液。取樣品1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入流動(dòng)相50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率50kHz)30min，擦干，放冷，再稱定重量，用流動(dòng)相補(bǔ)足減失的重量，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液即得供試品溶液。按散寒藥茶原標(biāo)準(zhǔn)的處方、工藝制備不含桂皮醛的陰性對(duì)照樣品，按供試品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 專屬性試驗(yàn) 分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照溶液，在“2.1項(xiàng)”的色譜條件下測(cè)定。結(jié)果：供試品溶液相應(yīng)色譜峰與對(duì)照品桂皮醛一致。桂皮醛對(duì)照品保留時(shí)間為11.9min，理論塔板數(shù)大于10 000。陰性對(duì)照溶液無(wú)相應(yīng)的色譜峰出現(xiàn)。

2.3.2 線性關(guān)系考察 精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液(1.003 9mg·mL-1)1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0mL，分別置100mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，分別取10μL，按“2.1項(xiàng)”色譜條件下操作，以7次測(cè)定的峰面積平均值。以峰面積A為縱坐標(biāo)，桂皮醛對(duì)照品溶液濃度(μg·mL-1)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為：A=103 128C+152 182，r=0．999.5(n=7)。結(jié)果表明，桂皮醛進(jìn)樣量在10.0～250.9μg范圍為與峰面積線性關(guān)系良好。

2.3.3 精密度實(shí)驗(yàn) 精密量取對(duì)照品溶液儲(chǔ)備液(1.003 9mg·mL-1)10mL置100mL量瓶中加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，取10μl，重復(fù)進(jìn)樣5次，以峰面積計(jì)算RSD(n=5) 為0.72%。說(shuō)明本法及儀器精密度良好。

2.3.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取同一批號(hào)本品(批號(hào)為131 245)，按“2.2項(xiàng)”方法配制溶液，分別于0、1、2、4、6h進(jìn)樣，進(jìn)樣量為10μl，測(cè)定桂皮醛的峰面積，RSD為1.4%，表明峰面積基本無(wú)變化，說(shuō)明供試品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.5 加樣回收率 精密量取已知含量的樣品(批號(hào)為131245，桂皮醛含量5.327mg·g-1)稱取1g，精密稱定，置50mL容量瓶中，精密加入桂皮醛對(duì)照品溶液儲(chǔ)備液(濃度為1.003 9mg·mL-1)5mL，再加流動(dòng)相適量密塞，超聲處理(功率250W，頻率50kHz)30min，放冷，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為加樣回收率樣品。同法制備8份加樣回收率樣品。按照樣品測(cè)定項(xiàng)下的方法測(cè)定含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=8)

2．4 樣品測(cè)定 取3批樣品按“2.2項(xiàng)”方法制備供試品溶液，按“2.1項(xiàng)”色譜條件下測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算桂皮醛的含量。結(jié)果見表2。

表2 散寒藥茶中桂皮醛的含量測(cè)定結(jié)果(n=3)

3 討論

3．1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 取桂皮醛對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋成0.1mg·mL-1溶液，用紫外可見分光光度計(jì)于200～400nm處進(jìn)行掃描，從其紫外圖譜中可見其在225nm、288nm處有最大吸收，雖然在225nm處吸收比較強(qiáng)，但是干擾也比較大。故選擇參考文獻(xiàn)[2]中所規(guī)定的波長(zhǎng)(290nm)為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2 流動(dòng)相的選擇[3]參考文獻(xiàn)報(bào)道的方法試驗(yàn)，流動(dòng)相用甲醇-水(65：35)[3]，甲醇-水(58：42)[4]，由于散寒藥茶處方中有十多味藥材，雜峰較多，桂皮醛的分離效果不佳，通過(guò)不斷改變甲醇與水的比例及流速，選定甲醇-5%甲醇溶液(50：50)及流速1mL·min-1比較合適，分離度及保留時(shí)間適宜，故選擇甲醇-5%甲醇溶液(50：50)為流動(dòng)相。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)不同批號(hào)的散寒藥茶，在不同的時(shí)間(30min，60min)進(jìn)行超聲處理進(jìn)行測(cè)定，均能檢出桂皮醛，其含量無(wú)明顯差異，所以選擇超聲處理30min。通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究，建立了散寒藥茶桂皮醛含量的測(cè)定方法，方法簡(jiǎn)便，快速，重現(xiàn)性好，結(jié)果準(zhǔn)確，可作為散寒藥茶的質(zhì)量控制方法。

[1]藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(維吾爾藥分冊(cè))[S].1998：155.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：4.

[3]余小平.高效液相色譜法測(cè)定丁香中丁香酚的含量[J].中國(guó)藥物分析雜志，2008，28(6)：975-976.

[4]吳軍俠，趙紅俠.高效液相色譜法測(cè)定蒙藥暖宮七味散中丁香酚含量[J].中國(guó)藥業(yè)，2010，19(5)：31-32.

DeterminationofCinnamicaldehydeinUygurMedicinePreparationSanhanyaochabyHPLC

Simayijiang Abudurexiti1,Adilijiang Rejiapu2,maimaisidike taiwaikuli1

1.Kashi Institute for Drog Control，Kashi 844000，China；2.Department of pharmacy,North Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region people′s Hospital，urmqi 830000，China

ObjectiveTo establish the determination method for Cinnamic aldehyde in sanhan yaocha .MethodsUsing HPLC with mobile phase of methanol,5% methanol solution (50∶50);the flow rate was lmL·min-1;the detection wavelength of 290 nm;column temperature: 25 ℃; sample size: l0 μ L; analysis method: the external standard method.ResultsCinnamic aldehyde. in 10.0～250.9μg· mL-1range of good linearity(r= 0.9995), method precision was RSD=0.72%(n=5), the average recovery was 97.34%, RSD was 1.84% (n=8).ConclusionsThe method is simple, accurate, stable and reproducible results, can be used as the quality control of the preparation method.

Sanhan yaocha;Cinnamic aldehyde;HPLC;content determination

司馬義江·阿布都熱西提 (1973-)，男，大學(xué)本科，副主任藥師，E-mail：simayi1102@126.com

R284.1

A

1007-8517(2014)11-0018-02

2014.04.16)