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        不同子宮內(nèi)膜組織中ER、PR蛋白的表達*

        2014-08-31 06:29:41任琛琛任瑞芳李瑪俊
        鄭州大學學報(醫(yī)學版) 2014年3期
        關鍵詞:功能

        張 娟,任琛琛,楊 立,任瑞芳,白 楊,陳 琳,李瑪俊

        鄭州大學第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科 鄭州 450052

        不同子宮內(nèi)膜組織中ER、PR蛋白的表達*

        張 娟,任琛琛#,楊 立,任瑞芳,白 楊,陳 琳,李瑪俊

        鄭州大學第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科 鄭州 450052

        #通訊作者,女,1968年11月生,博士,主任醫(yī)師,研究方向:婦科腫瘤, E-mail:renchenchen1106@163.com

        子宮內(nèi)膜;雌激素受體;孕激素受體;中重度宮腔粘連

        目的:觀察子宮內(nèi)膜功能層、基底層及淺肌層組織中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)蛋白的表達情況。方法應用免疫組化SP法檢測30例子宮內(nèi)膜功能層、基底層、淺肌層組織中ER、PR蛋白的表達。結(jié)果子宮內(nèi)膜功能層、基底層和淺肌層中ER和PR蛋白表達水平差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=17.582和19.182,P均<0.001);功能層、基底層和淺肌層ER和PR蛋白表達水平依次降低。結(jié)論給予高于生理劑量的雌孕激素周期性療法刺激殘余的子宮內(nèi)膜生長,可能預防中重度宮腔粘連分離術后宮腔粘連的再次發(fā)生。

        子宮內(nèi)膜分為功能層、基底層和淺肌層,月經(jīng)期功能層壞死脫落,受卵巢雌孕激素的調(diào)節(jié),基底層可再生形成功能層[1]。因感染、創(chuàng)傷等因素引起子宮內(nèi)膜功能層、基底層或淺肌層損傷,如損傷后不能及時修復,容易形成宮腔粘連[2]。宮腔粘連分離術(transcervieal resection of adhesions,TCRA)后宮腔再次粘連仍有可能發(fā)生,需要采取一定措施使子宮內(nèi)膜恢復正常狀態(tài)。輕度宮腔粘連分離術一般只傷及功能層,應用生理劑量雌孕激素效果比較理想;但中重度宮腔粘連會傷及基底層甚至淺肌層,應用雌孕激素治療的效果尚無定論。Romer 等[3]提出中重度宮腔粘連分離術后應給予大劑量雌孕激素使內(nèi)膜上皮化進而促進其再生,加速子宮內(nèi)膜修復。但Chen等[4]認為高雌激素狀態(tài)可使血清中轉(zhuǎn)化生長因子及成纖維細胞生長因子2表達升高,進而使子宮內(nèi)膜發(fā)生纖維化改變,再次形成宮腔粘連 。作者應用免疫組化方法觀察子宮內(nèi)膜功能層、基底層及淺肌層中雌激素受體(estrogen receptor,ER)和孕激素受體(progesterone receptor,PR)的分布情況,以期為中重度宮腔粘連分離術后雌孕激素的應用提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1標本選擇選取2000年1月至2012年12月因?qū)m頸不典型增生住院行子宮全切的患者30例,年齡27~45(38.5±0.5)歲。納入標準:宮頸不典型增生,半年內(nèi)未服用任何激素類藥物,正常子宮(無子宮肌瘤、子宮腺肌癥、子宮內(nèi)膜息肉等)。所選標本均為月經(jīng)中后期(月經(jīng)第15~21天)子宮內(nèi)膜。

        1.2組織學觀察30例石蠟切片經(jīng)HE染色,于顯微鏡下觀察正常人子宮內(nèi)膜,根據(jù)各層的組織學[4-5]不同進行分層。功能層:螺旋動脈周圍蛻膜樣變,間質(zhì)水腫明顯,腺體擴張、邊緣不規(guī)則、腔內(nèi)有分泌物;基底層:腺體呈管狀、腺上皮為柱狀,間質(zhì)致密,似增殖期內(nèi)膜,含多量厚壁血管(基底動脈);淺肌層:含有腺體,缺少子宮內(nèi)膜下組織,無厚壁血管,緊貼基底層。

        1.3子宮內(nèi)膜組織ER、PR蛋白的表達采用免疫組化SP法檢測。鼠抗人ER、PR單克隆抗體來自于丹麥DAKO公司。具體步驟如下:石蠟切片常規(guī)經(jīng)二甲苯脫蠟,梯度酒精水化,自來水沖洗;每張切片加50 μL過氧化物酶阻斷溶液,室溫下孵育10 min,PBS沖洗3次;每張切片加50 μL一抗(稀釋100倍)孵育150 min,PBS沖洗3次;每張切片加50 μL生物素標記的二抗,孵育60 min,PBS沖洗;加100 μL新鮮配制的DAB顯色液3~5 min,蒸餾水沖洗終止反應;蘇木素復染。染色結(jié)果判定: ER、PR主要定位于細胞核,以棕紅色為陽性染色。每張切片選取10個高倍視野觀察,參照文獻[5]的方法計算陽性細胞的百分率,陽性細胞<10%為(-),~29%為(+),~49%為(),≥50%為()。

        1.4統(tǒng)計學處理應用SPSS 17.0進行分析,子宮內(nèi)膜各層組織中ER和PR蛋白陽性表達的比較采用k個相關樣本的秩和檢驗,檢驗水準α=0.05。

        2 結(jié)果

        ER和PR在子宮內(nèi)膜功能層、基底層及淺肌層之間的表達見圖1、表1和2。

        χ2=17.582,P<0.001

        表2 子宮內(nèi)膜各層組織中PR蛋白的表達水平 例

        χ2=19.182,P<0.001。

        3 討論

        子宮內(nèi)膜功能層受卵巢激素變化的調(diào)節(jié),具有周期性增殖、分泌和脫落變化。月經(jīng)后基底層再生并修復子宮內(nèi)膜創(chuàng)面,重新形成子宮內(nèi)膜功能層并再次進入下一個月經(jīng)周期,形成正常的子宮內(nèi)膜形態(tài)。輕度宮腔粘連一般只傷及功能層,術后應用生理劑量的雌孕激素序貫治療,促使子宮內(nèi)膜再生并使術后創(chuàng)面重新上皮化[6]。中重度宮腔粘連傷及基底層甚至淺肌層時,是否也可經(jīng)驗性給予生理劑量的雌孕激素序貫治療,預防宮腔粘連的再次發(fā)生?

        ER、PR位于細胞核中,當受體與激素結(jié)合形成復合物后,以活化的形式結(jié)合到染色體的特定部位,引起基因的活化,啟動轉(zhuǎn)錄合成新的DNA,繼而合成新的蛋白質(zhì),通過這些具有生物學功能的蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)細胞的生長和代謝。該研究結(jié)果表明子宮內(nèi)膜不同損傷部位的ER、PR表達并不一致,ER、PR在子宮內(nèi)膜功能層、基底層及淺肌層的陽性表達水平依次降低,以上結(jié)果為中重度宮腔粘連分離術后雌孕激素的應用提供理論依據(jù)。

        綜上所述,作者認為中重度宮腔粘連分離術后應給予高于生理劑量的雌孕激素序貫治療,可能預防宮腔再次粘連。但該實驗樣本量較少,并且只是從理論上提示中重度宮腔粘連術后可以用高于生理量的雌孕激素,需要進一步實驗驗證。

        [1]豐有吉.婦產(chǎn)科學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002.

        [2]羅麗蘭.不孕與不育[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1998:241

        [3]Romer T,Schmidt T,Foth D.Pre-and postoperative hormonal treatment in patients with hysteroscopic surgery[J].Contrib Gynecol Obstet,2000,20:1

        [4]Chen FP,Soonq YK,Hui YL.Successful treatment of severe uterine synechiae with transcervical resectoscopy combined with laminaria tent[J].Hum Reprod,1997,12(5):943

        [5]陳樂真.子宮內(nèi)膜病理組織學診斷[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2001.

        [6]Fitzgibbons PL,Murphy DA,Hammond ME,et al.Recommendations for validating estrogen and progesterone receptor immunohistochemistry assays[J].Arch Pathol Lab Med,2010,134(6):930

        (2013-08-12收稿 責任編輯李沛寰)

        Expressions of ER and PR protein in different endometrial tissue

        ZHANGJuan,RENChenchen,YANGLi,RenRuifang,BAIYang,CHENLin,LIMajun

        DepartmentofObstetricsandGynecology,theThirdAfflliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052

        endometrium; estrogen receptor; progesterone receptor;moderately severe intrauterine adhesion

        Aim: To observe distribution of the expressions of estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR) in endometrium function layer, base layer, shallow muscular layer.Methods: Immunohistochemical SP method was applied to detect the expressions of ER and PR in 30 cases of endometrium function layer, base layer, and shallow muscular layer.Results: The expression levels of ER and PR protein in function layer, base layer and shallow muscular layer had statistical difference(χ2=17.582 and 19.182,P<0.001),and the expression levels of ER and PR proteins in function layer, base layer and shallow muscular layer decreased successively.Conclusion: Using estrogen and progesterone at higher dose to stimulate the growth of remnant endometrium may prevent the recurrence of intrauterine adhesion.

        10.13705/j.issn.1671-6825.2014.03.017

        *河南省人口計生委計劃生育科學技術項目 2013年

        R711.6

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