鄧克紅，崔金全，盧書芳

鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科 鄭州 450014

宮頸鱗癌組織中TS和TopoⅡα的表達(dá)與新輔助化療效果的關(guān)系

鄧克紅，崔金全#，盧書芳

鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科 鄭州 450014

#通訊作者，女，1962年11月生，博士，教授，研究方向：婦科腫瘤，E-mail：jinquan_cui@163.com

宮頸鱗癌；新輔助化療；化療療效；胸苷酸合成酶；DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα

目的：探討宮頸鱗癌組織中胸苷酸合成酶(TS)和DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα(TopoⅡα)的表達(dá)與新輔助化療效果的關(guān)系。方法采用免疫組化SP法檢測54例宮頸鱗癌患者宮頸組織中TS、TopoⅡα的表達(dá)。結(jié)果54例宮頸鱗癌患者中34例對NACT有反應(yīng)，總有效率為72.2%，無效率為27.8%。宮頸癌患者組織中TS、TopoⅡα的表達(dá)水平與NACT療效有關(guān)(χ2=7.020和9.026，P<0.05)。TS低表達(dá)者的化療有效率高于高表達(dá)者，TopoⅡα高表達(dá)者的化療有效率高于低表達(dá)者。結(jié)論TS低表達(dá)和TopoⅡα高表達(dá)的患者均可從NACT中獲益，兩者是否可以作為宮頸癌患者NACT療效指標(biāo)值得進一步研究。

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，其中90%～95%的宮頸癌為鱗狀細(xì)胞癌(簡稱鱗癌)。傳統(tǒng)手術(shù)和放療可使早期宮頸鱗癌治愈率達(dá)到80%以上；而對于要保留卵巢和陰道功能的中晚期年輕患者，常采用新輔助化療(neoadjuvant chemotherapy，NACT)縮小腫瘤體積、降低腫瘤臨床分期后再進行手術(shù)治療[1]。鉑類藥物聯(lián)合紫杉類藥物是宮頸癌術(shù)前化療最常用的方案之一[2-3]。作者分析了宮頸鱗癌組織中胸苷酸合成酶(TS)、DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα(TopoⅡα)與NACT的關(guān)系，探討二者對宮頸鱗癌NACT療效的預(yù)測價值。

1 對象與方法

1.1研究對象選取鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院2008年2月至2013年2月收治的54例宮頸鱗癌患者，年齡23～69歲，中位年齡40歲。臨床分期(FIGO，2012年)：Ⅰ期10例，Ⅱ期44例；病理分級：高分化21例，中低分化33例。54例患者均無化療禁忌證，給予1～3個療程以鉑類為主的聯(lián)合化療(紫杉醇150 mg/m2+卡鉑500 mg/m2)，化療結(jié)束后2周評價臨床療效，再行根治性手術(shù)。收集其化療前宮頸活檢組織及化療后手術(shù)標(biāo)本蠟塊進行研究，所有活檢及手術(shù)組織標(biāo)本均經(jīng)病理證實為宮頸鱗癌。

1.2化療療效判定化療結(jié)束后2周參照國際抗癌聯(lián)盟(UICC)療效判定標(biāo)準(zhǔn)[3]評價療效：①完全緩解(CR)指肉眼觀腫瘤完全消失，且無新病灶。②部分緩解(PR)指腫瘤縮小≥50%，且無新病灶。③病情穩(wěn)定(SD)指腫瘤縮小<50%，無新病灶。④進展(PD)指腫瘤無縮小或有新病灶出現(xiàn)。其中CR和PR為有效，SD和PD為無效。

1.3NACT前后宮頸癌組織中TS與TopoⅡα表達(dá)的檢測即用型鼠抗人TS單克隆抗體、即用型TopoⅡα單克隆抗體、DAB顯色試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。采用免疫組化SP法檢測標(biāo)本中TS和TopoⅡα的表達(dá)，嚴(yán)格按試劑說明書操作，用PBS代替一抗為陰性對照，已知陽性組織為陽性對照。結(jié)果判定：TS陽性信號定位于胞漿或胞膜，TopoⅡα陽性信號定位于胞核或胞漿，二者均呈棕黃色或棕褐色顆粒。采用全自動顯微鏡和圖像采集分析系統(tǒng)，數(shù)碼顯微鏡捕捉免疫組化圖片，根據(jù)陽性染色區(qū)域的不同調(diào)節(jié)整幅圖像的分割范圍及閾值，圖像采集分析系統(tǒng)自動計算陽性細(xì)胞占總細(xì)胞的百分比及陽性區(qū)平均積分光密度，均以平均積分光密度值≥120.5為高表達(dá)，<120.5為低表達(dá)。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 17.0進行分析。應(yīng)用χ2檢驗比較宮頸鱗癌不同臨床病理特征與NACT臨床療效的關(guān)系，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

54例行NACT的宮頸鱗癌患者中 CR 5例，PR 34例，總有效率為72.2%；其余15例表現(xiàn)為SD，無效率為27.8%。宮頸鱗癌不同臨床病理特征與NACT臨床療效分析結(jié)果見表1。不同的臨床分期、病理分級和年齡組患者間NACT療效的差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而宮頸癌組織中TS高表達(dá)、TopoⅡα低表達(dá)者NACT療效較差。

表1 宮頸鱗癌不同臨床病理特征與NACT臨床療效分析 例(%)

*:校正χ2檢驗。

3 討論

隨著新化療技術(shù)的不斷發(fā)展，化療在宮頸癌的治療中日益受到重視，目前臨床上使用的NACT能縮小腫瘤的體積和范圍、降低腫瘤的分期、增加患者的手術(shù)機會[4-5]，NACT的近期有效率可達(dá)54%～83%。但對于化療不敏感者，既耽誤了手術(shù)時機又加重了患者的經(jīng)濟負(fù)擔(dān)。因此尋找化療敏感的生化指標(biāo)，預(yù)測患者對化療的反應(yīng)性，對宮頸癌的治療將具有十分重要的意義。

TS是胸苷合成的限速酶，能催化生物體內(nèi)尿嘧啶脫氧核苷(dUMP)甲基化為胸腺嘧啶脫氧核苷(dTMP),而dTMP是細(xì)胞DNA合成所必需的,因此，抑制TS就能抑制DNA的生物合成，進而抑制細(xì)胞的生長或增殖[6]。有文獻(xiàn)[7]報告在多種腫瘤中TS低表達(dá)者可以從NACT中獲益。該研究結(jié)果顯示，NACT有效組中TS低表達(dá)高于無效組。有學(xué)者[8-9]對65例胃癌行NACT，化療有效和無效者間腫瘤組織TS mRNA水平差異顯著，在28例低TS mRNA水平者中15例化療有效，而29例高TS mRNA水平者僅有5例化療有效，作者的研究結(jié)果與之相符。

TopoⅡα的表達(dá)依賴于細(xì)胞周期，其高表達(dá)可導(dǎo)致DNA復(fù)制與細(xì)胞分裂增加，是細(xì)胞增殖的特異指標(biāo)。TopoⅡα的表達(dá)水平越高，使得具有TopoⅡ抑制作用的抗腫瘤藥具備作用的靶點越多，抗腫瘤藥的敏感性越高，當(dāng)TopoⅡ表達(dá)降低或不表達(dá)時，這類藥物失去作用的底物，表現(xiàn)為對這類藥物不敏感[10-11]。TopoⅡα的高表達(dá)預(yù)示著化療有效，提示TopoⅡα的高表達(dá)可作為化療有效的預(yù)測指標(biāo)[12-13]。該研究結(jié)果表明，NACT有效組中TopoⅡα高表達(dá)高于無效組，提示以鉑類聯(lián)合紫杉類的化療方案協(xié)同作用較強，可清除部分TopoⅡα陽性表達(dá)的腫瘤細(xì)胞，或下調(diào)了細(xì)胞增殖蛋白TopoⅡα的表達(dá)，提示TopoⅡα表達(dá)較高的宮頸癌患者在初治策略設(shè)計時可考慮選用包括拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制劑的化療方案。

總之，TS低表達(dá)和TopoⅡα高表達(dá)的患者在NACT中的均有較好療效，通過檢測宮頸組織TS、TopoⅡα的表達(dá)，可以有針對性地選擇化療方案，以提高化療效果。

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(2013-08-31收稿 責(zé)任編輯趙秋民)

Relationship between expressions of TS and TopoⅡα in cervical squamous cancer tissue and curative effect of neoadjuvant chemotherapy

DENGKehong,CUIJinquan,LUShufang

DepartmentofGynecologyandObstetrics，theSecondAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450014

cervical squamous cancer;neoadjuvant chemotherapy;chemotherapy efficacy；TS;TopoⅡα

Aim: To explore relationship between the expressions of TS and TopoⅡα in cervical squamous cancer tissue and the efficacy of neoadjuvant chemotherapy(NACT) of taxol and carbon(TC). Methods: TS and TopoⅡα expressions in 54 specimens of cervical squamous cancer were detected by SP immunohistochemistry. Results: 34 out of 54 cervical squamous cancer patients reacted to NACT, and the total effective rate was 72.2%, ineffective rate was 27.8%. There was correlation between TS,TopoⅡα expressions and the curative effect of NACT (χ2=7.020 and 9.026，P<0.05). Conclusion: The patients with lower expression of TS and higher expression of TopoⅡα can benefit from NACT, and whether TS and TopoⅡα can serve as factors for chemotherapy efficacy in cervical squamous cancer is worthy of further research.

10.13705/j.issn.1671-6825.2014.03.031

R737.33