馬光

乙型肝炎表面抗原膠體金免疫層析法血清快速測定的性能評估

馬光

目的 對膠體金免疫層析法血清快速測定乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的性能研究, 并對此作出評價。方法 對每年9月的室間調(diào)查的反饋結(jié)果進(jìn)行描述性分析。結(jié)果 通過對490例臨床標(biāo)本分析, 膠體金免疫層析法檢測靈敏度為5.0 IU/ml, 陽性漏檢是實(shí)驗(yàn)過程中存在的最嚴(yán)重的問題。進(jìn)行膠體金免疫層析法檢測結(jié)果和兩種ELISA試劑檢測的結(jié)果比較, 一致性較高。結(jié)論 采取膠體金免疫層析法和ELISA法對HBsAg檢測的結(jié)果一致性都較高, 臨床應(yīng)用范圍廣, 但膠體金免疫層析法不適用于大批量檢測HBsAg, 因此在進(jìn)行HBsAg篩選時, 檢測醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)選擇敏感性較強(qiáng)的試劑。

乙型肝炎表面抗原；膠體金免疫層析法；性能評估

免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)做為免疫檢測等領(lǐng)域的一項(xiàng)重要檢測手段, 最大特點(diǎn)是操作方便［1,2］。作者采用膠體金免疫層析法對HBsAg的分析性能進(jìn)行評價, 比較該方法對乙肝病毒表面抗原的檢測質(zhì)量。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取市臨床檢驗(yàn)中心日常檢測標(biāo)本及本院2009年1月～2013年12月門診和住院患者標(biāo)本總計490例。通過ELISA對收集到的臨床標(biāo)本進(jìn)行HBsAg檢測后, 放-2℃保存待測。

1.2 檢測方法 按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版進(jìn)行臨床標(biāo)本處理。

1.3 指標(biāo)評估 將已知濃度的10 IU/ml HBsAg定值血清,稀釋成 9、8、7、6、5、4、3 IU/ml等不同濃度, 通過20份試紙條檢測出的最高稀釋比例濃度確定檢測靈敏度。通過靈敏度(真陽性率)和特異度(真陰性率), 將實(shí)際患病的患者和實(shí)際無病的人正確的判為患者和非患者的能力;通過假陰性率(漏診率)和假陽性率(誤診率), 確定患者中檢查為陰性或正常的人數(shù)所占的比例和非患者中檢查為陽性或異常的人數(shù)所占的比例。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用Microsoft Excel軟件對所得靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值等數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

2.1 臨床標(biāo)本檢測評價 490例臨床標(biāo)本一般特征描述分析后, 進(jìn)行膠體金免疫層析法檢測結(jié)果和兩種ELISA試劑檢測的結(jié)果一致性比較, 一致性較高。結(jié)果不一致的樣本有14例, 見表1。

表1 膠體金免疫層析法檢測結(jié)果和兩種ELISA試劑檢測的結(jié)果一致性比較

2.2 中和確認(rèn)試驗(yàn) 對14例檢測結(jié)果不一致的標(biāo)本繼續(xù)做中和確認(rèn)試驗(yàn)。從14個標(biāo)本中和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果中發(fā)現(xiàn), B試劑(S/N)值均＞1.5, NEUT(%)值＞50%, 故確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果均為陽性。

3 討論

HBsAg是病毒血清學(xué)標(biāo)志物, 常出現(xiàn)在在血液中［3,4］。結(jié)合我國乙肝病毒感染在人們生活中發(fā)病率與感染率都非常高的現(xiàn)狀, 在對患者進(jìn)行檢測時, 使用靈敏度和特異度均高但又成本低的檢測方法, 可以減小對患者造成的傷害。本研究對膠體金免疫層析法考核系統(tǒng)作進(jìn)一步評價, 考核試劑的實(shí)際靈敏度為5 IU/ml , 膠體金免疫層析法檢測的最大長處是快速、方便, 但由于膠體金顯色需要較高濃度的標(biāo)記物, 故其靈敏度會受到一定限制［5］。

綜上所述, 膠體金免疫層析法在臨床的推廣應(yīng)用具有簡便、快速、特異性高, 試劑穩(wěn)定, 隨到隨測, 儀器設(shè)備簡便等優(yōu)點(diǎn), 通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)陰性結(jié)果的基數(shù)較大, 兩種檢測結(jié)果的一致性會隨標(biāo)本的檢測量增大而增大, 高濃度膠體金試紙的檢測會因?yàn)樘禺愋院蛦我恍缘某霈F(xiàn)使檢測結(jié)果出現(xiàn)差異。ELISA檢測的一致性高于膠體金免疫層析法, 膠體金免疫層析法測試紙的特異性較強(qiáng), 但其HBV-M試劑靈敏度明顯低于酶聯(lián)免疫吸附法。在快速檢測的情況下, 對敏感度的要求也較高。臨床應(yīng)用證明, 膠體金免疫層析法測試能夠?yàn)橐倚土鞲胁《靖腥疽鸺膊〉呐R床早期檢測、診斷和治療提供重要依據(jù)。但膠體金免疫層析法不適用于大批量檢測HBsAg,因此在進(jìn)行HBsAg篩選時, 檢測醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)選擇敏感性較強(qiáng)的試劑。

［1］ 張茂海, 吳建業(yè), 陸玲娜, 等.膠體金與酶聯(lián)免疫法檢測乙肝表面抗原結(jié)果分析.中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新, 2011, 9(32):14.

［2］ 李伶俐, 孫俊聰.400例乙肝表面抗原膠體金試紙條與ELISA法檢測結(jié)果分析.中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新, 2011, 9(28):35-36.

［3］ 康鳳芝.測定乙肝表面抗原(HBs-Ag)酶聯(lián)免疫法與膠體金免疫層析法的臨床比較分析.中國民族民間醫(yī)藥, 2011(16):106-107.

［4］ 殷飛.ELISA法與GICA法檢測HBSAg方法學(xué)評價.醫(yī)藥前沿, 2013(35):44-46.

［5］ 王力達(dá).不同方法檢測乙肝表面抗原的結(jié)果分析.臨床輸血與檢驗(yàn), 2013(15):42-44.

2014-06-09］

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