譚玉琴 張紅芳 樊有賦 彭 琴 詹壽發(fā) 陳 曄

(九江學院藥學與生命科學學院 江西九江 332000)

道地藥材單葉蔓荊內生真菌生態(tài)分布*

譚玉琴 張紅芳 樊有賦 彭 琴 詹壽發(fā) 陳 曄

(九江學院藥學與生命科學學院 江西九江 332000)

文章研究不同產地單葉蔓荊內生真菌生態(tài)分布，結果顯示，從不同產地單葉蔓荊植株中分離獲得內生真菌257株，分別屬于4綱5目6科26屬。研究發(fā)現(xiàn)不同產地單葉蔓荊內生真菌的種類與分布均存在差異，以江西都昌多寶產單葉蔓荊內生真菌的生物多樣性最為豐富，共67株，而廣東汕頭產單葉蔓荊植株中分離獲得內生真菌最少；不同地理條件和生長環(huán)境的單葉蔓荊內生真菌種類和分布存在差異，從湖濱沙灘荒洲產單葉蔓荊分得內生真菌菌株數最多，湖中沙灘荒洲產單葉蔓荊分得內生真菌菌株最少。該研究為揭示單葉蔓荊內生真菌對其藥用品質的形成，探討內生真菌與單葉蔓荊道地藥材相關性提供依據。

產地，單葉蔓荊，內生真菌，生態(tài)分布

單葉蔓荊(Vitex trifolia )為馬鞭草科牡荊屬多年生落葉藤本灌木植物，自然分布于江西、山東、浙江、福建、廣東等沙灘地，具有很強的抗逆能力。單葉蔓荊為傳統(tǒng)中藥，具有疏風散熱，鎮(zhèn)靜止痛，行氣散瘀，清利頭目等功效。單葉蔓荊作為江西地道藥材[1,2]，有關單葉蔓荊道地性研究主要重于外部生態(tài)環(huán)境對其藥材道地性的影響，缺乏對單葉蔓荊內環(huán)境的研究，尤其是植物內生真菌對其藥材優(yōu)良品質的形成研究鮮見報道。筆者以單葉蔓荊為材料，研究不同產地單葉蔓荊內生真菌分布和生態(tài)分布規(guī)律，以期為揭示單葉蔓荊內生真菌對其藥用品質的形成，探討內生真菌與單葉蔓荊道地藥材相關性，將有助于闡明單葉蔓荊道地性的形成機制。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

201 1 年9月-2012年10月于江西都昌多寶、撫州大港、星子蓼花、吳城吉山、新建厚田，廣東汕頭、山東威海等地各采集60株單葉蔓荊健康植株。保存于無菌自封袋中帶回實驗室。供試培養(yǎng)基為PDA固(液體)培養(yǎng)基。

1.2 試驗方法

1.2.1 內生真菌的分離純化、鑒定 按常規(guī)組織分離方法，進行內生真菌的分離純化、鑒定[3-6]。

1.2.2 真菌的多樣性分析 真菌種群的多樣性水平采用Shannon-wiener指數(H)、Pielou均勻度指數(J)和Margalef豐富度指數(R)進行分析[7]。

H=-∑[ni/NLn(ni/N)]；J=H/InS；R=(S-1)/lnN

其中ni為第i個種的個體數目，N為群落中所有種的總個體數，S為每個樣點的物種種數。

2 結果與分析

2.1 不同產地單葉蔓荊內生真菌分布

通過經典組織分離法，從單葉蔓荊1500個組織中分離獲得內生真菌257株，分別屬于4綱5目6科26屬。7個產地的單葉蔓荊植株中，以江西都昌多寶產單葉蔓荊內生真菌的生物多樣性最為豐富，共67株，星子蓼花位居第二，共55株，撫州大港居第三，共47株，不同產地單葉蔓荊內生真菌的種類與分布均存在差異，詳見表1。

表1 不同產地單葉蔓荊內生真菌分布

由表1可知，7種不同產地共有屬青霉屬、葡萄孢屬、叢梗孢屬、鏈格孢屬、擬青霉屬，但分離菌株數不同，曲霉屬和球殼孢屬為江西星子蓼花、都昌多寶、吳城吉山、新建厚田、撫州大港和廣東汕頭等6種產地共有屬。擬青霉屬為江西星子蓼花、都昌多寶、吳城吉山、新建厚田、撫州大港和山東威海等產地共有屬。單端孢屬在江西都昌多寶、星子蓼花、撫州大港、新建厚田、廣東汕頭和山東威海產地分離獲得。盾殼霉屬和根霉屬在江西都昌多寶、星子蓼花、撫州大港、新建厚田、吳城吉山產地分得。毛霉屬、擬莖點霉屬和白絲菌絲無孢子在都昌多寶、星子蓼花、撫州大港、新建厚田產地分離獲得。頭孢屬、痂圓孢屬明枝霉屬和褐色菌絲無孢子類只在都昌多寶、星子蓼花兩產地分離獲得。黑團孢屬在新建厚田、山東威海兩產地分離獲得。膠帚霉屬、盤二孢屬、色串孢屬和毛殼屬等分別只在都昌多寶、新建厚田、廣東汕頭，吳城吉山等產地分離獲得。說明某些菌株表現(xiàn)出一定的地域專一性。

2.2 單葉蔓荊不同生境內生真菌分布

筆者在采樣時發(fā)現(xiàn)單葉蔓荊的生長環(huán)境有4種類型，即湖濱沙灘荒洲、河岸沙灘荒洲，、湖中沙灘荒洲和海邊沙灘荒洲。江西星子蓼花和都昌多寶產單葉蔓荊屬第一種類型，江西新建厚田和撫州大港產單葉蔓荊屬第二種類型，江西吳城吉山產單葉蔓荊屬第三種類型，廣東汕頭和山東威海產單葉蔓荊屬第四種類型。從研究結果可知，不同地理條件和生長環(huán)境的單葉蔓荊內生真菌種類和分布存在差異，從湖濱沙灘荒洲產單葉蔓荊分得內生真菌菌株數最多，共計122株，占總株數的47.47%?？赡苁菃稳~蔓荊主要生長分布在沿鄱陽湖濱地區(qū)，尤以星子縣和都昌縣產量大、歷史久、質量優(yōu)。故從兩地產的單葉蔓荊分得內生真菌最多。其次為河岸沙灘荒洲產單葉蔓荊分得內生真菌菌株數83株，占總數的32.30%。再次是海邊沙灘荒洲產單葉蔓荊分得內生真菌27株，占總數的10.51%。從湖中沙灘荒洲產單葉蔓荊分得內生真菌25株，菌株最少，占總數的9.73%。可見單葉蔓荊內生真菌與其地理條件和生長環(huán)境密切相關。

2.3 不同產地單葉蔓荊內生真菌多樣性分析

由表2可見，不同地區(qū)間的單葉蔓荊內生真菌種群的多樣性水平存在差異，從7個采樣地點分離獲得內生真菌的Shannon-wiene多樣性指數(H)、豐富度指數(R)和Pielou均勻度指數(J)來看，它們從高到低的順序均為，都昌多寶>星子蓼花>撫州大港>新建厚田>吳城吉山>山東威海>廣東汕頭，都昌多寶產的單葉蔓荊內生真菌多樣性指數(H)、豐富度指數(R)和Pielou均勻度指數(J)均最高，分別為1.1397、11.894和0.2711，而廣東汕頭Shannon-wiene多樣性指數(H)、豐富度指數(R)和Pielou均勻度指數(J)最低，真菌種類最少。

表2 不同產地單葉蔓荊內生真菌多樣性指數分析

3 討論

筆者對不同產地單葉蔓荊中內生真菌的種類和分布進行了比較，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)間的單葉蔓荊內生真菌種群的多樣性水平存在差異，其中以江西都昌產單葉蔓荊內生真菌的種類最豐富。不同地理條件和生長環(huán)境的單葉蔓荊內生真菌種類和分布存在差異，從湖濱沙灘荒洲產單葉蔓荊分得內生真菌菌株數最多，湖中沙灘荒洲產單葉蔓荊分得內生真菌菌株最少。因為湖中沙灘荒洲與外界形成自然地理隔離，物種遷入率較低，土壤貧瘠，光照時間較長等，導致根際真菌種類稀少主要因素。而湖濱沙灘荒洲土壤較肥沃、水分充足、林中其它生物物種豐富，為真菌生長提供有利環(huán)境，進一步說明環(huán)境影響內生真菌的種類和數量。

[1]梁芳，周國珍，曹嵐．我國單葉蔓荊藥用植物資源調查[J]．安徽農業(yè)科學，2011，39(35)：21638.

[2]田華，杜婷，黃開合，等．蔓荊子的藥理作用研究進展[J]．中國醫(yī)藥導報，2013，10(9)：29.

[3]何佳，劉笑潔，趙啟美，等．植物內生真菌分離方法的研究[J].食品科學，2009，30(15)：108.

[4]Berg G，Smalla K．Plant species and soil type cooperatively shape the structure and function of microbial communities in the rhizospher[J]．FEMS Microbiology Ecology，2009，68 (1)：1.

[5]魏景超．真菌鑒定手冊[M]．上海：上?？茖W技術出版社，1979.34.

[6]詹壽發(fā)，張紅芳，彭琴，等．單葉蔓荊內生真菌多樣性研究[J]．廣東農業(yè)科學，2012，(20)：18.

(責任編輯胡安娜)

Ecological Distribution of Endophyty Fungi Isolated from Vitex trifolia

TAN Yuqin，ZHANG Hongfang，F(xiàn)AN Youfu，

PENG Qin，ZHAN Shoufa，CHEN Ye

(College of Pharmacewtical and Life Sciences， JiuJiang University， Jiujiang,Jiangxi 332000， China)

The study was about ecological distribution of endophyty fungi isolated from vitex trifolia.The results showed that 257 strains of endophytic fungi were isolated from vitex trifolia in different regions， belonging to 26 genera and 6 famihelies， 5 orders and 4 classes. The study found that the species and distribution of endophytic fungi of vitex trifolia in different regions are various. Jiangxi Duchang had the most abundant biodiversity of endophytic fungi of vitex trifolia where there was a total of 67 strains， while endophytic fungi of vitextrifolia in Guangdong Shantou were isolated by the least. The strains and distributions of endophytic fungi of vitex trifolia from different geographical conditions and the growth environment varied a lot. The maximum number of endophytic fungi strains was from a lakeside beach desert， and the least was from the beach in lake. The study was to reveal medicinal quality formation of the endophytic fungi of vitex trifolia and provided the basis of the correlation between endophytic fungi and genuine medicinal materials.

place of production, vitex trifolia, endophytic fungi, ecological distribution

江西省自然科學基金項目(編號2010GZN0130)的成果之一。

譚玉琴(1965-)，女，學士，副教授，主要從事真菌資源研究。

Q 949.32

A

1674-9545(2014)04-0057-(00)