馬連學 李艷菊 魏巍

化學發(fā)光微粒免疫法和酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙肝表面抗原的結(jié)果對比分析

馬連學 李艷菊 魏巍

探討化學發(fā)光微粒子免疫法(CMIA)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法測定乙肝表面抗原的靈敏度及特異性, 并對其相關檢測結(jié)果進行分析 。用化學發(fā)光微粒子免疫法(CMIA)對本院2112年3月~2012年12月住院患者2686人, 進行乙肝表面抗原檢測, 陽性113例。對113例陽性結(jié)果進行確認試驗并進行酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法試驗, 比對各試驗結(jié)果間的差異?；瘜W發(fā)光微粒子免疫法(CMIA)檢測乙肝表面抗原和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)相比, 靈敏度和特異性較高, 有很好的臨床價值,能有效地避免漏檢、錯檢, 但兩種方法都有一定比例的假陽性, 建議對弱陽性標本采用確認試驗以提高檢測的正確性。

乙肝表面抗原；ELISA；化學發(fā)光微粒子免疫法；抗體確認試驗

我國是肝炎大國, 據(jù)2006年的調(diào)查,我國乙肝表面抗原總攜帶率為7.18%［1］, 乙肝的實驗室診斷對于乙肝的診斷治療有著很重要的臨床意義。隨著檢驗技術的發(fā)展, 檢驗方法更加科學準確, 目前酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、化學發(fā)光微粒子免疫法(CMIA)是檢驗科應用最廣的檢測乙肝表面抗原的方法, 本文就兩種方法對乙肝表面抗原檢測進行比較, 報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集本院2112年3月~2012 年12月住院檢測乙肝表面抗原患者2686人, 其中男1324, 女1362。

1.2 試劑與方法 ①酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)：試劑由廈門新創(chuàng)科技有限公司提供。嚴格按說明書要求操作。HBsAg檢測以S/CO>1.0為陽性。②化學發(fā)光微粒子免疫法(CMIA)：檢測試劑和抗體中和確認試劑以及校準品均由美國Abbott公司提供。化學反光反應的判讀標準為>0.05 IU/ml為陽性。確認試驗以抑制率>50%為陽性。儀器為美國Abbott公司生產(chǎn)的i2000化學發(fā)光分析儀。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析, 計數(shù)資料采用χ2檢驗, P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 所用標準物由Abbott公司提供, 兩種方法靈敏度見表1。

表1 CMIA和ELISA法測定 HBsAg靈敏度比較

2.2 CMIA法所測得113例陽性標本, 經(jīng)確認試驗陽性數(shù)為103例, 確認陽性率91.2%。ELISA法陽性率為83.2%。兩項試驗結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結(jié)果見表2。

表2 ELISA結(jié)果與抗體中和確認試驗結(jié)果的比較(n)

3 討論

乙肝表面抗原檢測是判斷乙型肝炎病毒感染的重要依據(jù), 我國是乙肝病毒高發(fā)區(qū), 準確、及時診斷對于乙肝的治療和預后尤為重要。

對于HBV檢查, 實驗室有多種方法, 最常見的是金標法、ELISA法、化學發(fā)光法。

膠體金法對于急診是一種較好的方法, 其優(yōu)點是速度快, 但是和其他方法相比, 對于弱陽性結(jié)果易造成 漏檢和誤讀。ELISA法是目前最廣泛應用的乙肝表面抗原的檢測方法, ELISA法由于操作的影響因素較多, 臨界值附近的樣本易出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果, 易引起誤診或漏診［2］?；瘜W發(fā)光技術是近二十年來發(fā)展起來的免疫分析技術, 化學發(fā)光微粒子免疫法(CMIA)以其全自動儀器、封閉式操作和配套試劑, 使人為因素減到最低, 該方法以其很好的特異性、較高的靈敏度和重復性被譽為當今免疫檢測的金標準［3］。

本研究中, 以HBsAg確認試驗為判斷標準, 113例微粒子化學發(fā)光結(jié)果中, 103例HbsAg確認為陽性, 陽性率91.2%,其中ELISA法敏感性為88.3%(91/103), 特異性為70.0%(7/10), ELISA法有較大比例的誤診和漏診。有人建議對于對于初篩弱陽性的檢驗標本, 需要做確認試驗這樣才能盡可能避免結(jié)果的誤報、漏報, 為臨床診斷提供更好的服務［4］。

化學反光反應的判讀標準為>0.05 IU/ml為陽性, 從表1看化學發(fā)光微粒子免疫法(CMIA)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法測定 HBsAg靈敏度比較, 其靈敏性度遠高于ELISA方法。本試驗CMIA陽性的113例標本中 , 經(jīng)抗體中和確認試驗后103例陽性,假陽性結(jié)果10例, 假陽性率為8.85%(10/113), 這10例標本表面抗原值在0.05~0.12 IU/ml之間, 提示我們對于弱陽性結(jié)果需要做確認試驗以保證試驗正確性。李金明［5］也提出由于灰區(qū)的存在, 有必要對采用免疫測定, 如 ELISA, 免疫化學發(fā)光、免疫膠體金試劑條等初篩方法檢測反應性的標本進行確認試驗, 但由于確認試驗試劑目前絕大部分還是依賴進口, 價格昂貴, 因此可考慮只對弱陽性反應性的標本進行確認。

［1］ 衛(wèi)生部.全國人群乙肝血清流行病學調(diào)查結(jié)果.我國乙肝免疫預防工作取得顯著成績, 2008, 4: 21.

［2］ 王克波,楊波,楊志俊.ELISA試驗的質(zhì)量控制.中國衛(wèi)生檢驗雜志, 2005,15(1):112.

［3］ 劉冀瓏,喬惠理,鄧澤沛.化學發(fā)光免疫技術.化學通報, 2000, 7:49-53.

［4］ 劉文琴,張雄,董明國,等.確認試驗在乙型肝炎表面抗原弱陽性標本中的臨床應用.中華醫(yī)院感染學雜志, 2011,21(10): 2152-2153.

［5］ 李金明.感染性疾病血清學檢驗中應重視對弱方應性標本的確認.中華檢驗醫(yī)學雜志, 2006, 29(7):577-580.

撫順礦業(yè)集團總醫(yī)院檢驗科(馬連學)；大連開發(fā)區(qū)醫(yī)院(李艷菊)；大連醫(yī)科大學(魏巍)

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