★ 聶秀霞 曾文雪 莫國棟 何婉敏 黃佩珊
(1.中山市第二人民醫(yī)院 廣東 中山 528400;2.江西中醫(yī)藥大學 江西 南昌 330006)
氯霉素爐甘石洗劑是我院研制的皮膚科用藥之一,其由氯霉素、爐甘石、氧化鋅等組成,具有抗菌、消炎、止癢、收斂等作用,在無滲出性皮炎、濕疹、痱子、普通型痤瘡中廣泛應用。由于爐甘石、氧化鋅易沉淀,造成灌裝均勻度差異較大,傳統(tǒng)測定方法通常采用絡(luò)合滴定法測定其氧化鋅的含量作為控制其質(zhì)量的標準之一[1],但是由于絡(luò)合滴定法操作繁瑣,人為誤差大,更增加了其含量的差異性,近年來,楊連菊[2,3],張軍[4]等采用紫外-可見分光光度法測定氧化鋅的含量,取得了較好的效果,本文亦采用紫外-可見分光光度法測定氧化鋅的含量,該方法靈敏度高、簡單、易操作,可以作為控制其質(zhì)量的標準之一。
1.1 儀器 紫外-可見分光光度計(UV-1800,日本島津)。
1.2 試藥 氧化鋅對照品(中國藥品生物制品鑒定所,批號:111619-200301),鋅試劑(國藥集團化學試劑有限公司,批號F20100802),氫氧化鈉、氯化鉀、鹽酸、硼酸等試劑均為分析純,氯霉素爐甘石洗劑及氯霉素爐甘石陰性洗劑(不加氧化鋅及爐甘石的氯霉素爐甘石洗劑)均為本醫(yī)院制劑室自己配制,所用爐甘石及氧化鋅原料均為國藥準字號。
稀鹽酸試液:精密量取鹽酸23.4mL,加蒸餾水稀釋至100mL即得。氫氧化鈉試液:準確稱取氫氧化鈉4.3g,加蒸餾水溶解至100mL即得。硼酸-氯化鉀緩沖液(pH=9.0):取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化鉀溶液500mL使溶解,再加0.1mol/L氫氧化鈉溶液210mL即得。鋅試劑溶液:取鋅試劑0.13g,加氫氧化鈉試液2mL使溶解,再加蒸餾水至100mL即得。
2.1 試液的制備
2.1.1對照品溶液的制備 精密稱取氧化鋅對照品0.05g,置100mL量瓶中,加稀鹽酸10mL,振搖,至氧化鋅完全溶解,再加水至100mL。精密量取10mL,置100mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,備用。
2.1.2 供試品溶液的制備 將樣品溶液搖勻,精密量取1mL,置100mL量瓶中,用濾紙擦去外壁的附著物,用量取好的稀鹽酸(40mL)洗凈移液管內(nèi)壁的附著物,然后加入剩余量的稀鹽酸,充分振搖,使沉淀物不再繼續(xù)溶解,加水至刻度,搖勻,濾過,棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液5mL,置100mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得。
2.1.3 陰性對照溶液的配制 將氯霉素爐甘石陰性洗劑搖勻,照2.1.2項下從精密量取1mL開始,平行操作。
2.1.4 顯色 精密吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各2mL,分別置50mL量瓶中,各精密加入硼酸氯化鉀緩沖液(pH=9.0)10mL與鋅試劑溶液3mL,用水稀釋至刻度,搖勻,在暗處放置1h,測定其吸光度。
2.2 檢測波長的選擇與線性范圍
2.2.1 檢測波長的選擇 取顯色好的對照品溶液、供試品溶液及陰性對照液,搖勻,分別在400~800nm掃描其吸收光譜,對照品溶液及供試品溶液均在620±1nm處有最大吸收,陰性對照液在此處幾乎無吸收。因此選擇620nm為檢測波長。
2.2.2 線性范圍 精密量取氧化鋅對照品溶液0.5,1.0,2.0,3.0,5.0mL及陰性對照溶液分別置50mL量瓶中,按照2.1.4項下從各精密加入操作,早620nm處測定其吸光度,以濃度(X)為橫坐標,吸光度(Y)為縱坐標,進行回歸,得回歸方程Y=0.2743X-0.0444(r=0.9962),說明線性關(guān)系良好。
2.3 測定方法 取6批氯霉素爐甘石樣品,按照2.1.2項下方法配制,2.1.4項下方法顯色,按照紫外分光光度法,在620nm波長處分別測定吸光度,計算其含量。
2.4 方法學考察
2.4.1 精密度實驗 精密量取供試品(批號20120714)1mL,按照2.1.2項下方法配制,2.1.4項下方法顯色,在620nm處測定吸光度3次,RSD為0.17%,表明儀器精密度良好。
2.4.2 重復性實驗 精密量取同一樣品3份,每份1mL,按照2.1.2項下方法配制,2.1.4項下方法顯色,在620nm處測定吸光度3次,RSD為1.57%,表明樣品制備方法重復性良好。
2.4.3 穩(wěn)定性實驗 取同一樣品,精密量取,按照2.1.2項下方法配制,2.1.4項下方法顯色,分別在0,15,30,60,90,120min測定其吸光度,RSD為0.53%,表明樣品在120min中內(nèi)穩(wěn)定。
2.4.5 加樣回收率試驗 取已知含量的制劑(批號20120714)6份,精密量取1mL,分別精密加入干燥的對照品約20mg,按照2.1.2項下方法配制,2.1.4項下方法顯色,測定吸光度,含量平均回收率的RSD1.79%.
2.4.6 樣品測定 6批樣品中氧化鋅的平均含量為11.42g/瓶,RSD=3.86%,結(jié)果見表1。
表1 6批樣品中氧化鋅含量
爐甘石制劑由于易沉淀,給制備工藝帶來一定的難度,同時由于其含量差異較大,也給質(zhì)量控制帶來了一定的難度,《中國藥典》一直以絡(luò)合滴定法測定氧化鋅的含量,滴定法由于所加指示劑因加入量、指示終點與等當量間、操作者對顏色判斷等引起誤差,相對誤差較大。近年來,楊連菊、張軍等采用分光光度法測定氧化鋅的含量,分光光度法較滴定法,具有準確性好、靈敏度高的優(yōu)點,相對減少了滴定法的人為誤差,本文選用紫外可見分光光度法測定氯霉素爐甘石中氧化鋅的含量,其準確性,精密度、重復性均較好,可用于該制劑的質(zhì)量控制。
[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[S].北京:化學工業(yè)出版社,2010:附錄.
[2]楊連菊,馮學峰,徐子芳,等.爐甘石藥材及飲片中氧化鋅紫外-可見測定方法研究[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(22):89-91.
[3]楊連菊,馮學峰,徐子芳,等.紫外-可見分光光度法測定馬應龍痔瘡膏中氧化鋅的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(21):60-62.
[4]張軍,梁愛君,陳新善,等.分光光度法測定復方氧化鋅洗劑中氧化鋅的含量[J].解放軍藥學學報,2002,18(4):248-250.