郭映輝，李貴霞，李文輝，劉澤世，白曉萌(.河北省兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 石家莊 0500；.河北省兒童醫(yī)院急診科，河北 石家莊 0500；.河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 石家莊 0500)

·論著·

新生兒缺氧缺血性腦病血清白細(xì)胞介素18水平動(dòng)態(tài)研究

郭映輝1，李貴霞1，李文輝2，劉澤世3，白曉萌1
(1.河北省兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 石家莊 050031；2.河北省兒童醫(yī)院急診科，河北 石家莊 050031；3.河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 石家莊 050031)

目的在不同患病程度新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)患兒的不同發(fā)病階段，觀察其血清中白細(xì)胞介素18(interleukin-18,IL-18)水平的動(dòng)態(tài)變化，研究此因子與HIE的病因及病程的關(guān)系，探討其對(duì)HIE的診斷、病情監(jiān)測及判斷預(yù)后的意義。方法應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)在相同實(shí)驗(yàn)條件下分別測定對(duì)照組出生第1、3、7天和輕、中、重度組HIE患兒出生第1、3、7天血清中IL-18水平。結(jié)果正常對(duì)照組新生兒出生第1、3、7天血清中IL-18水平分別為(71.08±11.52)、(72.53±11.05)、(71.93±11.30)ng/L；輕度組HIE患兒出生第1、3、7天血清IL-18水平分別為(72.50±4.05)、(76.34±3.60)、(72.39±6.02)ng/L；中度組HIE患兒出生第1、3、7天血清IL-18水平分別為(130.31±9.36)、(149.35±14.34)、(87.81±9.72)ng/L；重度組HIE患兒出生第1、3、7天血清IL-18水平分別為(159.59±15.53)、(189.06±17.20)、(106.78±12.08 )ng/L。結(jié)論IL-18參與了新生兒HIE 的病理生理過程，并與HIE患兒病情的輕重密切相關(guān)；HIE患兒血清IL-18水平與HIE病程密切相關(guān)，隨著HIE病程變化而改變。動(dòng)態(tài)觀測HIE患兒血清IL-18水平變化，有助于HIE的早期診斷、病情監(jiān)測及預(yù)后判斷。

缺氧缺血,腦;白細(xì)胞介素18；腦損傷

新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)是新生兒期常見病，主要是指圍生期窒息導(dǎo)致的缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)，其病情重，臨床出現(xiàn)一系列神經(jīng)系統(tǒng)異常的表現(xiàn)，是新生兒死亡和致殘的重要疾病之一[1]。迄今為止，HIE的發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，目前認(rèn)為再灌注損傷在HIBD中起著更為重要的作用，而炎性反應(yīng)在腦缺血/再灌注損傷中起著關(guān)鍵性的作用[2]。當(dāng)前對(duì)HIE的診斷主要依靠病史、臨床表現(xiàn)和影像學(xué)檢查[3]，沒有一個(gè)定量指標(biāo)，我們選擇參與炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子白細(xì)胞介素18(interleukin-18,IL-18)作為檢測指標(biāo)，觀察其在不同患病程度HIE患兒不同發(fā)病階段血清中IL-18水平的動(dòng)態(tài)變化，研究此因子與HIE的病因及病程的關(guān)系，探討其對(duì)HIE的診斷、病情監(jiān)測及預(yù)后判斷的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇 2008年2月—2009年6月河北省兒童醫(yī)院新生兒科確診的HIE患兒48例，男性28例，女性20例，年齡出生24h以內(nèi),均為足月兒，胎齡37～42周，平均(39.1±0.4)周,平均體質(zhì)量(3.26±0.51)kg；根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)新生兒學(xué)組修訂的“新生兒缺氧缺血性腦病診斷標(biāo)準(zhǔn)”[4]分為輕度組、中度組、重度組各16例。選擇同期分娩的健康足月新生兒20例為健康對(duì)照組，男性12例，女性8例，年齡出生24h以內(nèi),胎齡37～42周，平均(38.9±0.1)周，平均體質(zhì)量(3.15±0.36)kg；均無窒息、感染、出血及神經(jīng)系統(tǒng)疾病等病史。2組間出生年齡、胎齡、出生體質(zhì)量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究已獲醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并簽署家長知情同意書。

1.2 方法：分別在出生第1、3、7天采集HIE各組患兒及對(duì)照組新生兒外周靜脈血3mL，將分離的血清于-70℃保存?zhèn)溆?。?yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法在相同實(shí)驗(yàn)條件下分別測定對(duì)照組出生第1、3、7天以及HIE各組患兒出生第1、3天(急性期)和第7天(恢復(fù)期)血清中IL-18水平。試劑盒購于美國Adlitteram Diagnostic Laboratories Inc公司，操作嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

在出生第1天、第3天和第7天從對(duì)照組到重度組IL-18的水平是逐漸升高的。對(duì)照組在第1、3和7天血清中IL-18水平基本上比較平穩(wěn)，而HIE各組血清中IL-18水平都是第3天升高、第7天降低。4組在組間、時(shí)點(diǎn)間以及組間和時(shí)點(diǎn)間的交互作用差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

組別例數(shù)IL?18第1天第3天第7天對(duì)照組2071．08±11．5272．53±11．0571．93±11．30輕度組1672．50±4．0576．34±3．6072．39±6．02中度組16130．31±9．36149．35±14．3487．81±9．72重度組16159．59±15．53189．06±17．20106．78±12．08組間F=182．470 P<0．01時(shí)點(diǎn)間F=192．370 P<0．01組間·時(shí)點(diǎn)間F=61．478 P<0．01

3 討 論

IL-18是Okamura等于1995年發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，存在于多種器官、組織和細(xì)胞中，主要由巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞產(chǎn)生，是一種重要的前炎性細(xì)胞因子，已被證實(shí)在動(dòng)脈粥樣硬化、急性冠狀動(dòng)脈綜合征、腎缺血、糖尿病腎病致慢性腎衰竭、高血壓等缺血缺氧疾病的級(jí)聯(lián)效應(yīng)中IL-18都發(fā)揮著重要作用[5-7]。IL-18與HIBD的發(fā)生密切相關(guān)，作為一種抗炎因子在對(duì)腦組織起保護(hù)作用的同時(shí)，可能也是一種致炎因子對(duì)腦組織造成損傷[8]。細(xì)胞因子IL-18可能參與了缺血性腦損傷的形成[9]。本研究輕度組HIE患兒血清IL-18呈升高趨勢，中、重度組HIE患兒血清中IL-18明顯升高，這是因?yàn)檩p度HIE患兒腦損傷及腦水腫、炎癥反應(yīng)等都不明顯，故血清IL-18升高不多；而中、重度HIE患兒腦損傷嚴(yán)重，腦組織炎癥反應(yīng)明顯，同時(shí)缺血后腦組織中IL-18的主要細(xì)胞來源是激活的小膠質(zhì)細(xì)胞，因此，腦缺氧缺血發(fā)生時(shí)，膠質(zhì)細(xì)胞分泌的IL-18通過血腦屏障大量進(jìn)入血液循環(huán)，導(dǎo)致血清IL-18明顯升高。這充分說明IL-18參與了HIBD的病理生理過程。IL-18在缺氧缺血后分泌增加，是機(jī)體對(duì)缺氧缺血損傷產(chǎn)生免疫反應(yīng)的結(jié)果[9]。由此可見，對(duì)不同患病程度HIE患兒進(jìn)行血清IL-18水平的測定是早期輔助診斷HIE的一個(gè)重要指標(biāo)。隨著病程延長，恢復(fù)期較急性期血清IL-18水平有所下降，但未降至正常，仍高于對(duì)照組，說明患兒血清中IL-18與HIE病程有關(guān)，IL-18水平伴隨HIE病程的發(fā)展而變化，在HIE發(fā)病的急性期，腦細(xì)胞的炎癥反應(yīng)比較明顯，腦組織的小膠質(zhì)細(xì)胞被較多激活，從而產(chǎn)生更多IL-18。由于得到臨床及時(shí)治療，到HIE恢復(fù)期，各種炎癥反應(yīng)被抑制，腦細(xì)胞得到充足血供和氧供，表現(xiàn)為IL-18水平逐漸下降。因此，IL-18應(yīng)用于監(jiān)測HIE病程將有所幫助。在本研究結(jié)果中，重度組HIE患兒血清中IL-18在任一時(shí)間點(diǎn)(生后1、3、7d)與中度組相應(yīng)時(shí)相比較均增高，說明IL-18作為促損傷因子的表達(dá)與病情有關(guān)，即腦細(xì)胞缺氧缺血程度越嚴(yán)重，IL-18水平升高越明顯。這與王禮周等[10]的研究結(jié)果一致。故測定血清中IL-18水平對(duì)HIE的預(yù)后判斷具有一定的指導(dǎo)意義。

總之，HIBD后神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞破壞，IL-18的釋放增加，從而誘導(dǎo)更多炎癥因子生成破壞腦細(xì)胞并加重腦損傷；同時(shí)IL-18可激活更多免疫細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，直接作用于缺氧缺血的腦細(xì)胞，進(jìn)一步加重缺氧缺血后腦組織的炎癥反應(yīng)，如此互為因果，促使HIBD的發(fā)展。

[1] 劉敬.新生兒缺氧缺血性腦病的臨床管理——英國《新生兒缺氧缺血性腦病臨床管理指南》介紹[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2012,27(2):150-152.

[2] 張迪,任長虹,吉訓(xùn)明,等.腦缺血—再灌注損傷后的炎性反應(yīng)過程及機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國腦血管病雜志,2013,10(7):383-387.

[3] 中國醫(yī)師協(xié)會(huì)新生兒專業(yè)委員會(huì)神經(jīng)專家委員會(huì).新生兒缺氧缺血性腦病超聲診斷建議[J].中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2012,11(4):413-415.

[4] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)新生兒學(xué)組.新生兒缺氧缺血性腦病診斷標(biāo)準(zhǔn)[J].中國當(dāng)代兒科雜志,2005,7(2):97-98.

[5] GILL R,KEMP JA,SABIN C,et al.Human C-reactive protein increases cerebral infarct size after middle cerebral artery occlusion in adult rats[J].J Cereb Blood Flow Metab,2004,24(11)：1214-1218.

[6] BARKER BR,TAXMAN DJ,TING JP.Cross-regulation between the IL-1β/IL-18 processing inflammasome and other inflammatory cytokines[J].Curr Opin Immunol,2011,23(5):591-597.

[7] 趙天然.糖尿病腎病致慢性腎衰竭患者外周血白細(xì)胞介素18表達(dá)的研究[J].臨床薈萃,2013,28(2):210-211.

[8] FELDERHOFF-MUESER U,SCHMIDT OI,OBERHOLZER A,et al.IL-18: a key player in neuroinflammation and neurodegeneration？[J].Trends Neurosci,2005,28(9):487-493.

[9] JANDER S,SCHROETER M,STOLL G.Interleukin-18 expression after focal ischemia of the rat brain: association with the late-stage inflammatory response[J].J Cereb Blood Flow Metab,2002,22(1): 62-70.

[10] 王禮周,李樹軍,趙東菊,等.新生兒缺氧缺血性腦病血清半胱氨酸蛋白酶-1、白細(xì)胞介素-1β、-18測定的意義[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2005,20(2): 127-128.

(本文編輯：許卓文)

2014-04-23；

2014-05-14

河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題計(jì)劃(20110232)

郭映輝(1974-)，女，河北邢臺(tái)人，河北省兒童醫(yī)院副主任技師，醫(yī)學(xué)碩士，從事臨床檢驗(yàn)研究。

R743

B

1007-3205(2014)11-1337-03

10.3969/j.issn.1007-3205.2014.11.032