張婷　代容春

摘 要 [目的]利用3種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA、NAA、2，4-D探究其對(duì)植物組織培養(yǎng)的促進(jìn)作用。[方法]配置不同濃度不同功能的培養(yǎng)基，利用無(wú)菌技術(shù)接種康乃馨外植體并定期觀察植物組織生長(zhǎng)情況。[結(jié)果]6-BA與NAA對(duì)康乃馨叢生芽的生長(zhǎng)具有顯著促進(jìn)作用。[結(jié)論]植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)康乃馨植物組織培養(yǎng)的生長(zhǎng)具有不可或缺的重要作用，可以在生產(chǎn)實(shí)踐中運(yùn)用不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比以提高康乃馨花卉產(chǎn)率。

關(guān)鍵詞 康乃馨；組織培養(yǎng)；愈傷組織；生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑

中圖分類(lèi)號(hào)：S682.19 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：

康乃馨別名麝香石竹，香石竹（Dianthuscaryophyllus L），石竹科，多年生草本植物[1]。分為露地栽培種和溫室栽培種2大類(lèi)，為世界5大切花之一。溫室栽培可四季開(kāi)花，切花保存時(shí)間長(zhǎng)，花直徑5～10 cm，花色鮮艷，有白、紅、桃紅、桔黃、紫及雜色[2]?；ò耆缃?，鑲邊疊褶，勻稱(chēng)地包卷在筒狀的花萼之內(nèi)，香味宜人，在世界各地被人們廣泛栽培。但目前，用常規(guī)扦插方法繁殖，繁殖系數(shù)低，速度慢，難以滿足市場(chǎng)需求。同時(shí)，因?yàn)榛ㄩL(zhǎng)期經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖，病毒侵染嚴(yán)重，造成切花的商品品質(zhì)下降。近年來(lái)，人們逐漸開(kāi)始重視康乃馨的快速繁殖，并有多篇報(bào)道現(xiàn)世。為解決康乃馨生產(chǎn)上的問(wèn)題，采用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)植物組織培養(yǎng)康乃馨優(yōu)良新品種。最常使用的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，這2類(lèi)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在植物生長(zhǎng)過(guò)程中起到重要作用。生長(zhǎng)素包括：1-萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）等；細(xì)胞分裂素包括6-芐基腺嘌呤（6-BA）及玉米素等。本次實(shí)驗(yàn)使用NAA、6-BA、2，4-D 3種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)康乃馨進(jìn)行組織培養(yǎng)，以期為康乃馨組織培養(yǎng)生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

生長(zhǎng)旺盛無(wú)病害的康乃馨小型盆栽。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基配制方法

1.2.1.1 植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基的配制

按照比例配置好培養(yǎng)基原液，并將原液均分，往液體中滴加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，本次實(shí)驗(yàn)共配制3種不同濃度的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基3種，分別為：①6-BA 2.0；②6-BA 2.0+NAA 0.5；③6-BA 2.0+NAA 1.0；。均勻攪拌后將各種培養(yǎng)基分裝至培養(yǎng)瓶，并貼上對(duì)應(yīng)標(biāo)簽進(jìn)行滅菌。

1.2.2 無(wú)菌操作

1.2.2.1 操作準(zhǔn)備

將培養(yǎng)基、無(wú)菌水、及各種接種用具放入超凈工作臺(tái)，打開(kāi)紫外燈，照射消毒20～30 min后，打開(kāi)無(wú)菌風(fēng)開(kāi)關(guān)，關(guān)紫外燈，打開(kāi)照明日光燈。清洗雙手，用棉花吸取75%酒精擦手，自?xún)?nèi)向外擦拭超凈臺(tái)，點(diǎn)燃酒精燈。

1.2.2.2 外植體消毒

選取康乃馨健康新鮮莖段或葉片為外殖體，用剪刀切取所需組織，將植物組織在70%～75%酒精中浸泡消毒30 s，之后移入0.1%升汞溶液浸泡10 min，在超凈臺(tái)內(nèi)用無(wú)菌水沖洗5～6次后即完成外植體消毒過(guò)程。

1.2.2.3 外植體的接種

叢生芽誘導(dǎo)接種：在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)將消毒好的康乃馨接種材料在培養(yǎng)皿內(nèi)用無(wú)菌濾紙吸去多余水份，借助剪刀剪取長(zhǎng)度約1 cm左右?guī)в星o節(jié)莖段，用鑷子將莖段一半斜插入培養(yǎng)基中，蓋好瓶蓋。以上無(wú)菌操作均需在酒精燈火焰旁進(jìn)行。

1.2.3 培養(yǎng)及記錄

將接種后培養(yǎng)瓶放入恒溫光照箱中培養(yǎng)，溫度（28±1）℃ 、光強(qiáng)2 000～2 500 Ix、每天光照14 h，愈傷組織需遮光培養(yǎng)。每周固定時(shí)間取出培養(yǎng)瓶查看植物組織生長(zhǎng)情況清除染菌培養(yǎng)瓶并記錄數(shù)據(jù)并制成表格。

2 結(jié)果與分析

2.1 6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比對(duì)康乃馨叢生芽誘導(dǎo)的影響

從生長(zhǎng)狀態(tài)來(lái)看，單獨(dú)添加6-BA時(shí)，叢生芽生長(zhǎng)狀況不佳，芽小而疏松。當(dāng)培養(yǎng)基中添加的6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為2：1或4：1時(shí)，叢生芽生長(zhǎng)狀況良好，芽強(qiáng)壯而密集，且接種莖段成活率較高，生長(zhǎng)旺盛。從出芽率來(lái)看，單獨(dú)添加6-BA時(shí)出芽率為75%，出芽率介于添加6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為4的培養(yǎng)基與6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為2的培養(yǎng)基之間；添加6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為4的培養(yǎng)基出芽率最高，為90%；添加6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為4的培養(yǎng)基出芽率最低，約為57.1%。因此本實(shí)驗(yàn)證明，合適的6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比有助于康乃馨叢生芽的誘導(dǎo)，但添加NAA的培養(yǎng)基不一定有助于康乃馨叢生芽的誘導(dǎo)。

2.2 分析

本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果與孫駿威等和沈?qū)帠|等的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有較大出入。他們實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為2：1和4：1都有助于康乃馨叢生芽的誘導(dǎo)，從生長(zhǎng)狀況與出芽率方面考慮，2種實(shí)驗(yàn)方案都相差不大。經(jīng)反思，認(rèn)為所得結(jié)果與他人不同的原因可能為實(shí)驗(yàn)材料的限制，如培養(yǎng)瓶數(shù)量少要平均分配給11種不同濃度溶液配制叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基、愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基和分化培養(yǎng)基，且接種中部分培養(yǎng)基染菌，故培養(yǎng)數(shù)量不夠大，且只配置了3種不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑質(zhì)量濃度配比的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，造成結(jié)果不夠準(zhǔn)確，下次實(shí)驗(yàn)時(shí)需要改進(jìn)。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)分別研究了6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比、NAA質(zhì)量濃度搭配、6-BA和2，4-D質(zhì)量濃度配比對(duì)康乃馨叢生芽誘導(dǎo)的影響。從結(jié)果得知，6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比對(duì)康乃馨叢生芽誘導(dǎo)具有明顯促進(jìn)效果，且6-BA和NAA質(zhì)量濃度配比為4：1的時(shí)候具有最佳出芽效果，出芽率約為90%；但因?yàn)閷?shí)驗(yàn)時(shí)間以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境限制等問(wèn)題，對(duì)康乃馨出芽率造成了較大的影響，這也提醒在日常的生產(chǎn)生活中，康乃馨需要大量時(shí)間以及適宜的環(huán)境進(jìn)行組織培養(yǎng)，并且培養(yǎng)量較大時(shí)出芽率應(yīng)會(huì)稍微提高，偏差較小。本次實(shí)驗(yàn)成功證明了植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)康乃馨植物組織培養(yǎng)具有顯著促進(jìn)作用，2種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑共同作用能有效提高叢生芽出芽率，可運(yùn)用在生產(chǎn)變異新種康乃馨植株中，本實(shí)驗(yàn)也將繼續(xù)培養(yǎng)觀察康乃馨，能為今后大批利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)觀賞康乃馨提供理論及技術(shù)上的支持。

參考文獻(xiàn)

[1]王蓮英，朱秀珍，虞佩珍.中國(guó)名貴花卉鑒賞與栽培[M].合肥：安徽科學(xué)技術(shù)出版社，1997：77-79.

[2]聶慶娟，王進(jìn)茂，梁海勇，等.康乃馨的繁殖[J].河北林果研究，1997，（1）：50-52.

（責(zé)任編輯：趙中正）