★ 涂秀英 李瑛 魏學(xué)鑫 于梅 徐國(guó)良 章常華*

(1.江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 江西 南昌 330004；2.江西中醫(yī)藥大學(xué)現(xiàn)代中藥制劑教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 江西 南昌 330004)

葡萄糖含量測(cè)定的方法有葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)法、己糖激酶法、干化學(xué)試紙法等多種，其測(cè)得結(jié)果同時(shí)也受多種因素影響[1,2]。葡萄糖氧化酶(GOD)法以其經(jīng)濟(jì)、實(shí)用而作為葡萄糖含量測(cè)定的常規(guī)方法，葡萄糖氧化酶(GOD)法可能是非特異性的，因?yàn)檫@種方法容易被一些還原劑干擾而出現(xiàn)假陽性，如黃芩苷；也可能被其它一些物質(zhì)干擾，本文現(xiàn)就GOD法測(cè)定葡萄糖含量時(shí)是否受小檗堿和黃芩苷的干擾進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 倒置顯微鏡(德國(guó)Leica公司)；Bio-Tek ELX800酶標(biāo)儀(Gene Company Limited)；三洋MCO-175 CO2培養(yǎng)箱(日本SANYO公司)。

1.1.2 試劑 胎牛血清(Hyclone公司，批號(hào)：NWA0362)；高糖DMEM培養(yǎng)基(Hyclone公司，批號(hào)：NWK0484)；葡萄糖試劑測(cè)定盒(中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)：1110131)；黃芩苷(中國(guó)藥品生物制品檢定所(中檢所)，批號(hào)：110715-201016)；鹽酸小檗堿(中檢所，批號(hào)：110713-200911)。

1.2 方法

1.2.1 干擾物配置 鹽酸小檗堿溶液：配成溶度為1.0μmol/mL的溶液，鹽酸小檗堿的分子量為371.82，取0.37182mg的鹽酸小檗堿，溶于1mL培養(yǎng)基中即得；臨用時(shí)取10μL加入90μL培養(yǎng)基中，即為培養(yǎng)基終濃度為100μmol/L，用DMEM將其倍比稀釋成各濃度梯度，將配制好的各濃度藥物無菌過濾備用。

黃芩苷溶液：配成溶度為1.0μmol/mL的溶液，黃芩苷分子量為446.37，取0.44637mg黃芩苷，溶于1mL培養(yǎng)基中即得；臨用時(shí)取10μL加入90μL培養(yǎng)基中，即為培養(yǎng)基終濃度為100μmol/L，用DMEM將其倍比稀釋成各濃度梯度，將配制好的各濃度藥物無菌過濾備用。

1.2.2 測(cè)定對(duì)照含血清培養(yǎng)基組和加入不同濃度小檗堿和黃芩苷的干擾含血清培養(yǎng)基組葡萄糖含量 實(shí)驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)[3-5]的基礎(chǔ)上加以改進(jìn)，用葡萄糖氧化酶法分別測(cè)定對(duì)照組和干擾組的葡萄糖含量，每份分別測(cè)定3次，取平均值。分析小檗堿和黃芩苷分別對(duì)葡萄糖氧化酶法的干擾作用。

2 結(jié)果

小檗堿和黃芩苷對(duì)葡萄糖氧化酶法的干擾作用(見表1和表2)，由結(jié)果可知，小檗堿(高糖培養(yǎng)基)或黃芩苷(高糖培養(yǎng)基)與對(duì)照組(高糖培養(yǎng)基)比較，沒有顯著差異(P>0.05)，小檗堿(低糖培養(yǎng)基)或黃芩苷(低糖培養(yǎng)基)與對(duì)照組(低糖培養(yǎng)基)比較，也沒有顯著差異(P>0.05)，同時(shí)，小檗堿或黃芩苷組干擾度均小于5%。

表1 小檗堿對(duì)葡萄糖氧化酶法的干擾作用

表2 黃芩苷對(duì)葡萄糖氧化酶法的干擾作用

3 討論

小檗堿是中藥黃連的主要有效成分之一，故鹽酸小檗堿又稱黃連素。在治療消渴的方劑配伍中，不少含有黃連[6]。小檗堿可增加3T3-L1脂肪細(xì)胞葡萄糖吸收[7]，可改善葡萄糖代謝[8,9]。黃芩苷是從清熱解毒中藥黃芩中提取的一種黃酮類化合物，具有抗菌、消炎和抗感染等藥理作用[10]。黃芩苷在一定的劑量范圍內(nèi)能降低糖尿病鼠的血糖[11,12]。氧化酶法常用于測(cè)定血糖或葡萄糖消耗量，如果用該方法測(cè)定血糖或葡萄糖消耗量時(shí)，我們應(yīng)考慮還原性物質(zhì)及其它可能的干擾物，排除干擾為基礎(chǔ)或臨床試驗(yàn)提供準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。通過本次實(shí)驗(yàn)可以看出，小檗堿和黃芩苷對(duì)氧化酶法測(cè)定血糖在濃度1～200μmol/L范圍之內(nèi)沒有顯著干擾作用。

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