張妮+何磊磊+余正文

摘要:采用原子熒光光度法測(cè)定了梵凈山顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata)葉及生長(zhǎng)土壤中硒含量?結(jié)果表明,生長(zhǎng)在該地區(qū)的顯齒蛇葡萄葉中硒含量大多在100 μg/kg以下,未達(dá)到富硒茶的標(biāo)準(zhǔn);而土壤中硒含量大多高于100 μg/kg?顯齒蛇葡萄葉中硒含量與相對(duì)應(yīng)的土壤中的硒含量之間無相關(guān)性?

關(guān)鍵詞:硒;顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata);土壤;原子熒光光度法;

中圖分類號(hào):O657.31文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2014)11-2642-02

Contents of Selenium in Leaves of Ampelosis grossedentata and the

Soil from Fanjing Mountains

ZHANG Ni,HE Lei-lei,YU Zheng-wen

(School of Life Sciences, Guizhou Normol University, Guiyang 550001, China)

Abstract: The contents of selenium in leaves of Ampelosis grossedentata and the soil from Fanjing mountains were investigated with atomic fluorescence spectrometric method. The results showed that the contents of selenium in most of leaves of Ampelosis grossedentata grown in the area was under 100 μg/kg, not meeting the criteria of Se-enriched tea. The contents of selenium in the plant soil was above 100 μg/kg. There was no correlation between the contents of selenium in Leaves of Ampelosis grossedentata and in the plant soil.

Key words: selenium;Ampelosis grossedentata;soil;fluorometric method

基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31060056);貴州省中藥現(xiàn)代化專項(xiàng)[黔科合中藥字(2011)5046號(hào)];貴州省科技基金項(xiàng)目[黔科合J字(2011)2368號(hào)];貴州省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目[黔科合計(jì)Z字(2011)4005號(hào)]

顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata)的嫩莖葉經(jīng)加工揉制?干燥而成藤茶,味甘?淡?性涼,具有清熱解毒?祛風(fēng)濕?治療感冒?防中暑等作用[1]?該植物主要分布在廣東?廣西?云南?貴州?湖南?江西?福建等地區(qū)[2]?硒是環(huán)境中的一種重要微量元素,是人體的必需微量元素[3]?硒是谷胱甘肽過氧化物酶的重要組成部分,谷胱甘肽過氧化物酶參與人體的氧化過程,可阻止不飽和酸的氧化,可防止因氧化而引起的人體組織老化和硬化;避免人體產(chǎn)生有毒的代謝物,從而大大減少癌癥的誘發(fā)物質(zhì),維持人體正常代謝[4,5]?研究證明,富硒茶能夠誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞正常分化,具有預(yù)防原發(fā)性肝癌的作用,還可以降低胃癌發(fā)生的幾率?硒在抗氧化?清除自由基?提高機(jī)體免疫力等方面具有重要意義[6]?研究結(jié)果還表明,硒可以通過促進(jìn)抗氧化酶活性提高藤茶的抗逆?抗衰老能力,通過促進(jìn)物質(zhì)合成提高黃酮?蛋白質(zhì)?多糖和氨基酸等有效成分的含量,從而提高藤茶品質(zhì)[7]?

貴州省梵凈山有野生和仿野生栽培顯齒蛇葡萄的傳統(tǒng),但對(duì)于當(dāng)?shù)仫@齒蛇葡萄葉和土壤中硒含量的相關(guān)性尚未研究?本研究通過熒光光度法[8]測(cè)定貴州梵凈山顯齒蛇葡萄葉及其生長(zhǎng)地土壤中的硒含量,并分析兩者之間的相關(guān)性,旨在為富硒茶的開發(fā)利用提供依據(jù)?

1材料與方法

1.1材料

1.1.1供試材料樣品于2011年7月中旬采自貴州省江口縣不同鄉(xiāng)鎮(zhèn),由乙引教授鑒定為顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata(Hand.-Mazz.) W.T.Wang)的嫩葉,植物標(biāo)本存放在貴州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院天然產(chǎn)物研究室,標(biāo)本號(hào)為1-31;土壤樣品采自于1-31號(hào)顯齒蛇葡萄葉樣品相對(duì)應(yīng)的根部土壤?

1.1.2主要儀器101-1AB型烘箱(天津市泰斯特儀器有限公司);LX-02型多功能粉碎機(jī)(上海江信科技有限公司);A2003N型分析天平(上海江儀儀器有限公司);101-3AB型電熱鼓風(fēng)干燥箱(天津市泰斯特儀器有限公司);PHSJ-4型酸度計(jì)(上海雷磁儀器有限公司);RF-540型熒光分光光度計(jì)(日本島津公司)?

1.1.3試劑硒標(biāo)準(zhǔn)溶液?DAN(1.0 g/L)?去硒硫酸?EDTA溶液?氨水?濃鹽酸?環(huán)己烷,上述試劑均為分析純?

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備準(zhǔn)確量取0.05 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)硒溶液0.0?0.2?1.0?2.0?4.0 mL,加水至5.0 mL后,按試樣測(cè)定步驟同時(shí)進(jìn)行測(cè)定?通過硒標(biāo)準(zhǔn)曲線得出回歸方程?

1.2.2植株供試品溶液的制備選取顯齒蛇葡萄的葉片,用蒸餾水沖洗3次后,用紗布吸取水滴,切碎,取一定量試樣在鼓風(fēng)干燥箱中于60 ℃烘干,磨成粉后過40目篩,保存?zhèn)溆?稱0.7~1.0 g樣品于磨口錐形瓶?jī)?nèi),加20 mL的混合酸放置過夜,次日置沙浴上緩慢加熱?當(dāng)劇烈反應(yīng)發(fā)生后,溶液呈無色,繼續(xù)加熱至白煙產(chǎn)生,此時(shí)溶液逐漸變成淡黃色,即達(dá)終點(diǎn)?將上述消化后的試樣溶液加入20 mL EDTA溶液,用鹽酸溶液調(diào)至淡紅橙色(pH 1.5~2.0)?以下步驟在暗室操作:加DAN試劑3 mL,混勻后,置于暗處1 h,加環(huán)己烷5.0 mL,振搖4 min,靜置數(shù)分鐘,取環(huán)己烷溶液為葉片提取溶液?

1.2.3植株中硒含量測(cè)定用膠頭滴管吸收上層的環(huán)己烷于1 cm比色皿,在熒光分光光度計(jì)上用激發(fā)光波長(zhǎng)376 nm?發(fā)射光波長(zhǎng)為520 nm測(cè)定硒的熒光強(qiáng)度(樣品平行測(cè)定3次)?通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中硒的含量?

1.2.4土壤中硒含量的測(cè)定土壤樣品按“1.2.2”的方法制備,硒含量測(cè)定按“1.2.3”的方法進(jìn)行?

2結(jié)果與分析

2.1顯齒蛇葡萄葉及土壤中硒含量測(cè)定結(jié)果

顯齒蛇葡萄葉中硒的含量除怒溪河口為130 μg/kg外,其余均低于100 μg/kg(表1)?根據(jù)中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 600-2002),茶葉中硒在250~400 mg/kg時(shí)為富硒茶,表明顯齒蛇葡萄葉沒有達(dá)到富硒茶的標(biāo)準(zhǔn)?

2.2顯齒蛇葡萄葉及土壤中硒含量相關(guān)性分析

有研究表明,植物體內(nèi)的含硒量取決于諸多因素,如植物種類?土壤類型及其有效硒含量?環(huán)境因子?農(nóng)業(yè)措施和化學(xué)形態(tài)等[9]?陳玉瓊等[10]的研究表明,湖北恩施州來鳳縣的藤茶中硒含量為0.3~5.0 mg/kg,而該地區(qū)的土壤中硒的平均含量為4.06±1.24 mg/kg,其存在狀態(tài)以有機(jī)結(jié)合態(tài)硒及元素硒為主[11]?梵凈山顯齒蛇葡萄葉及其生長(zhǎng)土壤中的硒含量均不高,且二者無相關(guān)性(圖1),這可能與該地區(qū)土壤中硒的存在狀態(tài)有關(guān)?

3結(jié)論與討論

梵凈山顯齒蛇葡萄葉中硒含量最高為0.13 mg/kg,未達(dá)到富硒茶的標(biāo)準(zhǔn)[12];另外這些植物所生長(zhǎng)的土壤中的硒含量也普遍較低?顯齒蛇葡萄葉與土壤中硒的含量之間無相關(guān)性,這可能與該地區(qū)土壤中硒的存在狀態(tài)有關(guān)?

參考文獻(xiàn):

[1] 全國(guó)中草藥匯編編寫組.全國(guó)中草藥匯編(下冊(cè))[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997.

[2]中國(guó)科學(xué)院研究所.中國(guó)高等植物圖鑒(第二冊(cè))[M].北京:科學(xué)出版社,1979.

[3] 曾靜,羅海吉.微量元素硒的研究進(jìn)展[J].微量元素與健康研究.2003,20(2):52-56.

[4] 張大偉,雷啟云.氫化物原子吸收法測(cè)定茶葉中的硒[J].中國(guó)茶葉,2008(8):31-32.

[5] 李麗輝,林親錄,陳海軍.硒的生理學(xué)功能及富硒強(qiáng)化食品的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代食品科技,2005,21(3):198-200.

[6] 胡曉翠.原子熒光法測(cè)定茶葉中的微量硒[J].農(nóng)技服務(wù),2010(3):

351,360.

[7]雷紅靈,陸海波,蔡金洲,等.硒對(duì)藤茶抗氧化酶活性及有效成分的影響[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2010,29(3):321-325.

[8] 張邦喜,張勇,付文軍,等.貴陽(yáng)市兩個(gè)鄉(xiāng)葉菜類蔬菜中硒含量的特征分析[J].現(xiàn)代食品科技,2011,27(7):867-869.

[9] 李應(yīng)生,李亞男,陳大清,等.硒的生物學(xué)功能及植物的富硒機(jī)理[J].湖北農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),2003,23(6):476-480.

[10] 陳玉瓊,向班貴,倪德江,等.恩施富硒藤茶安全性毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究[J].茶葉科學(xué),2005,25(3):295-299.

[11] 秦海波,朱建明,李璐,等.鄂西南恩施高硒土壤中硒的結(jié)合態(tài)與自然硒[J].礦物巖石地球化學(xué)通報(bào),2007,26(Z1):568-570.

[12] 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社第一編輯室.茶葉標(biāo)準(zhǔn)匯編[M].第四版.北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2011.

摘要:采用原子熒光光度法測(cè)定了梵凈山顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata)葉及生長(zhǎng)土壤中硒含量?結(jié)果表明,生長(zhǎng)在該地區(qū)的顯齒蛇葡萄葉中硒含量大多在100 μg/kg以下,未達(dá)到富硒茶的標(biāo)準(zhǔn);而土壤中硒含量大多高于100 μg/kg?顯齒蛇葡萄葉中硒含量與相對(duì)應(yīng)的土壤中的硒含量之間無相關(guān)性?

關(guān)鍵詞:硒;顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata);土壤;原子熒光光度法;

中圖分類號(hào):O657.31文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2014)11-2642-02

Contents of Selenium in Leaves of Ampelosis grossedentata and the

Soil from Fanjing Mountains

ZHANG Ni,HE Lei-lei,YU Zheng-wen

(School of Life Sciences, Guizhou Normol University, Guiyang 550001, China)

Abstract: The contents of selenium in leaves of Ampelosis grossedentata and the soil from Fanjing mountains were investigated with atomic fluorescence spectrometric method. The results showed that the contents of selenium in most of leaves of Ampelosis grossedentata grown in the area was under 100 μg/kg, not meeting the criteria of Se-enriched tea. The contents of selenium in the plant soil was above 100 μg/kg. There was no correlation between the contents of selenium in Leaves of Ampelosis grossedentata and in the plant soil.

Key words: selenium;Ampelosis grossedentata;soil;fluorometric method

基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31060056);貴州省中藥現(xiàn)代化專項(xiàng)[黔科合中藥字(2011)5046號(hào)];貴州省科技基金項(xiàng)目[黔科合J字(2011)2368號(hào)];貴州省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目[黔科合計(jì)Z字(2011)4005號(hào)]

顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata)的嫩莖葉經(jīng)加工揉制?干燥而成藤茶,味甘?淡?性涼,具有清熱解毒?祛風(fēng)濕?治療感冒?防中暑等作用[1]?該植物主要分布在廣東?廣西?云南?貴州?湖南?江西?福建等地區(qū)[2]?硒是環(huán)境中的一種重要微量元素,是人體的必需微量元素[3]?硒是谷胱甘肽過氧化物酶的重要組成部分,谷胱甘肽過氧化物酶參與人體的氧化過程,可阻止不飽和酸的氧化,可防止因氧化而引起的人體組織老化和硬化;避免人體產(chǎn)生有毒的代謝物,從而大大減少癌癥的誘發(fā)物質(zhì),維持人體正常代謝[4,5]?研究證明,富硒茶能夠誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞正常分化,具有預(yù)防原發(fā)性肝癌的作用,還可以降低胃癌發(fā)生的幾率?硒在抗氧化?清除自由基?提高機(jī)體免疫力等方面具有重要意義[6]?研究結(jié)果還表明,硒可以通過促進(jìn)抗氧化酶活性提高藤茶的抗逆?抗衰老能力,通過促進(jìn)物質(zhì)合成提高黃酮?蛋白質(zhì)?多糖和氨基酸等有效成分的含量,從而提高藤茶品質(zhì)[7]?

貴州省梵凈山有野生和仿野生栽培顯齒蛇葡萄的傳統(tǒng),但對(duì)于當(dāng)?shù)仫@齒蛇葡萄葉和土壤中硒含量的相關(guān)性尚未研究?本研究通過熒光光度法[8]測(cè)定貴州梵凈山顯齒蛇葡萄葉及其生長(zhǎng)地土壤中的硒含量,并分析兩者之間的相關(guān)性,旨在為富硒茶的開發(fā)利用提供依據(jù)?

1材料與方法

1.1材料

1.1.1供試材料樣品于2011年7月中旬采自貴州省江口縣不同鄉(xiāng)鎮(zhèn),由乙引教授鑒定為顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata(Hand.-Mazz.) W.T.Wang)的嫩葉,植物標(biāo)本存放在貴州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院天然產(chǎn)物研究室,標(biāo)本號(hào)為1-31;土壤樣品采自于1-31號(hào)顯齒蛇葡萄葉樣品相對(duì)應(yīng)的根部土壤?

1.1.2主要儀器101-1AB型烘箱(天津市泰斯特儀器有限公司);LX-02型多功能粉碎機(jī)(上海江信科技有限公司);A2003N型分析天平(上海江儀儀器有限公司);101-3AB型電熱鼓風(fēng)干燥箱(天津市泰斯特儀器有限公司);PHSJ-4型酸度計(jì)(上海雷磁儀器有限公司);RF-540型熒光分光光度計(jì)(日本島津公司)?

1.1.3試劑硒標(biāo)準(zhǔn)溶液?DAN(1.0 g/L)?去硒硫酸?EDTA溶液?氨水?濃鹽酸?環(huán)己烷,上述試劑均為分析純?

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備準(zhǔn)確量取0.05 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)硒溶液0.0?0.2?1.0?2.0?4.0 mL,加水至5.0 mL后,按試樣測(cè)定步驟同時(shí)進(jìn)行測(cè)定?通過硒標(biāo)準(zhǔn)曲線得出回歸方程?

1.2.2植株供試品溶液的制備選取顯齒蛇葡萄的葉片,用蒸餾水沖洗3次后,用紗布吸取水滴,切碎,取一定量試樣在鼓風(fēng)干燥箱中于60 ℃烘干,磨成粉后過40目篩,保存?zhèn)溆?稱0.7~1.0 g樣品于磨口錐形瓶?jī)?nèi),加20 mL的混合酸放置過夜,次日置沙浴上緩慢加熱?當(dāng)劇烈反應(yīng)發(fā)生后,溶液呈無色,繼續(xù)加熱至白煙產(chǎn)生,此時(shí)溶液逐漸變成淡黃色,即達(dá)終點(diǎn)?將上述消化后的試樣溶液加入20 mL EDTA溶液,用鹽酸溶液調(diào)至淡紅橙色(pH 1.5~2.0)?以下步驟在暗室操作:加DAN試劑3 mL,混勻后,置于暗處1 h,加環(huán)己烷5.0 mL,振搖4 min,靜置數(shù)分鐘,取環(huán)己烷溶液為葉片提取溶液?

1.2.3植株中硒含量測(cè)定用膠頭滴管吸收上層的環(huán)己烷于1 cm比色皿,在熒光分光光度計(jì)上用激發(fā)光波長(zhǎng)376 nm?發(fā)射光波長(zhǎng)為520 nm測(cè)定硒的熒光強(qiáng)度(樣品平行測(cè)定3次)?通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中硒的含量?

1.2.4土壤中硒含量的測(cè)定土壤樣品按“1.2.2”的方法制備,硒含量測(cè)定按“1.2.3”的方法進(jìn)行?

2結(jié)果與分析

2.1顯齒蛇葡萄葉及土壤中硒含量測(cè)定結(jié)果

顯齒蛇葡萄葉中硒的含量除怒溪河口為130 μg/kg外,其余均低于100 μg/kg(表1)?根據(jù)中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 600-2002),茶葉中硒在250~400 mg/kg時(shí)為富硒茶,表明顯齒蛇葡萄葉沒有達(dá)到富硒茶的標(biāo)準(zhǔn)?

2.2顯齒蛇葡萄葉及土壤中硒含量相關(guān)性分析

有研究表明,植物體內(nèi)的含硒量取決于諸多因素,如植物種類?土壤類型及其有效硒含量?環(huán)境因子?農(nóng)業(yè)措施和化學(xué)形態(tài)等[9]?陳玉瓊等[10]的研究表明,湖北恩施州來鳳縣的藤茶中硒含量為0.3~5.0 mg/kg,而該地區(qū)的土壤中硒的平均含量為4.06±1.24 mg/kg,其存在狀態(tài)以有機(jī)結(jié)合態(tài)硒及元素硒為主[11]?梵凈山顯齒蛇葡萄葉及其生長(zhǎng)土壤中的硒含量均不高,且二者無相關(guān)性(圖1),這可能與該地區(qū)土壤中硒的存在狀態(tài)有關(guān)?

3結(jié)論與討論

梵凈山顯齒蛇葡萄葉中硒含量最高為0.13 mg/kg,未達(dá)到富硒茶的標(biāo)準(zhǔn)[12];另外這些植物所生長(zhǎng)的土壤中的硒含量也普遍較低?顯齒蛇葡萄葉與土壤中硒的含量之間無相關(guān)性,這可能與該地區(qū)土壤中硒的存在狀態(tài)有關(guān)?

參考文獻(xiàn):

[1] 全國(guó)中草藥匯編編寫組.全國(guó)中草藥匯編(下冊(cè))[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997.

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[4] 張大偉,雷啟云.氫化物原子吸收法測(cè)定茶葉中的硒[J].中國(guó)茶葉,2008(8):31-32.

[5] 李麗輝,林親錄,陳海軍.硒的生理學(xué)功能及富硒強(qiáng)化食品的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代食品科技,2005,21(3):198-200.

[6] 胡曉翠.原子熒光法測(cè)定茶葉中的微量硒[J].農(nóng)技服務(wù),2010(3):

351,360.

[7]雷紅靈,陸海波,蔡金洲,等.硒對(duì)藤茶抗氧化酶活性及有效成分的影響[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2010,29(3):321-325.

[8] 張邦喜,張勇,付文軍,等.貴陽(yáng)市兩個(gè)鄉(xiāng)葉菜類蔬菜中硒含量的特征分析[J].現(xiàn)代食品科技,2011,27(7):867-869.

[9] 李應(yīng)生,李亞男,陳大清,等.硒的生物學(xué)功能及植物的富硒機(jī)理[J].湖北農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),2003,23(6):476-480.

[10] 陳玉瓊,向班貴,倪德江,等.恩施富硒藤茶安全性毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究[J].茶葉科學(xué),2005,25(3):295-299.

[11] 秦海波,朱建明,李璐,等.鄂西南恩施高硒土壤中硒的結(jié)合態(tài)與自然硒[J].礦物巖石地球化學(xué)通報(bào),2007,26(Z1):568-570.

[12] 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社第一編輯室.茶葉標(biāo)準(zhǔn)匯編[M].第四版.北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2011.

摘要:采用原子熒光光度法測(cè)定了梵凈山顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata)葉及生長(zhǎng)土壤中硒含量?結(jié)果表明,生長(zhǎng)在該地區(qū)的顯齒蛇葡萄葉中硒含量大多在100 μg/kg以下,未達(dá)到富硒茶的標(biāo)準(zhǔn);而土壤中硒含量大多高于100 μg/kg?顯齒蛇葡萄葉中硒含量與相對(duì)應(yīng)的土壤中的硒含量之間無相關(guān)性?

關(guān)鍵詞:硒;顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata);土壤;原子熒光光度法;

中圖分類號(hào):O657.31文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2014)11-2642-02

Contents of Selenium in Leaves of Ampelosis grossedentata and the

Soil from Fanjing Mountains

ZHANG Ni,HE Lei-lei,YU Zheng-wen

(School of Life Sciences, Guizhou Normol University, Guiyang 550001, China)

Abstract: The contents of selenium in leaves of Ampelosis grossedentata and the soil from Fanjing mountains were investigated with atomic fluorescence spectrometric method. The results showed that the contents of selenium in most of leaves of Ampelosis grossedentata grown in the area was under 100 μg/kg, not meeting the criteria of Se-enriched tea. The contents of selenium in the plant soil was above 100 μg/kg. There was no correlation between the contents of selenium in Leaves of Ampelosis grossedentata and in the plant soil.

Key words: selenium;Ampelosis grossedentata;soil;fluorometric method

基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31060056);貴州省中藥現(xiàn)代化專項(xiàng)[黔科合中藥字(2011)5046號(hào)];貴州省科技基金項(xiàng)目[黔科合J字(2011)2368號(hào)];貴州省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目[黔科合計(jì)Z字(2011)4005號(hào)]

顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata)的嫩莖葉經(jīng)加工揉制?干燥而成藤茶,味甘?淡?性涼,具有清熱解毒?祛風(fēng)濕?治療感冒?防中暑等作用[1]?該植物主要分布在廣東?廣西?云南?貴州?湖南?江西?福建等地區(qū)[2]?硒是環(huán)境中的一種重要微量元素,是人體的必需微量元素[3]?硒是谷胱甘肽過氧化物酶的重要組成部分,谷胱甘肽過氧化物酶參與人體的氧化過程,可阻止不飽和酸的氧化,可防止因氧化而引起的人體組織老化和硬化;避免人體產(chǎn)生有毒的代謝物,從而大大減少癌癥的誘發(fā)物質(zhì),維持人體正常代謝[4,5]?研究證明,富硒茶能夠誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞正常分化,具有預(yù)防原發(fā)性肝癌的作用,還可以降低胃癌發(fā)生的幾率?硒在抗氧化?清除自由基?提高機(jī)體免疫力等方面具有重要意義[6]?研究結(jié)果還表明,硒可以通過促進(jìn)抗氧化酶活性提高藤茶的抗逆?抗衰老能力,通過促進(jìn)物質(zhì)合成提高黃酮?蛋白質(zhì)?多糖和氨基酸等有效成分的含量,從而提高藤茶品質(zhì)[7]?

貴州省梵凈山有野生和仿野生栽培顯齒蛇葡萄的傳統(tǒng),但對(duì)于當(dāng)?shù)仫@齒蛇葡萄葉和土壤中硒含量的相關(guān)性尚未研究?本研究通過熒光光度法[8]測(cè)定貴州梵凈山顯齒蛇葡萄葉及其生長(zhǎng)地土壤中的硒含量,并分析兩者之間的相關(guān)性,旨在為富硒茶的開發(fā)利用提供依據(jù)?

1材料與方法

1.1材料

1.1.1供試材料樣品于2011年7月中旬采自貴州省江口縣不同鄉(xiāng)鎮(zhèn),由乙引教授鑒定為顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata(Hand.-Mazz.) W.T.Wang)的嫩葉,植物標(biāo)本存放在貴州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院天然產(chǎn)物研究室,標(biāo)本號(hào)為1-31;土壤樣品采自于1-31號(hào)顯齒蛇葡萄葉樣品相對(duì)應(yīng)的根部土壤?

1.1.2主要儀器101-1AB型烘箱(天津市泰斯特儀器有限公司);LX-02型多功能粉碎機(jī)(上海江信科技有限公司);A2003N型分析天平(上海江儀儀器有限公司);101-3AB型電熱鼓風(fēng)干燥箱(天津市泰斯特儀器有限公司);PHSJ-4型酸度計(jì)(上海雷磁儀器有限公司);RF-540型熒光分光光度計(jì)(日本島津公司)?

1.1.3試劑硒標(biāo)準(zhǔn)溶液?DAN(1.0 g/L)?去硒硫酸?EDTA溶液?氨水?濃鹽酸?環(huán)己烷,上述試劑均為分析純?

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備準(zhǔn)確量取0.05 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)硒溶液0.0?0.2?1.0?2.0?4.0 mL,加水至5.0 mL后,按試樣測(cè)定步驟同時(shí)進(jìn)行測(cè)定?通過硒標(biāo)準(zhǔn)曲線得出回歸方程?

1.2.2植株供試品溶液的制備選取顯齒蛇葡萄的葉片,用蒸餾水沖洗3次后,用紗布吸取水滴,切碎,取一定量試樣在鼓風(fēng)干燥箱中于60 ℃烘干,磨成粉后過40目篩,保存?zhèn)溆?稱0.7~1.0 g樣品于磨口錐形瓶?jī)?nèi),加20 mL的混合酸放置過夜,次日置沙浴上緩慢加熱?當(dāng)劇烈反應(yīng)發(fā)生后,溶液呈無色,繼續(xù)加熱至白煙產(chǎn)生,此時(shí)溶液逐漸變成淡黃色,即達(dá)終點(diǎn)?將上述消化后的試樣溶液加入20 mL EDTA溶液,用鹽酸溶液調(diào)至淡紅橙色(pH 1.5~2.0)?以下步驟在暗室操作:加DAN試劑3 mL,混勻后,置于暗處1 h,加環(huán)己烷5.0 mL,振搖4 min,靜置數(shù)分鐘,取環(huán)己烷溶液為葉片提取溶液?

1.2.3植株中硒含量測(cè)定用膠頭滴管吸收上層的環(huán)己烷于1 cm比色皿,在熒光分光光度計(jì)上用激發(fā)光波長(zhǎng)376 nm?發(fā)射光波長(zhǎng)為520 nm測(cè)定硒的熒光強(qiáng)度(樣品平行測(cè)定3次)?通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中硒的含量?

1.2.4土壤中硒含量的測(cè)定土壤樣品按“1.2.2”的方法制備,硒含量測(cè)定按“1.2.3”的方法進(jìn)行?

2結(jié)果與分析

2.1顯齒蛇葡萄葉及土壤中硒含量測(cè)定結(jié)果

顯齒蛇葡萄葉中硒的含量除怒溪河口為130 μg/kg外,其余均低于100 μg/kg(表1)?根據(jù)中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 600-2002),茶葉中硒在250~400 mg/kg時(shí)為富硒茶,表明顯齒蛇葡萄葉沒有達(dá)到富硒茶的標(biāo)準(zhǔn)?

2.2顯齒蛇葡萄葉及土壤中硒含量相關(guān)性分析

有研究表明,植物體內(nèi)的含硒量取決于諸多因素,如植物種類?土壤類型及其有效硒含量?環(huán)境因子?農(nóng)業(yè)措施和化學(xué)形態(tài)等[9]?陳玉瓊等[10]的研究表明,湖北恩施州來鳳縣的藤茶中硒含量為0.3~5.0 mg/kg,而該地區(qū)的土壤中硒的平均含量為4.06±1.24 mg/kg,其存在狀態(tài)以有機(jī)結(jié)合態(tài)硒及元素硒為主[11]?梵凈山顯齒蛇葡萄葉及其生長(zhǎng)土壤中的硒含量均不高,且二者無相關(guān)性(圖1),這可能與該地區(qū)土壤中硒的存在狀態(tài)有關(guān)?

3結(jié)論與討論

梵凈山顯齒蛇葡萄葉中硒含量最高為0.13 mg/kg,未達(dá)到富硒茶的標(biāo)準(zhǔn)[12];另外這些植物所生長(zhǎng)的土壤中的硒含量也普遍較低?顯齒蛇葡萄葉與土壤中硒的含量之間無相關(guān)性,這可能與該地區(qū)土壤中硒的存在狀態(tài)有關(guān)?

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