宋志廣
陰道炎是婦女多發(fā)病、常見病。隨著生活節(jié)奏的不斷加快, 其發(fā)病率呈逐年上升趨勢, 而在婦科疾病的診斷過程中白帶常規(guī)檢測(簡稱白帶常規(guī))發(fā)揮著關(guān)鍵作用。白帶常規(guī)主要包括滴蟲、線索細胞、念珠菌和白細胞(清潔度)等。現(xiàn)大多數(shù)醫(yī)院對白帶常規(guī)的檢查采取革蘭染色鏡檢、濕片鏡檢, 兩者均需借助顯微鏡, 具有對檢測者經(jīng)驗要求高、試驗重復性差、個人主觀性較強、往往由于取樣失敗或者工作量大而導致漏檢等缺點。近年來, 國內(nèi)外有不少研究報道[1-4]開始利用白帶生化標志物間接地檢驗某種病原微生物, 對陰道炎癥、細菌性陰道病等疾病進行診斷, 替代了人工顯微鏡鏡檢, 使操作標準化、快速化、批量化, 從而提高了工作效率。本次研究采用專用試劑盒對450例患者進行六項白帶生化標志物的檢測, 總結(jié)報告如下。
1.1 一般資料 選取2013年12月~2014年4月來本院門診就診的500例患者為研究對象, 年齡18~70歲, 平均年齡(29.8±7.8)歲;就診前 3 d所有患者均無性生活、陰道用藥及沖洗。其中50例患者的白帶標本因帶有血液、用藥后有明顯顏色被排除, 剩余450例標本被定為最后的研究對象。所有標本由婦科醫(yī)師用無菌專用棉拭子在子宮頸、陰道后穹隆及陰道壁上旋轉(zhuǎn)提取, 對帶有血液、用藥后有明顯顏色的標本, 改用涂片革蘭染色鏡檢或生理鹽水涂片報告結(jié)果。
1.2 試劑、儀器與方法 河南安圖綠科生物工程公司生產(chǎn)提供聯(lián)合檢測試劑盒, 儀器采用安圖公司配套自動化woMO聯(lián)檢分析儀。操作過程嚴格按說明書進行。
450例標本中95例N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶呈弱陽或陽性, 其中14例>4.8, 占14.7%, 經(jīng)革蘭染色或生理鹽水涂片鏡檢為陰道毛滴蟲感染;81例pH≤4.6, 約占85.3%,為假絲酵母菌感染。135例脯氨酸氨基肽酶或(和)唾液酸苷酶呈陽性, 315例全陰性。280例白細胞酯酶陰性, 170例陽性。290例H2O2呈陰性或弱陽性, 160例呈陽性。240例pH值在4.0~4.5之間, 210例>4.5。
目前, 大多數(shù)醫(yī)院對白帶常規(guī)的檢查采取革蘭染色鏡檢、濕片鏡檢。 但近些年來, 國內(nèi)外有不少研究報道[1-4]開始利用白帶生化標志物間接地檢驗某種病原微生物, 對陰道炎癥、細菌性陰道病等疾病進行診斷, 并與革蘭染色鏡檢比較, 細菌性陰道病、乳桿菌、陰道毛滴蟲、真菌兩種方法之間具有較好的符合性, 因此, 應用生化標志物聯(lián)合檢測具有很好的應用價值。
生化標志物聯(lián)合檢測的原理:在試劑板中, 微生物本身產(chǎn)生的生化標志物與預先固定好的、特異性底物反應呈色或通過加顯色液顯色, 從而通過試劑板各孔的呈色情況來判斷微生物的存在情況。
乳桿菌屬在健康婦女陰道中占正常陰道菌群內(nèi)常駐菌的95%以上[5], 乳桿菌具有維持陰道內(nèi)環(huán)境pH值的作用, 使其維持在4.0~4.5, 主要通過分解陰道上皮細胞所含糖原發(fā)揮作用。乳桿菌還可合成H2O2, 從而調(diào)節(jié)陰道微生態(tài)平衡, 維持陰道正常微環(huán)境, 使感染得到有效預防[6]。H2O2在過氧化物酶的作用下, 可與相應底物發(fā)生呈色反應。本研究顯示,H2O2呈陽性反應171例, 占38.0%, 提示乳桿菌極少或不存在。呈弱陽性或陰性的為279例, 占62.0%, 提示乳桿菌中等量至大量存在。
在念珠菌感染時, 乳桿菌可呈弱陽或陽性, 可以同時存在。當感染念珠菌時, pH可正?;蚵?4.5。感染厭氧菌、滴蟲時pH可達5.5左右。更年期女性由于雌激素水平低落或缺乏, 使細胞內(nèi)糖原含量減少, 阻礙乳酸桿菌的生長, 使PH 值上升, 容易導致病原菌感染。在乳酸菌呈弱陽性或陽性時, 患者應用了各種洗液等造成pH值升高。
細菌性陰道病(BV)好發(fā)于育齡婦女, 約占15%~50%[4,5],本研究顯示, 共135例患者BV呈弱陽或陽性。BV在細菌學上主要表現(xiàn)為陰道正常菌群減少, 被擬桿菌屬、陰道加德納菌、動彎桿菌、消化球菌、普雷沃菌等取代, 在陰道菌群中,擬桿菌和普雷沃菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌。在陰道環(huán)境中, 與脯氨酸氨基肽酶相關(guān)細菌包括動彎桿菌和加德納菌, 是BV分泌的特異性標志物[6]。作者認為, 綜合檢測脯氨酸氨肽酶和唾液酸苷酶, 可克服兩種方法在靈敏度上的缺陷, 成為檢測BV的理想方法[7]。
念珠菌陰道炎最常見的病原體是熱帶念珠菌和白色念珠菌, 這兩種念珠菌及陰道毛滴蟲均具有氨基葡萄糖苷酶的活性[8]。在堿性條件下, N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶可通過水解特異性的底物與乙酰氨基葡萄糖苷酶發(fā)生呈色反應。同時根據(jù)感染陰道毛滴蟲時, pH值會顯著增高, 通常在5.0左右, 感染念珠菌時, pH值基本上在正常范圍內(nèi), 或略>4.5, 結(jié)合N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶和pH值來判斷感染類型。
綜上所述, 作者認為聯(lián)合應用白帶的六項生化標志物檢測, 結(jié)果客觀、簡單易行, 對于輔助診斷女性陰道微生態(tài)環(huán)境具有重要的應用價值, 可廣泛應用于臨床。
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