張國棟

抗病毒治療對慢性丙型肝炎患者T淋巴細胞亞群的影響

張國棟

目的 觀察聚乙二醇干擾素α-2a聯(lián)合利巴韋林治療慢性丙型肝炎獲得EVR者治療過程中血清T淋巴細胞亞群的變化, 從而了解有效抗病毒治療對患者細胞免疫狀態(tài)的影響。方法 選取使用聚乙二醇干擾素α-2a 180 μg, 皮下注射, 1次/周聯(lián)合利巴韋林片900~1200 mg/d, 口服, 療程48周抗病毒治療的慢性丙型肝炎患者中獲得早期病毒學(xué)應(yīng)答者46例, 分析其T淋巴細胞亞群的變化。結(jié)果CD3+T淋巴細胞在治療12周時較治療前下降, 但P＞0.05, 差異無統(tǒng)計學(xué)意義, 其后CD3+T淋巴細胞呈上升趨勢, 到治療48周時與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。在治療過程中CD4+T淋巴細胞、CD4+/CD8+逐漸升高, CD8+T淋巴細胞逐漸下降, 治療48周與治療開始前比較差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。治療48周療程結(jié)束時上述指標與正常對照組相比較P均>0.05。結(jié)論 通過有效抗病毒治療,患者細胞免疫功能逐漸接近正常水平。

慢性丙型肝炎；抗病毒；T淋巴細胞亞群

我國一般人群抗-HCV陽性率為3.2%, 慢性丙型肝炎患者中約1%~3%可發(fā)展為原發(fā)性肝癌［1］, 是一種嚴重危害人類健康的傳染病。丙型肝炎的進展與細胞免疫有密切關(guān)系。聚乙二醇干擾素α-2a聯(lián)合利巴韋林是目前治療該病理想方案之一, 有研究證明使用該方案獲得早期病毒學(xué)應(yīng)答(early virologic response, EVR)者達到持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答(sustained virologic response, SVR)率為74%［2］。作者回顧性分析了2010年8月~2013年6月期間應(yīng)用聚乙二醇干擾素α-2a聯(lián)合利巴韋林治療慢性丙型肝炎獲得EVR者治療過程中血清T淋巴細胞亞群的變化, 以觀察抗病毒治療對此類患者細胞免疫狀態(tài)的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年8月~2013年6月期間在平煤神馬醫(yī)療集團總醫(yī)院治療的慢性丙型肝炎患者中獲得EVR者46例, 男17例, 女29例, 年齡20~61歲, 平均(43±14)歲。所有患者均為初治, 符合2004年中國《慢性丙型肝炎防治指南》［1］診斷標準。所有患者排除失代償期肝硬化、肝癌、合并其他病毒性肝炎、合并嚴重心臟疾病、合并免疫性疾病、合并精神疾病、合并嚴重甲狀腺疾病者, 并排除對干擾素、利巴韋林或其成分過敏者及酗酒或吸毒者, 所有患者均無高膽紅素血癥。

1.2 方法

1.2.1 治療方案 采用聚乙二醇干擾素α-2a(PEG-IFNα-2a,派羅欣, 上海羅氏公司)180 μg, 皮下注射, 1次/周聯(lián)合利巴韋林片900~1200 mg/d, 口服, 療程48周。

1.2.2 檢測 使用美國BeckmanCoulter公司Coulter Epics XL流式細胞儀檢測外周血T淋巴細胞, 試劑使用法國Immunotech公司的CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC5單克隆抗體；OptiLyse C免洗溶血素原液。使用美國BeckmanCoulter公司全自動生化分析儀系統(tǒng)CX5 PRO及其配套試劑檢測血生化學(xué)指標。使用熒光定量PCR法檢測HCVRNA(監(jiān)測下限5×102IU/ml),試劑盒由上?？迫A公司供應(yīng)。

1.2.3 觀察指標 觀察正常對照組、開始治療前、治療12周及48周療程結(jié)束時T淋巴細胞亞群分布情況對比；治療12周與48周療程結(jié)束時的T淋巴細胞亞群分布情況對比。

1.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析, 計量資料以)表示, 組間及治療前后比較采用t檢驗, P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 外周血淋巴細胞亞群的變化 治療開始前CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞、CD4+/CD8+與對照組相比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.01)。CD3+T淋巴細胞在治療12周時較治療前下降, 但P＞0.05, 差異無統(tǒng)計學(xué)意義, 其后CD3+T淋巴細胞呈上升趨勢, 到治療48周時與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。在治療過程中CD4+T淋巴細胞逐漸上升, CD8+T淋巴細胞逐漸下降, CD4+/CD8+逐漸升高, 以上指標治療12周與治療開始前、治療48周與治療12周、治療48周與治療開始前比較差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.01)。治療48周時與對照組相比較CD3+T淋巴細胞、CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞、CD4+/CD8+均差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。以上結(jié)果顯示在治療過程中, 患者細胞免疫功能逐漸恢復(fù), 到治療結(jié)束時, 已接近正常水平。詳細情況見表1。

表1 治療過程中患者外周血T淋巴細胞亞群的變化s,%)

表1 治療過程中患者外周血T淋巴細胞亞群的變化s,%)

注：與對照組比較aP＜0.01；與治療前比較bP＜0.05,cP＜0.01；與治療前比較dP＜0.01；與治療12周比較eP＜0.01

例數(shù)CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+對照組4364.38±6.3545.17±6.0022.11±3.312.09±0.45治療開始前4663.09±5.9035.87±4.57a31.81±3.94a1.15±0.18a治療12周4661.83±4.7438.61±3.74b26.39±3.79c1.49±0.24c治療48周4667.70±4.06de47.01±5.13de23.38±4.50de2.09±0.52de

2.2 不良反應(yīng) 所有患者在治療開始后均出現(xiàn)不同程度發(fā)熱、肌肉酸痛等流感樣癥候群, 隨著治療時間延長, 上述癥狀消失；所有患者均出現(xiàn)不同程度白細胞減少癥、血小板減少癥, 于使用利可君、重組人粒細胞刺激因子后可繼續(xù)抗病毒治療；所有患者均出現(xiàn)食欲減退、脫發(fā)等癥狀, 均于對癥治療或解釋病情后繼續(xù)抗病毒治療。

3 討論

HCV病毒的直接致病作用和宿主的免疫機制被激活而破壞感染的肝細胞是參與HCV致病過程的兩種主要機制。HCV感染可導(dǎo)致感染者細胞免疫功能的改變［3］, 丙型肝炎的慢性化是由多種免疫細胞參與的復(fù)雜過程。T淋巴細胞是細胞免疫系統(tǒng)的主要成分。CD3+T淋巴細胞可代表T淋巴細胞總數(shù)；CD4+T淋巴細胞代表Th/Ti, 具有誘導(dǎo)抑制性T細胞產(chǎn)生和分泌IL-2的功能；CD8+T淋巴細胞代表Ts/Tc, 具有抑制B細胞產(chǎn)生抗體的作用。T淋巴細胞各亞群間的相對穩(wěn)定是機體發(fā)揮正常免疫功能的重要基礎(chǔ), 它們之間的相互關(guān)系可反映丙型肝炎患者的細胞免疫水平和免疫調(diào)節(jié)狀態(tài)。聚乙二醇干擾素α-2a是治療慢性丙型肝炎的藥物之一［4］。干擾素具有廣譜抗病毒作用, 主要通過與細胞表面的干擾素受體結(jié)合誘生多種抗病毒蛋白, 抑制病毒復(fù)制；同時干擾素還具有免疫調(diào)節(jié)作用, 主要通過I型人類白細胞抗原表達增強和增強免疫細胞活性來殺傷病毒感染細胞而清除病毒［5］。利巴韋林在該方案中主要起協(xié)同抗病毒作用。在使用聚乙二醇干擾素α-2a與利巴韋林聯(lián)合抗病毒治療丙型肝炎時, 通常通過觀察患者是否獲得EVR來判斷遠期療效, 獲得EVR者獲得SVR率最高可達74%［2］。在本研究中, 入組患者均為使用該方案治療獲得EVR者, 在治療過程中CD3+、CD4+T淋巴細胞呈上升趨勢而CD8+T淋巴細胞呈下降趨勢, CD4+/ CD8+呈上升趨勢, 至48周時, 與治療開始前相比較P均<0.01, 有顯著統(tǒng)計學(xué)意義, 而治療48周療程結(jié)束時上述指標與正常對照組相比較P均>0.05, 與相關(guān)研究結(jié)果相似［6］,提示通過有效抗病毒治療, 慢行丙型肝炎患者細胞免疫功能可逐漸恢復(fù)或接近正常水平, 從而為抗病毒療程結(jié)束后維持SVR提供免疫學(xué)基礎(chǔ), 但尚需擴大樣本量進一步證實。

［1］ 中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會,中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會.中國丙型肝炎防治指南.中華肝臟病雜志, 2004,12(4):194-198.

［2］ McHutchison JG, Lawitz EJ, Shiffman ML, et al.Peginterferon alfa-2b or alfa-2a with ribavirin for treatment of hepatitis C infection.The New England journal of medicine, 2009,361(6):580-593.

［3］ 金波,王慧芬,王福生,等.慢性丙型肝炎患者Ⅰ型樹突狀細胞、淋巴細胞亞群的特點及臨床意義.傳染病信息, 2008, 21(2): 115-118.

［4］ 慢性丙型肝炎抗病毒治療專家委員會.慢性丙型肝炎抗病毒治療專家共識.中華實驗和臨床感染病雜志(電子版), 2009, 3(3):343-352.

［5］ Kamal SM, Ismail A, Graham CS, et al.Pegylated interferon alpha therapy in acute hepatitis C: relation to hepatitis C virus-specific T cell response kinetics.Hepatology, 2004,39(6):1721-1731.

［6］ 胡敏濤,毛燕群,裴豪,等.聚乙二醇干擾素對慢性丙型肝炎患者淋巴細胞亞群的影響.中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志, 2011, 21(4): 209- 211.

467000 河南省平頂山市平煤神馬醫(yī)療集團總醫(yī)院感染性疾病科